第二十一章 結(jié)核(1)(1)

1、第14章分枝桿菌屬,(Mycobacterium)P150,主要特點(diǎn),◆分枝桿菌屬(Mycobacterium)是一類細(xì)長(zhǎng)微彎的桿菌，因有分枝生長(zhǎng)的趨勢(shì)而得名。◆細(xì)胞壁含有大量脂質(zhì)，主要是分枝菌酸 ◆抗酸染色，故又稱抗酸桿菌(acid-fast bacilli)◆生長(zhǎng)大多緩慢◆致病多為慢性，有肉芽腫形成,,對(duì)人致病的分枝桿菌有,,結(jié)核桿菌,麻風(fēng)桿菌,非結(jié)核分枝桿菌,結(jié)核分枝桿菌,(Mycobacterium tuberculo

2、sis),態(tài)生兩靨之愁，嬌襲一身之病。淚光點(diǎn)點(diǎn)，嬌喘微微。閑靜時(shí)如姣花照水，行動(dòng)時(shí)如弱柳扶風(fēng)。,癆病,◆結(jié)核病◆世界上1/3人感染，70%在亞洲◆世界防治結(jié)核病日(3月24),結(jié)核分枝桿菌,,1.形態(tài)與染色,◆細(xì)長(zhǎng)略帶彎曲，細(xì)胞壁脂質(zhì)含量較高◆抗酸染色陽(yáng)性◆有莢膜,一.生物學(xué)性狀,,齊尼（Ziehl-Neelsen)抗酸染色法,5%石炭酸復(fù)紅加溫染色,3%鹽酸酒精脫色,美藍(lán)復(fù)染,,染成紅色,抗酸菌不被脫色，仍保持紅色,

3、抗酸菌染成紅色,非抗酸菌被復(fù)染成藍(lán)色,,,,,,,2.培養(yǎng)特性,◆專性需氧◆營(yíng)養(yǎng)要求高——羅氏（Lowenstein-Jensen） 固體培養(yǎng)基◆生長(zhǎng)緩慢：18～24h/代，一般2～4周可見(jiàn)菌落生長(zhǎng),,菌落特點(diǎn):,呈顆粒、結(jié)節(jié)或花菜狀，乳白色或米黃色，不透明，表面粗糙,,結(jié)核桿菌培養(yǎng),3.抵抗力,,四不怕,◆對(duì)干燥的抵抗力特別強(qiáng)◆結(jié)核分枝桿菌對(duì)酸（3% HCl或6% H2SO4) 或堿（4% Na

4、OH) 有抵抗力，15min不受影響◆對(duì)堿性染料有抵抗力◆對(duì)青霉素等抗生素耐藥,四怕,◆對(duì)乙醇敏感——在70%乙醇中2min死亡◆對(duì)濕熱敏感——62～630C 15min殺死（巴氏消毒）◆對(duì)紫外線敏感◆對(duì)鏈霉素、異煙肼、利福平、環(huán)絲氨酸、乙胺丁醇、卡那霉素、對(duì)氨基水楊酸等抗癆藥物敏感，但長(zhǎng)期用藥容易出現(xiàn)耐藥性,,3.變異性,,(1) 毒力變異——BCG,卡介苗（BCG)——Calmette和Guerin 2人(1908)將牛型

5、結(jié)核分枝桿菌在含甘油、膽汁、馬鈴薯的培養(yǎng)基中經(jīng)13年230次傳代而獲得的減毒活疫苗株，現(xiàn)廣泛接種用于預(yù)防結(jié)核。,(2) 耐藥性變異,異煙肼耐藥與katG基因丟失有關(guān),利福平耐藥與rpoB基因突變有關(guān),,,(3) L型變異,1.致病物質(zhì),脂質(zhì)蛋白質(zhì),二、致病性,,,,脂質(zhì),◆索狀因子——液體培養(yǎng)基中呈蜿蜒生長(zhǎng)損傷線離體膜、抑制WBC游走、引起慢性肉芽腫；◆磷脂——促使結(jié)核結(jié)節(jié)形成;◆硫酸腦苷脂——抑制吞噬細(xì)胞中吞噬體與溶酶體的結(jié)

6、合，MTB為胞內(nèi)寄生菌； ◆蠟質(zhì)D——可激發(fā)遲發(fā)超敏反應(yīng)，引起機(jī)體損傷,,——細(xì)菌毒力最密切相關(guān)的菌體成份,蛋白質(zhì),◆有抗原性，和蠟質(zhì)D結(jié)合后能使機(jī)體發(fā)生超敏反應(yīng)◆在形成結(jié)核結(jié)節(jié)中發(fā)揮一定作用,,2.所致疾病,◆感染方式呼吸道、消化道或皮膚損傷侵入機(jī)體◆所致疾病疾病種類多樣化肺結(jié)核最常見(jiàn),,肺部感染,◆原發(fā)感染多發(fā)生于兒童原發(fā)綜合征形成結(jié)核結(jié)節(jié)（即結(jié)核肉芽腫）轉(zhuǎn)歸◆原發(fā)后感染,,1.免疫機(jī)制,◆ MTB屬胞內(nèi)感染

7、菌，其免疫主要是以T細(xì)胞為主的細(xì)胞免疫◆結(jié)核的免疫屬于感染免疫(infection immunity)，又稱有菌免疫,三、免疫性,,2.免疫與超敏反應(yīng),◆細(xì)胞免疫為主,遲發(fā)型超敏反應(yīng)同時(shí)存在◆郭霍現(xiàn)象再感染時(shí)潰瘍淺、易愈合、不擴(kuò)散，表明機(jī)體已有一定免疫力但再感染時(shí)潰瘍發(fā)生快，說(shuō)明在產(chǎn)生免疫的同時(shí)有超敏反應(yīng)的參與◆結(jié)核分枝桿菌誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫和超敏反應(yīng)的物質(zhì),結(jié)核菌素蛋白和蠟質(zhì)Ｄ,,核糖體RNA,,,有毒MTB,,,正常豚鼠,

8、,10-14天,局部潰爛,,壞死、經(jīng)久不愈,,全身擴(kuò)散,感染過(guò)或已免疫豚鼠,,1-2,天局部紅腫、淺潰爛,,不擴(kuò)散、易愈合,3.結(jié)核菌素試驗(yàn),,(1) 含義,結(jié)核菌素試驗(yàn)——是根據(jù)MTB感染、免疫、變態(tài)反應(yīng)三者共存的原理，應(yīng)用結(jié)核菌素進(jìn)行皮膚試驗(yàn)來(lái)測(cè)定機(jī)體對(duì)結(jié)核分枝桿菌是否能引起超敏反應(yīng)，從而推測(cè)機(jī)體有無(wú)相應(yīng)免疫力的一種試驗(yàn)。,(2) 試劑,舊結(jié)核菌素（old tuberculin,OT）,純蛋白衍化物(purified protein

9、 derivative,PPD) PPD有兩種，即人結(jié)核分枝桿菌制成的PPD-C和卡介苗制成的BCG-PPD。,(3)試驗(yàn)方法與結(jié)果判定,目前多采用PPD法，分別取PPD-C和BCG-PPD 5U注射于兩前臂皮內(nèi)注射48～72h后，觀察結(jié)果：紅腫硬結(jié)＞5mm者為陽(yáng)性紅腫硬結(jié)≥15mm為強(qiáng)陽(yáng)性,陽(yáng)性反應(yīng)：表示感染過(guò)MTB（如隱性感染）或接種過(guò)BCG,強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)：提示有MTB活動(dòng)性感染,陰性反應(yīng)：表明未感染過(guò)結(jié)核分枝桿菌,兩側(cè)紅腫硬

10、結(jié)中，若PPD-C側(cè)大于BCG-PPD側(cè)時(shí)為感染，反之則為卡介苗接種所致。,(4) 結(jié)核菌素試驗(yàn)用途,,◆篩選BCG接種對(duì)象；◆檢測(cè)BCG免疫效果；◆輔助結(jié)核病的診斷；◆測(cè)定機(jī)體的細(xì)胞免疫；◆流行病學(xué)調(diào)查。,四. 微生物學(xué)檢查法,,1. 標(biāo)本采集：,2. 直接涂片鏡檢,3. 分離培養(yǎng),4. 動(dòng)物試驗(yàn),5. 快速診斷,預(yù) 防,五.防治原則,◆控制傳染源 ——及時(shí)發(fā)現(xiàn)和治療結(jié)核病人；◆提高對(duì)MTB的抵抗力——接