體外擴(kuò)增對(duì)臍血cd13339;細(xì)胞歸巢相關(guān)分子表達(dá)的影響的研究

1、．蠶．能夭晉碩士學(xué)位論文( 2 0 0 6 屆)體外擴(kuò)增對(duì)臍血C D l 3 3 + 細(xì)胞歸巢相關(guān)分子表遮的影響的研究S t u d y o n t h e e l f e e l so f e x v i v o e x p a n s i o n o n t h eh o m i n g —r e l a t e dm o l e c u l e s e x p r e s s i o no f U C B C D l 3 3 +

2、c e l l s研究生姓名——叢垂垂指導(dǎo)教師姓名 堂! I 塾籃)專業(yè)名稱 立壁壘壅莖研究方向 魚壘疸盟些墨} 當(dāng)，墮盎型五～．論文提交1 3 期 ；Q 逝±i 旦體外擴(kuò)增對(duì)臍血C D l 3 3 + 細(xì)胞歸巢相關(guān)分子表達(dá)的影響的研究 中文摘要受體的表達(dá)。結(jié)果1 ． 擴(kuò)增前的新鮮臍血中，C D l 3 3 + 細(xì)胞的含量為0 ．5 8 + 0 ．2 9 ％，經(jīng)M A C S方法分離純化后，單份臍血可獲得1 ．2 2 a ：0

3、 ．6 8 x 1 0 6 個(gè)C D l 3 3 + 細(xì)胞，純度為9 5 ．0 2 - - 1 = 2 ．4 0 ％。2 ． 經(jīng)在1 4 天的體外擴(kuò)增，各階段的H S P C 均得到有效擴(kuò)增；至1 4 天時(shí)，總有核細(xì)胞數(shù)和C D l 3 3 + 細(xì)胞數(shù)分別擴(kuò)增了6 1 3 ．4 8 倍和2 5 ．8 3倍，表達(dá)相關(guān)粘附分子的各C D l 3 3 + 細(xì)胞亞群均有不同程度的擴(kuò)增。3 ．9 0 ％以上的臍血C D l 3 3 + 細(xì)胞表達(dá)粘

4、附分子C D 4 9 d ，C D 5 4 和C D 3 1 ，5 0 ％左右的臍血C D l 3 3 + 細(xì)胞表達(dá)粘附分子C D l l a ，2 0 ％左右的臍血C D l 3 3 + 細(xì)胞表達(dá)粘附分子C D 6 2 L 。擴(kuò)增早期C D 5 4 、C D l l a 和C D 6 2 L表達(dá)上調(diào)，而C D 4 9 d 和C D 3 1 的表達(dá)無明顯變化，隨著擴(kuò)增時(shí)間的延長，各粘附分子的表達(dá)均有不同程度的下調(diào)。4 ． 擴(kuò)增后C D

5、l 3 3 + C X C R 4 + 細(xì)胞的數(shù)量也明顯增加，但是趨化因子受體C X C R 4 在C D l 3 3 + 細(xì)胞上的表達(dá)卻于擴(kuò)增4 天時(shí)呈下降趨勢(shì)，1 0 天、1 4 天時(shí)顯著低于擴(kuò)增前細(xì)胞水平( p < 0 ．0 5 ) 。結(jié)論1 ． 采用M i n i M A C S 分離方法，經(jīng)兩次免疫磁珠親和過柱分離后，可獲得純度達(dá)9 5 ．0 2 _ + 2 ．4 0 ％的C D l 3 3 + 細(xì)胞，提示這是一種從臍血

6、中分選C D l 3 3 + 造血干／祖細(xì)胞的高效而實(shí)用的方法。2 ． 經(jīng)有核細(xì)胞計(jì)數(shù)以及流式細(xì)胞術(shù)等檢測(cè)手段證明，在含血清、無基質(zhì)細(xì)胞支持的條件下，采用S C F 、I L ．6 、T P O 及F L 組成的造血因子聯(lián)合擴(kuò)增系統(tǒng)，對(duì)T N C 及C D l 3 3 + 造血干／祖細(xì)胞均有顯著擴(kuò)增效果。3 ． 在此擴(kuò)增體系中，隨著擴(kuò)增時(shí)間的延長，所有的粘附分子以及趨化因子受體的表達(dá)均有不同程度的下降；而細(xì)胞因子短期刺激( 4 到7T