敬釗纓毛蛛毒素v與kv4.3鉀通道相互作用機制研究

1、湖南師范大學(xué)碩士學(xué)位論文敬釗纓毛蛛毒素-V與Kv4.3鉀通道相互作用機制研究姓名：蔡麗君申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：曾雄智20100501值) 為4 2 5 ．1n M 。J Z T X ．V 還能夠使通道的電流電壓關(guān)系曲線和穩(wěn)態(tài)失活曲線分別向去極化方向漂移大約2 9m V 和1 0 m V 來改變鉀通道亞型K v 4 ．3 的動力學(xué)特征。突變體研究結(jié)果表明突變體W 5 A ．J Z T X ．V對K v 4

2、．3 鉀通道的抑制作用下降3 8 倍，突變體E 1 7 A ．J Z T X ．V 和K 2 7 A ．J Z T X ．V 對K v 4 ．3 鉀通道的抑制作用略有增強，但其他1 1 個單殘基突變體與三個剪切體( Y 1 ，1 2 9 ，1 2 8 1 2 9 ) 對K v 4 ．3 通道的抑制作用均沒有產(chǎn)生明顯的影響。由此，可以推測J Z T X - V 分子中第五位的色氨酸氨殘基是負責(zé)該毒素與K v 4 ．3 通道發(fā)生相互作用的關(guān)

3、鍵活性殘基。鑒于單殘基剪切體對通道的抑制作用沒有明顯改變，在對J Z T X ．V進行分子改造的時候，可以考慮將位于J Z T X ．V 分子上第l 位的酪氨酸殘基和第2 9 位的異亮氨酸殘基剪切，以節(jié)省生產(chǎn)的成本。為了進一步探索J Z T X ．V 與K v 4 ．3 通道相互作用的分子機制，運用點突變的方法設(shè)計和構(gòu)建了1 2 個K v 4 ．3 通道S 1 ．S 2 片段和S 3 b ．S 4片段的胞外連接環(huán)上的單點突變體，為用膜片