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1、揚州大學(xué)碩士學(xué)位論文番茄SSR,RAPD體系優(yōu)化及Tm-2基因的SCAR鑒定姓名:楊少軍申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):蔬菜學(xué)指導(dǎo)教師:朱為民;薛林寶20060501楊少軍番茄S S R ,R A P D 體系優(yōu)化及T m .2 “基因的S C A R 鑒定 !番茄S S R ,R A P D 體系優(yōu)化及T m - 2 ”基因的S C A R 鑒定摘 要番茄( L y c o p e r m i c o ne s c u ] e n t u m
2、M i l l e r ) 是世界范圍內(nèi)廣泛種植的蔬菜之一,在世界農(nóng)業(yè)經(jīng)濟和農(nóng)業(yè)市場中占有重要的地位。其獨特的風(fēng)味、豐富的營養(yǎng)、鮮艷的色彩和特殊的醫(yī)用價值吸引著越來越多的消費者。年總產(chǎn)量己達8 0 0 0 萬噸以上。但是,長期以來番茄的生產(chǎn)受到許多病害的影響,其中T M V 、C M V 、葉霉病、枯萎病、根結(jié)線蟲病等是番茄生產(chǎn)中的主要病害。篩選和培育抗病品種是防治病害最為有效的方法。開展番茄抗T M V 基因的分子標(biāo)記和品種資源的抗病
3、鑒定評價工作,有助于建立番茄分子標(biāo)記輔助選擇育種體系,獲得更多的抗源材料,從而促進番茄抗病毒病遺傳育種水平的顯著提高。本研究的主要內(nèi)容和結(jié)論如下:1 、番茄S S R 體系的建立和優(yōu)化以部分番茄品種作為材料,對番茄S S R .P C R 反應(yīng)體系的中的M 9 2 + 、d N T P s 、T a qD N A 聚合酶濃度以及退火溫度和循環(huán)次數(shù)進行了探討,確立了適合番茄S S R分析的技術(shù)體系:B u f f e r1 0 ×
4、;,M 9 2 + 3 .0 m m o l ·L ~,d N T P s 0 .5 m m o l ·L ~,T a qD N A聚合酶濃度0 .0 5 u ·uL 一,退火溫度5 8 。C ,循環(huán)次數(shù)3 5 次。2 、番茄R A P D 體系的建立和優(yōu)化以部分番茄品種為材料,對番茄R A P D 反應(yīng)體系的M 9 2 + 、d N T P s 、殆g D N A 聚合酶濃度,退火溫度和循環(huán)次數(shù)進行了探討
5、,確立了適合番茄植物R A P D 分析技術(shù)體系:B u f f e r1 0 ×,M g “2 .O m m o l ·L —I j d N T P 0 .5 m m o l ·L ~,乃9D N A 聚合酶濃度l u ,退火溫度4 1 ℃,循環(huán)次數(shù)4 5 次。3 、番茄抗煙草花葉病毒T m _ 2 ”基因的克隆測序用抗T m 一2 ”的S C A R 標(biāo)記引物對含有抗T M V 病毒的材料擴增分析表明,
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