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1、上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文重組瘧疾疫苗抗原PfCP2.9發(fā)酵、純化工藝的優(yōu)化及產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)工藝路線的建立姓名:陳佩新申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):生物工程指導(dǎo)教師:李榮秀;黃秀東20100601上海交通大學(xué)生物工程碩士論文 和溶氧等發(fā)酵關(guān)鍵參數(shù)進(jìn)行了評(píng)價(jià)和優(yōu)化, 并確定高效表達(dá)目標(biāo)抗原的發(fā)酵條件為,誘導(dǎo)時(shí) pH6.5,溫度為 22℃,且在發(fā)酵培養(yǎng)物中加
2、入終濃度為 5mmol/L 的 EDTANa2時(shí),獲得的 PfCP2.9 蛋白的產(chǎn)量最高。收獲發(fā)酵液后,依次經(jīng)過(guò)疏水層析,切向流超濾脫鹽,陰離子交換層析,陽(yáng)離子交換層析和分子篩層析,可獲得純度大于 98%的目的蛋白 PfCP2.9。其中,第一步的疏水層析,是整個(gè)純化步驟的關(guān)鍵。因?yàn)橥ㄟ^(guò)疏水層析,不僅捕獲了目的蛋白,而且將目的蛋白和蛋白酶實(shí)現(xiàn)了有效的分離。 為進(jìn)一步推進(jìn)該候選抗原 PfCP2.9 的研究, 我們?cè)?GMP 車間中將發(fā)酵與純
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