基因重組白細胞介素-11發(fā)酵工藝及純化工藝研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該文系統(tǒng)的研究了重組大腸桿菌表達白細胞介素-11(IL-11)融合蛋白的發(fā)酵工藝條件.搖瓶實驗中,確定了以M9培養(yǎng)基為最佳高密度發(fā)酵培養(yǎng)基.同時,對誘導劑進行優(yōu)化,采用0.005g/L的IPTG就能有效的誘導外源基因表達,大大節(jié)約了成本.在10L發(fā)酵罐中,采用了流加方式進行了高密度發(fā)酵.嘗試了兩種培養(yǎng)基:一種是以葡萄糖為主要碳源,另一種是以甘油為主要碳源.得到最佳發(fā)酵條件為:溫度30度;誘導前pH為6.8-7.0,誘導后為7.2;在OD

2、<,600>為15左右時誘導,誘導后3.5個小時結(jié)束發(fā)酵.在以葡萄糖為主要碳源時,可得菌體濕重65g/L,干重8.4g/L,表達量為18﹪;在以甘油為主要碳源時,可得菌體濕重80g/L,干重9.2g/L,表達量為22﹪.同時,采用了人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)預測菌體生長曲線,有利于培養(yǎng)條件的確定.該文還詳細的研究了白細胞介素-11融合蛋白的親和純化工藝,主要涉及菌體破碎、平衡緩沖液對融合蛋白IL-11吸附的影響和融合蛋白IL-11的洗脫條件優(yōu)化等,經(jīng)

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