重組瘧疾疫苗pfcp2.9單克隆抗體的特性分析

1、第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文重組瘧疾疫苗PfCP-2.9單克隆抗體的特性分析姓名：吳媛申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：病原生物學(xué)指導(dǎo)教師：潘衛(wèi)慶20090501第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文剩下的1 2 株單抗不識(shí)別變性后的P f C P - 2 ．9 融合抗原，表明這些單抗識(shí)別的是構(gòu)象表位； ( 3 ) 單抗識(shí)別區(qū)域的分析：以本實(shí)驗(yàn)室制備的M S P I - 1 9 和美國(guó)N I H 提供的A M A 一1 標(biāo)準(zhǔn)品為抗原，用W e s t e r nb

2、 l o t 的方法對(duì)1 8 株單抗的特異性識(shí)別區(qū)域進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果為識(shí)另J M S P I - 1 9 的單抗共5 株，而識(shí)別A M A 一1 的單抗有8 株，剩余的5 株單抗既不識(shí)另J J M S P I - 1 9 ，也不識(shí)別A M A 一1 ，但識(shí)別P f C P 一2 ．9 融合蛋白； ( 4 ) 表位競(jìng)爭(zhēng)性分析：以P f C P 一2 ．9 為抗原，用競(jìng)爭(zhēng)E L I S A 方法先后用過(guò)量未標(biāo)記單抗和H R P ．標(biāo)記單抗與之

3、反應(yīng)，結(jié)果有4 對(duì)單抗出現(xiàn)相互競(jìng)爭(zhēng)，提示這4 對(duì)單抗可能識(shí)別同一表位或者是識(shí)別的表位在構(gòu)象上或者在識(shí)別序列上存在相互影響； ( 5 ) 單克隆抗體與瘧原蟲(chóng)天然蛋白反應(yīng)性：以處于成熟裂殖體期的惡性瘧原蟲(chóng)( F C C l ／H N株) 為抗原，以血涂片的形式用間接免疫熒光方法( I F A ) 對(duì)單克隆抗體的生物學(xué)活性進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果顯示：有8 株單抗能夠不同程度的與瘧原蟲(chóng)天然蟲(chóng)體反應(yīng)。( 6 ) 單抗體外抑制瘧原蟲(chóng)生長(zhǎng)的效力分析：在紅細(xì)胞

4、壓積到2 ％，起始原蟲(chóng)率為O ．5 ％的體系中，采用L D H 方法分別測(cè)定各單抗抑制瘧原蟲(chóng)生長(zhǎng)的效力。結(jié)果表明：當(dāng)單抗終濃度為0 ．5 m g ／m l 時(shí)，有6 株單抗不同程度抑制瘧原蟲(chóng)生長(zhǎng)。本研究對(duì)P f C P - 2 ．9 重組蛋白的一組單克隆抗體的特性進(jìn)行了初步分析。本研究的結(jié)果為開(kāi)展P f C P - 2 ．9 瘧疾疫苗免疫保護(hù)作用機(jī)制研究提供重要信息和基礎(chǔ)，繼而為設(shè)計(jì)和完善融合抗原瘧疾疫苗提供依據(jù)。關(guān)鍵詞：惡性瘧原蟲(chóng)，瘧