雞球蟲(chóng)e.tenella葉酸合成途徑關(guān)鍵酶pppkdhpscdna的克隆及其株間變異研究

1、湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文雞球蟲(chóng)E.tenella葉酸合成途徑關(guān)鍵酶PPPK-DHPS cDNA的克隆及其株間變異研究姓名：龔振興申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：劉毅;蔡建平20070601湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文A b s t r a c tI n t h i s p a p e r 。P P P K —D H P S g e n e s e q u e n c e o f ￡t e n e ] ] a h a s b e

2、e ns u c c e s s f u l l y p r e d i c t e d b y i n f o r m a t i c s ．T h e n ，b a s e d o n t h e p r e d i c t e ds e q u e n c e ，p p p k - d h p s O R F o f ￡t e n e ] l a i sa m p l i f i e df r o mg u a n g d o n

3、 g s t r a i n ．T h el e n g t h o fa m p l i f i e dp p p k - d h p sO R Fi s 2 0 0 1 b p ，w h i c hc o d ea p r o t e i nw i t h 6 6 6a m i n oa c i da s s a m e a s t h e p r e d i c tr e s u l t ．T h eG + Cc o n t e

4、n to fp p p k —d h p s O R Fi s 5 1 ．9 2 ％．A A 7 5 —2 2 5 i s P P P K c o n s e r v es e q u e n c e 。A A 3 5 0 - 6 3 5i sD H P Sc o n s e r v es e q u e n c ea n d t h e m i d d l e r e g i o ni sl i g a t er e g i o na

5、 c c o r d i n gt o P r o t e i n C o n s e r v e d D o m a i n s B l a s t a n a l y s i s ．C o m p a r e d w i t h o t h e rp r o t o z o a n s ．t h es i m i l a r i t yo f ￡t e n e l l a P P P K —D H P Sw h i c hh a v

6、 e 1 9 h i g h l yc o n s e r v e d b l o c k s i s 2 2 ．1 —3 8 ．5 ％．W h e n ￡t e n e l l a c o m p a r e d w i t h o t h e rp r o t o z o a n s ．T h eP P P K —D H P S 3 Ds t r u c t e r i s s i m i l a r i t y b y b l a

7、 s t i n P D B s u md a t e b a s e ．T h ec D N Af u l l l e n g t ho fp p p k - d h p si s 2 3 7 2b p ．5 7 一U T Ra n d37一U T R o fp p p k - d h p s i s 2 4 4b p a n d1 2 7b p ，r e s p e c t i v e l y ．T h es i m i l a r

8、 i t yo fp p p k - d h p s U T R r e g i o na m o n g E ．t e n e l ] a , P ．f a ] c i p a r u m a n dT ．g o n d i i a r e l o wb yS e q u e n c ea l i g n m e n ta n a l y s i s ．T h e s i m i l a r i t yo f c h i c k e

9、nP P P K —D H P S a m i n oa c i d s e q u e n c ea m o n g t h es u l f ’—d r u g s e n s t i v es t r a i n sa n dt h es u l f ——d r u gr e s i s t a n c es t r a i n si S f r o m9 9 ．1 ％t o9 9 ．9 ％．T h eD H P SA A 4 0

10、 3o fs h a n g h a i s t r a i na n dg a n s us t r a i nw h i c ha r et h e s u l f —d r u g r e s i s t a n c e s t r a i n sb o t h a r eA s p i n s t e a do f A s h ．T h em u t a t i o n ( A s p —A s n ) o f z g o n

11、d i i D H P S A M 0 7 w a s a s s c i a t e d w i t h t h es u l f —d r u g r e s i s t a n c e ，S O t h em u t a t i o n ( A s p —+ A s n ) o fs h a n g h a i s t r a i na n dg a n s u s t r a i n m a y b e t h e r e a