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1、小口徑人造血管由于易形成血栓、內(nèi)膜增生率高等問題易導(dǎo)致移植失敗,成為血管組織工程產(chǎn)品研究的瓶頸,而易形成血栓問題則是小口徑血管組織工程亟待解決的首要問題。近年來,殼聚糖/聚乙烯醇(CS/PVA)支架因其良好的生物相容性、生物可降解性在皮膚組織工程中引起了廣泛關(guān)注,其力學(xué)性能接近小口徑血管,而其在血管組織工程的應(yīng)用卻鮮有報(bào)道,究其原因在于其抑制血栓形成作用較差。研究發(fā)現(xiàn),海帶多糖(F)具有良好的抗凝血、抗血栓、免疫調(diào)節(jié)、抗炎等活性。所以本
2、文將兩者結(jié)合起來,用靜電紡絲法制備海帶多糖/殼聚糖/聚乙烯醇人造血管支架,研究復(fù)合材料的電紡特性及海帶多糖用于血管組織工程解決殼聚糖/聚乙烯醇血管支架易形成血栓問題的可行性。
本論文先進(jìn)行了海帶多糖的提取工藝優(yōu)化,再將海帶多糖與殼聚糖/聚乙烯醇結(jié)合,通過靜電紡絲法制備F/C S/P VA復(fù)合人造血管支架,優(yōu)化其制備工藝并進(jìn)行表征,最后通過血液凝集實(shí)驗(yàn)、血小板粘附實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)等評(píng)價(jià)電紡支架的生物相容性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明水提法是
3、海帶多糖的最佳提取方法,得率為12.5%,含量是52.7%;電紡研究顯示在CS/PVA質(zhì)量比為1:5,海帶多糖濃度為1.5%,注射速度為0.2mL/h,接收距為10cm,電壓為13kV的條件下制備的F/C S/P VA管狀支架表面均一光滑,具有良好的相互關(guān)聯(lián)的孔隙結(jié)構(gòu),說明海帶多糖復(fù)合材料的可電紡性;電紡支架798±58kPa的拉伸強(qiáng)度和37±2.2%的斷裂伸長(zhǎng)率與人體血管正常數(shù)值接近,滿足人造血管的要求;212±9.6%的溶脹率、90
4、.59±0.65%的孔隙率、120小時(shí)55.6±2.7%的 BSA釋放率和21天65.11±2.79%的降解率也表明海帶多糖/殼聚糖/聚乙烯醇支架用于血管組織工程的可行性;血液凝集實(shí)驗(yàn)中延長(zhǎng)到66.2s的TT和79.8s的APTT值表明1.5%的海帶多糖可以用來解決血管支架易形成血栓的問題;血小板粘附實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示海帶多糖的加入能有效地降低材料的血小板粘附率,進(jìn)一步降低了小口徑血管支架的血栓發(fā)生率;此外支架2.73±0.59%的溶血率也表
5、明支架良好的血液相容性;MTT實(shí)驗(yàn)85.8±7.2%的細(xì)胞活力結(jié)果表明1.5%F/CS/PVA支架具有較低的細(xì)胞毒性,且隨著海帶多糖含量的提高,細(xì)胞的相對(duì)增長(zhǎng)率上升,這表明海帶多糖的加入在一定程度上促進(jìn)了細(xì)胞的生長(zhǎng),進(jìn)一步改善了支架的生物相容性。
綜上所述,本研究證實(shí)可以通過靜電紡絲技術(shù)制備海帶多糖/殼聚糖/聚乙烯醇人造血管電紡支架,且構(gòu)建的1.5%F/CS/PVA電紡支架具有與天然血管相近的力學(xué)性能,優(yōu)良的抗凝血特性,良好的
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