抗腫瘤肽的設(shè)計(jì)及其活性和作用機(jī)理的研究.pdf

1、癌癥一直以來(lái)危害著全球人類的健康，每年造成許多人死亡。過(guò)去傳統(tǒng)的癌癥治療方法，比如放、化療和傳統(tǒng)的抗癌藥物，盡管取得了重大進(jìn)展，但對(duì)人類身體仍然有嚴(yán)重的副作用。所以近年來(lái)，許多科學(xué)家將抗癌藥物的研究重點(diǎn)放在了不良反應(yīng)少、活性高、不容易產(chǎn)生耐藥的多肽藥物上。同時(shí)，抗腫瘤肽(ACPs)也有不足之處，主要有兩點(diǎn)，一是容易被血液中的一些蛋白酶水解或者被內(nèi)皮系統(tǒng)吸收，導(dǎo)致穩(wěn)定性差。二是多肽的選擇性弱，容易對(duì)人體正常的活細(xì)胞會(huì)有一些毒副作用。藥物的

2、設(shè)計(jì)思路對(duì)ACPs的抗腫瘤活性、穩(wěn)定性、選擇性有重要影響。通過(guò)氨基酸序列的設(shè)計(jì)，可以篩選出抗腫瘤活性極好的多肽。在母藥的基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)添加靶向肽段，設(shè)計(jì)雙親性自組裝多肽，可以提高抗腫瘤多肽的穩(wěn)定性和靶向性。
　　本文對(duì)設(shè)計(jì)的抗腫瘤活性多肽（LA-2和IL多肽系列）的抗癌活性與其殺死腫瘤細(xì)胞的機(jī)理做了一定研究。I-L氨基酸對(duì)在多肽抗腫瘤活性中起著重要作用。以ZXR-2為母板設(shè)計(jì)一系列突變多肽（IL系列，ZXR-3），這些多肽內(nèi)存在I-

3、L氨基酸對(duì)，類似于亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)。亮氨酸與異亮氨酸都是疏水性氨基酸，相差七個(gè)氨基酸。當(dāng)多肽與疏水性細(xì)胞膜接觸時(shí)，不同多肽的異亮氨酸I和亮氨酸L相互作用形成類似亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)，有助于多肽在細(xì)胞膜上的聚集，產(chǎn)生殺死細(xì)胞毒性。通過(guò)MTT細(xì)胞毒性試驗(yàn)驗(yàn)證了I-L氨基酸對(duì)在細(xì)胞毒性有重要影響。KI的熒光猝滅實(shí)驗(yàn)以及多肽與細(xì)胞膜相互作用表面壓力的測(cè)定，我們確定ZXR-2多肽從C端插入，插膜深度在W11位，并推斷了ZXR-2（抗腫瘤肽）的作用機(jī)理。<

4、br>　　設(shè)計(jì)的LA-2(CRGDKGPDCGKAFRRFLGALFKALSHLL)為靶向抗腫瘤肽，分為三個(gè)部分，包括靶向肽段，連接肽段和功能肽。CRGDKGPDC為靶向肽段。靶向過(guò)表達(dá)的膜蛋白整合素αvβ3，連接肽段序列為GKAFRR，在腫瘤特異蛋白酶人激肽釋放酶2(hK2)存在的情況下被水解斷裂，分離出有抗癌活性的母藥。利用掃描電鏡和透射電鏡，發(fā)現(xiàn)LA-2能在水環(huán)境下自組裝形成納米級(jí)的膠束。通過(guò)LB膜分析儀測(cè)定其臨界膠束濃度，利用血