2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、抗性淀粉、低聚木糖和菊糖三種膳食纖維可以被腸道微生物發(fā)酵,產(chǎn)生有益健康的短鏈脂肪酸。乳酸菌有助于膳食纖維的腸道發(fā)酵,維持宿主腸道的微生態(tài)平衡,促進短鏈脂肪酸的生成,主要是乙酸、丙酸和丁酸,對維持腸道正常代謝和機體健康十分有利,尤其是具有抗癌功效的丁酸的生成,有利于預防結(jié)腸癌。因此,有必要進一步分析與評估外源乳酸菌對膳食纖維發(fā)酵產(chǎn)酸的影響及發(fā)酵產(chǎn)物對結(jié)腸癌細胞的作用。本研究首先利用健康成人糞便提取物作為腸道菌群來源,在37℃厭氧條件下,分

2、別體外發(fā)酵三種膳食纖維(抗性淀粉、低聚木糖和菊糖),發(fā)酵時間為24 h和48 h,并分析短鏈脂肪酸(乙酸、丙酸、丁酸)和乳酸的產(chǎn)生情況;其次,將10株乳酸菌的培養(yǎng)液分別添加至發(fā)酵體系中,分析產(chǎn)酸情況;最后,通過細胞實驗,體外評估發(fā)酵產(chǎn)物對人結(jié)腸癌細胞HCT-116增殖和凋亡的影響。
  本研究主要內(nèi)容包括:⑴氣相色譜法和分光光度法分析發(fā)酵產(chǎn)物中的乙酸、丙酸、丁酸和乳酸含量,結(jié)果表明:隨著發(fā)酵時間的延長,3種膳食纖維發(fā)酵產(chǎn)物中的乙酸

3、、丙酸和丁酸含量均增加,乳酸含量先增加后減少,且這種有機酸生成隨時間變化的關(guān)系并不受乳酸菌添加的影響;未添加乳酸菌時,抗性淀粉發(fā)酵產(chǎn)生的丙酸較多,低聚木糖發(fā)酵產(chǎn)生的乙酸較多、乳酸較少,菊糖發(fā)酵產(chǎn)生的丁酸較多;添加乳酸菌后,8~10株乳酸菌促進3種膳食纖維發(fā)酵產(chǎn)生更多乙酸和丁酸;5~10株乳酸菌促進抗性淀粉和菊糖產(chǎn)生更多丙酸,只有2株乳酸菌促進低聚木糖產(chǎn)生丙酸;乳酸菌促進乳酸在24h大量生成,且含量在48明顯降低。說明多數(shù)乳酸菌可促進膳食

4、纖維發(fā)酵產(chǎn)物中短鏈脂肪酸的積累和乳酸的轉(zhuǎn)化。⑵CCK-8法評估發(fā)酵產(chǎn)物對細胞增殖抑制作用,結(jié)果表明:未添加乳酸菌時,抗性淀粉、低聚木糖和菊糖發(fā)酵產(chǎn)物對HCT-116細胞的增殖抑制率分別是35.4%~41.6%、66.2%~67.5%和61.4%~65.7%;添加乳酸菌后,相應產(chǎn)物對HCT-116細胞的增殖抑制率分別是42.4%~91.1%、63.4%~82.4%和48.5%~82.7%,整體上看,多數(shù)乳酸菌能夠提高發(fā)酵產(chǎn)物對細胞的增殖抑

5、制作用;相關(guān)性分析和驗證實驗結(jié)果都證明,添加乳酸菌后發(fā)酵產(chǎn)物中的丁酸越多,細胞增殖抑制率越大,乙酸、丙酸和總酸含量對抑制率影響不大,而較高的乳酸含量不利于發(fā)酵產(chǎn)物發(fā)揮增殖抑制作用。⑶DNA-Ladder實驗和流式細胞術(shù)評估發(fā)酵產(chǎn)物對細胞凋亡誘導作用,結(jié)果表明:基于增殖抑制實驗結(jié)果,篩選出的發(fā)酵產(chǎn)物能誘導HCT-116細胞凋亡,DNA發(fā)生片段化,且凋亡誘導作用與增殖抑制作用強弱順序一致,說明發(fā)酵產(chǎn)物誘導細胞凋亡是其抑制細胞增殖的重要途徑;

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