天然藥化常見(jiàn)的鑒別反應(yīng)

1、天然藥化常見(jiàn)的鑒別反應(yīng)（部分）一、顏色反應(yīng)的對(duì)比（一） 、三萜類的顏色反應(yīng)1.Liebermann-Burchard 反應(yīng) 將樣品溶于乙酸酐中，加濃硫酸-乙酸酐（1：20）數(shù)滴，可產(chǎn)生黃→紅→紫→藍(lán)等顏色變化，最后褪色。2.Kahldenberg 反應(yīng) 將樣品的氯仿或醇溶液點(diǎn)于濾紙上， 噴 20%五氯化銻的氯仿溶液 （或三氯化銻飽和的氯仿溶液） ， 干燥后 60℃～70℃加熱， 顯藍(lán)色、 灰藍(lán)色、 灰紫色等多種顏色。3.Rosen-He

2、imer 反應(yīng) 將樣品溶液滴在濾紙上，噴 25%三氯乙酸乙醇溶液，加熱至 100℃，呈紅色，逐漸變?yōu)樽仙?.Salkowski 反應(yīng)將樣品溶于氯仿，加入濃硫酸后，在硫酸層呈現(xiàn)紅色或藍(lán)色，氯仿層有綠色熒光出現(xiàn)。5.Tschugaeff反應(yīng)將樣品溶于冰乙酸中，加乙酰氯數(shù)滴及氯化鋅結(jié)晶數(shù)粒，稍加熱，則呈現(xiàn)淡紅色或紫紅色。（二） 、甾體類化合物的顏色反應(yīng)1.Liebermann-Burchard 反應(yīng) 將樣品溶于氯仿中，加濃硫酸-乙酸酐（1：

3、20）數(shù)滴，可產(chǎn)生紅→紫→藍(lán)→綠→污綠等顏色變化， 最后褪色。 也可將樣品溶于冰乙酸， 加試劑產(chǎn)生同樣的反應(yīng)。2.Kahldenberg 反應(yīng) 將樣品的氯仿或醇溶液點(diǎn)于濾紙上，噴 20%五氯化銻的氯仿溶液，干燥后 60℃～70℃加熱，樣品斑點(diǎn)顯藍(lán)色、灰藍(lán)色、灰紫色等多種顏色。3.Rosen-Heimer 反應(yīng) 將樣品溶液滴在濾紙上，噴 25%三氯乙酸乙醇溶液，加熱至 60℃，呈紅色，逐漸變?yōu)樽仙?.Salkowski 反應(yīng)將樣品溶于氯

4、仿，加入濃硫酸后，在硫酸層呈現(xiàn)紅色或藍(lán)色，氯仿層有綠色熒光出現(xiàn)。5.Tschugaeff反應(yīng)將樣品溶于冰乙酸中，加乙酰氯數(shù)滴及氯化鋅結(jié)晶數(shù)粒，稍加熱，則呈現(xiàn)淡紅色或紫紅色。二、強(qiáng)心苷的顏色反應(yīng)1.C17 位上不飽和內(nèi)酯環(huán)的顏色反應(yīng)甲型強(qiáng)心苷在堿性醇溶液中，五元不飽和內(nèi)酯環(huán)上的雙鍵移位產(chǎn)生C22 活性亞甲基，能與活性亞甲基試劑作用而顯色。乙型強(qiáng)心苷在堿性醇溶液中，不能產(chǎn)生活性亞甲基，無(wú)此類反應(yīng)。 所以，利用此類反應(yīng)可區(qū)別甲、乙型強(qiáng)心苷。（

5、1）Legal 反應(yīng)：又稱亞硝酰鐵氰化鈉試劑反應(yīng)。取樣品1～2mg，溶于吡啶 2～3 滴中，加3%亞硝酰鐵氰化鈉溶液和 2mol/L 氫氧化鈉溶液各 1 滴，反應(yīng)液呈深紅色并漸漸退去。（2）Raymond 反應(yīng)：陽(yáng)性反應(yīng)是反應(yīng)液呈紫紅色。（3）Kedd 反應(yīng)：又稱 3,5-二硝基苯甲酸試劑反應(yīng)。陽(yáng)性反應(yīng)是反應(yīng)液呈紅色或紫紅色。（4）Baljet 反應(yīng)：又稱堿性苦味酸試劑反應(yīng)。陽(yáng)性反應(yīng)是反應(yīng)液呈現(xiàn)橙色或橙紅色。2.α -去氧糖顏色反應(yīng)（1

6、）Keller-Kiliani（K-K）反應(yīng)：此反應(yīng)在冰乙酸溶液中進(jìn)行，如有α -去氧糖，乙酸層顯藍(lán)色。界面的顏色隨苷元羥基、雙鍵的位置和數(shù)目不同而異，可顯紅色、綠色、黃色等。注意此反應(yīng)只對(duì)游離的α -去氧糖或α -去氧糖與苷元連接的苷顯色，對(duì)α -去氧糖和葡萄糖或其他羥基糖連接的二糖、三糖及乙?；摩?-去氧糖不顯色。因它們?cè)诖藯l件下不能水解出α -去氧糖。 此反應(yīng)陽(yáng)性可肯定α -去氧糖的存在，但對(duì)此反應(yīng)不顯色的有時(shí)未必具有完全的否定

7、意義。（1）鹽酸-鎂粉反應(yīng)①鑒定黃酮類化合物最常用的顏色反應(yīng)；②多數(shù)黃酮、黃酮醇、二氫黃酮及二氫黃酮醇類化合物顯紅～紫紅色，少數(shù)顯藍(lán)色或綠色，分子中特別是當(dāng) B-環(huán)上有-OH 或-OCH3 取代時(shí)，呈現(xiàn)的顏色亦即隨之加深。③查耳酮、橙酮、兒茶素類無(wú)該顯色反應(yīng)；④異黃酮類除少數(shù)例外，也不顯色。⑤注意事項(xiàng)： 利用此反應(yīng)進(jìn)行黃酮類化合物的鑒別時(shí)， 需注意花色素類及部分橙酮、 查耳酮類等單純?cè)跐恹}酸酸性下也會(huì)發(fā)生顏色變化，出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。操作：

8、 必要時(shí)需預(yù)先作空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)， 即在供試液中不加鎂粉， 而僅加入濃鹽酸進(jìn)行觀察，若產(chǎn)生紅色，則表明供試液中含有花色素類或某些橙酮或查耳酮類。（2）鈉汞齊還原反應(yīng)黃酮、二氫黃酮、異黃酮、二氫異黃酮類顯紅色；黃酮醇類顯黃～淡紅色；二氫黃酮醇類顯棕黃色。（3）四氫硼鈉還原反應(yīng)①四氫硼鈉（NaBH4）是對(duì)二氫黃酮類化合物專屬性較高的一種還原劑，此反應(yīng)可在試管中或?yàn)V紙上進(jìn)行。②現(xiàn)象：二氫黃酮類或二氫黃酮醇類被還原產(chǎn)生紅～紫紅色，其他黃酮類均為負(fù)反

9、應(yīng)。③應(yīng)用：可用于鑒別二氫黃酮類、二氫黃酮醇類和其他黃酮類化合物。2.與金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)具有 3-羥基、4-羰基或 5-羥基、4-羰基或鄰二酚羥基等結(jié)構(gòu)，則可以與許多金屬鹽類試劑如鋁鹽、鋯鹽、鍶鹽等反應(yīng)，生成有色的絡(luò)合物或有色沉淀，有的還產(chǎn)生熒光。（1）三氯化鋁反應(yīng)生成的絡(luò)合物多呈黃色，置紫外燈下顯鮮黃色熒光，但4′-羥基黃酮醇或 7，4′-二羥基黃酮醇顯天藍(lán)色熒光。（2）鋯鹽-枸櫞酸反應(yīng)①應(yīng)用：利用此反應(yīng)鑒別黃酮類化合物分子中3

10、-或 5-OH 的存在與否。②若出現(xiàn)黃色，說(shuō)明 3-OH 或 5-OH 與鋯鹽生成了絡(luò)合物。繼之再加入枸櫞酸，如黃色不減褪，示有 3-OH 或 3，5-二 OH；如果黃色顯著減褪，示無(wú) 3-OH，但有 5-OH。③原理：因?yàn)?5-羥基、4-羰基與鋯鹽生成的絡(luò)合物沒(méi)有 3-羥基、4-羰基鋯絡(luò)合物穩(wěn)定。容易被弱酸分解。此反應(yīng)也可在濾紙上進(jìn)行，得到的鋯鹽絡(luò)合物斑點(diǎn)多呈黃綠色并有熒光。（3）氨性氯化鍶反應(yīng)如產(chǎn)生綠色至棕色乃至黑色沉淀，則表示有鄰

11、二酚羥基。（4）三氯化鐵反應(yīng) 多含有酚羥基，能與三氯化鐵水溶液或醇溶液發(fā)生顯色反應(yīng)，可呈現(xiàn)紫、綠、藍(lán)等不同顏色。3.堿性試劑反應(yīng) 生成黃色、橙色或紅色等。4.硼酸顯色反應(yīng) 5-羥基黃酮、6′-羥基查耳酮，可與硼酸反應(yīng)，產(chǎn)生亮黃色。①一般在草酸存在下顯黃色并具有綠色熒光。②在枸櫞酸丙酮存在的條件下，則只顯黃色而無(wú)熒光。5.五氯化銻反應(yīng)①查耳酮類則生成紅色或紫紅色沉淀，而黃酮、二氫黃酮及黃酮醇類顯黃色至橙色。②應(yīng)用：區(qū)別查耳酮類與其他黃酮類