結合量效關系及指紋圖譜智能軟件分析系統(tǒng)的中藥質量均一性控制策略研究.pdf

1、中藥原料質量差異大是造成中成藥質量差異的重要原因，因此，中藥生產(chǎn)投料前控制原料藥的質量均一有助于提高中藥成品的質量一致性。課題組前期在行業(yè)專項“中成藥生產(chǎn)投料飲片質量均一性控制技術研究”（課題編號:201307009）基礎上對復方丹參制劑等處方原料進行了質量均一化研究，形成了中藥生產(chǎn)飲片投料前多指標成分質量均一性控制方法和中藥多指標成分均一化計算軟件，本課題在前期工作的基礎上，選擇復方丹參片等4個上市中成藥為模式藥物，采用藥效實驗-變量

2、投影分析的方法確定與“效”相關的控制質量均一性指標成分，采用量效關系研究方法確定該指標成分的“量”控范圍;為便于對質量均一性的評價和便于生產(chǎn)應用，開發(fā)了包括能處理中藥指紋圖譜指紋成分質量均一化智能分析軟件系統(tǒng)并在中藥產(chǎn)品實際生產(chǎn)中應用驗證，證明所建立的方法體系可行，同時形成了中藥質量均一化控制策略和操作規(guī)范。
　　目的:
　　建立中成藥質量均一性控制策略和方法體系;開發(fā)中藥飲片生產(chǎn)投料指紋圖譜及成分智能均一化分析軟件系統(tǒng);為

3、加強中成藥質量均一性控制、保障中成藥療效的穩(wěn)定發(fā)揮，提供可借鑒的方法。
　　方法和結果:
　　1、復方丹參片等模式藥物擬定多指標成分的檢測方法研究
　　(1)采用高效液相法建立了復方丹參片中丹參和三七飲片及成品中丹酚酸B、丹參酮ⅡA、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1含量測定方法，結果證明:建立的檢測方法準確可靠，能夠用于復方丹參片質量均一性評價指標的檢測;下面照此改！
　　(2)采用高效液相法建立虎力

4、散片制草烏和三七飲片及成品中苯甲酰烏頭原堿、苯甲酰次烏頭原堿和苯甲酰新烏頭原堿以及人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1含量檢測方法，結果建立的檢測方法準確可靠，能夠作為虎力片質量均一性評價檢測指標;
　　(3)采用高效液相法建立穿王消炎膠囊穿心蓮飲片和了哥王飲片及成品中新穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯和西瑞香素含量檢測方法，采用高效液相法建立穿心蓮飲片和了哥王飲片及成品指紋圖譜檢測方法，結果建立的檢測方法準確可靠，能夠作為穿王

5、消炎膠囊質量均一性評價檢測指標;
　　(4)采用高效液相法建立前列舒樂膠囊淫羊藿飲片和黃芪飲片及成品中朝藿定C、淫羊藿苷、黃芪甲苷、毛蕊異黃酮含量檢測方法，采用高效液相法建立淫羊藿飲片和黃芪飲片及成品指紋圖譜檢測方法，結果表明，建立的檢測方法準確可靠，能夠作為前列舒樂膠囊質量均一性評價檢測指標;
　　2、變量重要性投影分析法(DPVPH)用于丹參飲片質量差異對復方丹參片藥效影響的分析研究
　　(1)通過含藥血清體外缺氧

6、/復氧CMEC研究復方丹參中丹參飲片－-所有“飲片”均改為“飲片”質量差異及丹參飲片用量對藥效的影響，并應用DPVPH和Hill方程法分析復方丹參片中丹參質量與藥效關系和指標成分含量閾值，結果表明，丹參的質量差異對復方丹參片體外缺氧/復氧CMEC的藥效影響顯著，隨著丹參質量和用量的提高，體外缺氧/復氧CMEC的細胞活力呈提高趨勢，NO和ET呈降低趨勢;DPVPH法分析得出，丹酚酸B影響最大的藥效指標是SOD，丹參酮影響最大的藥效指標是N

7、O; Hill方程法分析得出，復方丹參片中丹酚酸BED50=13.15 mg/片，[ED]20～[ED]80=9.85～18.93 mg/片，經(jīng)平均轉移率推算出丹參飲片中丹酚酸B含量為:44.65mg/g，含量控制范圍為:33.45～64.28mg/g，偏差控制為-25％～+43.9％;復方丹參片中丹參酮ⅡAED50=0.88mg/片，[ED]20～[ED]80=0.76～0.99mg/片，丹參飲片中丹參酮ⅡA含量為:8.89mg/g，

8、含量控制范圍為:7.64～9.96mg/g，偏差控制為-13.6％～+12.5％。
　　(2)通過大鼠體內(nèi)血瘀模型研究復方丹參片中丹參質量差異及丹參用量對大鼠體內(nèi)血瘀模型血液流變學和藥效學指標的影響，并應用DPVPH和Hill方程法分析復方丹參片中丹參飲片質量與藥效關系和指標成分含量閾值，結果表明，丹參飲片的質量差異對復方丹參成品在大鼠體內(nèi)血管內(nèi)皮細胞的藥效影響顯著，隨著丹參飲片質量和用量的提高，各藥效指標均有明顯改善趨勢;DPV

9、PH法分析得出，丹酚酸B影響最大的藥效指標是60S-1，丹參酮影響最大的藥效指標是循環(huán)內(nèi)皮細胞數(shù)量;Hill方程法分析得出，復方丹參片中丹酚酸B ED50=10.36 mg/片，[ED]20～[ED]80=8.82～16.58 mg/片，經(jīng)平均轉移率，推算出丹參飲片中丹酚酸B含量為:35.18mg/g，含量偏差范圍為:29.95～56.30mg/g，偏差控制為+15％～-0.60％;復方丹參片中丹參酮ⅡAED50=0.77 mg/片，[

10、ED]20～[ED]80=0.56～0.86mg/片，丹參飲片中丹參酮ⅡA含量為:7.75mg/g，含量控制范圍為:5.64～8.66mg/g，偏差控制為-27.2％～+11.7％。
　　3、根據(jù)中藥飲片生產(chǎn)投料要求和工藝特點，編輯一套用于飲片投料均一化智能分析軟件系統(tǒng)，該軟件包含指紋圖譜疊加顯示模塊、融合指紋圖譜生成和顯示模塊、均值指紋圖譜生成和顯示模塊、指紋圖譜相似度分析模塊、指紋圖譜成份峰分析模塊以及智能并行調配優(yōu)化模塊，通

11、過軟件編程，已實現(xiàn)了各模塊功能，成功開發(fā)了一套中藥飲片生產(chǎn)投料均一化智能分析軟件，該軟件可用于中藥生產(chǎn)投料飲片質量均一化調配方案的計算，降低中藥生產(chǎn)成品的批間差異。
　　4、將研究建立的智能分析軟件應用于模式藥物實際生產(chǎn)中，結果如下:
　　(1)對復方丹參片丹參飲片和三七飲片均一化投料，其成品中丹酚酸B、丹參酮ⅡA、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1含量批間差異RSD值小于7％，而未均一化產(chǎn)品含量測定RSD值大于1

12、0％，最高達到34.87％;
　　(2)對虎力片制草烏飲片和三七飲片均一化投料，其成品中苯甲酰烏頭原堿、苯甲酰次烏頭原堿和苯甲酰新烏頭原堿含量批間差異RSD值小于3％，而未均一化產(chǎn)品含量測定RSD值大于9％，最高達到11.43％;
　　(3)對穿王消炎膠囊穿心蓮飲片和了哥王飲片均一化投料，其成品中新穿心蓮內(nèi)酯含量RSD為6.80％，脫水穿心蓮內(nèi)酯含量RSD為6.78％，西瑞香素含量RSD為5.12％，均一性遠高于市售品種（新

13、穿心蓮內(nèi)酯含量RSD20.01％，脫水穿心蓮內(nèi)酯含量RSD25.12％，西瑞香素含量RSD40.58％）;同時，均一化投料飲片后，成品指紋圖譜相似度均在0.985以上，而市售產(chǎn)品相似度在0.792～0.937之間。
　　(4)對前列舒樂膠囊淫羊藿飲片和黃芪飲片均一化投料，其成品中朝藿定C、淫羊藿苷、黃芪甲苷、毛蕊異黃酮各成分含量RSD依次為6.84％、2.20％、4.59％、8.81％，而未均一化的市售產(chǎn)品朝藿定C、淫羊藿苷、黃芪

14、甲苷、毛蕊異黃酮各成分含量RSD依次為34.02％、23.88％、10.80％、16.51％;另外，市售前列舒樂膠囊指紋圖譜相似度在0.880～0.963之間，均一化產(chǎn)品相似度在0.962～0.992之間，相似度大大提高，表明均一化投料后產(chǎn)品質量一致性明顯提高。
　　結論:
　　本文應用體內(nèi)外藥效實驗證實了中成藥原料飲片質量差異對成品質量及藥效有顯著影響，提示保證原料飲片質量均一性是保障成品質量均一性的重要因素;通過建立設計