藥物與牛血清白蛋白間反應機理的同步熒光光譜法與改進熒光光譜法研究.pdf

1、目前，熒光分析法在生物化學和藥學領域被廣泛應用于研究蛋白質與藥物小分子之間的相互作用。本文以牛血清白蛋白為研究對象，利用熒光光譜法研究了蛋白與藥物之間相互作用的反應機理，并在此基礎上作出了一些改進研究。本研究內容共包含以下五部分：
　　第一章：綜合介紹了蛋白質與藥物小分子間相互作用的研究方法。據(jù)此，對采用光譜法研究蛋白與藥物小分子相互作用的研究進展進行了綜述，并在此基礎上提出了本文的立題思路。共引用參考文獻57篇。
　　第二

2、章：利用熒光猝滅法以及同步熒光法研究了不同溫度下頭孢克肟與牛血清白蛋白之間的相互作用。研究結果表明，隨著頭孢克肟濃度的增加，牛血清白蛋白的熒光強度及同步熒光強度都依次下降，據(jù)此對兩種方法利用相同公式計算，所得的頭孢克肟與牛血清白蛋白間結合常數(shù)、結合位點數(shù)、猝滅類型、作用力類型及能量轉移參數(shù)等基本一致。表明同步熒光光譜法作為一種新的研究方法進一步豐富了研究蛋白與藥物結合機理的手段，對熒光法在該領域的應用也是有益的補充。
　　第三章：

3、利用以蛋白熒光變化為考察對象的傳統(tǒng)熒光光譜法和以藥物熒光變化為考察對象的彈性散射熒光法，分別研究了不同溫度下頭孢克肟與牛血清白蛋白之間的反應機理，結果表明頭孢克肟與牛血清白蛋白之間猝滅方式為靜態(tài)猝滅；兩者主要通過靜電作用力結合，結合位點數(shù)約為1；Hill系數(shù)nH小于1，表現(xiàn)為弱的負協(xié)同作用。彈性散射熒光法得到的頭孢克肟-牛血清白蛋白體系結合常數(shù)明顯大于傳統(tǒng)熒光光譜法所得，表明以藥物熒光變化為考察對象的研究更準確、合理，并通過紫外光譜法對

4、其所得結果的合理性進行了驗證。并推測出藥物與蛋白之間存在一種“點對面”的作用方式。
　　第四章：利用熒光猝滅法和同步熒光法，分別研究了不同溫度下阿司匹林與牛血清白蛋白之間的反應機理。兩種研究方法結果均表明阿司匹林與牛血清白蛋白之間猝滅方式為靜態(tài)猝滅；兩者主要通過靜電作用力結合，結合常數(shù)為103，結合位點主要位于牛血清白蛋白的疏水亞結構域IIA，結合位點數(shù)約為1。兩種方法所得的結果相同，表明同步熒光法可以作為一種新的研究蛋白與藥物結

5、合機理的方法，它對于傳統(tǒng)熒光法是一個有益的補充。
　　第五章：利用以蛋白熒光變化為考察對象和以藥物熒光變化為考察對象的熒光光譜法，分別研究了不同溫度下阿司匹林與牛血清白蛋白之間的反應機理。結果表明，阿司匹林與牛血清白蛋白兩者主要通過靜電作用力結合，以藥物熒光變化為考察對象的熒光法得到的阿司匹林-牛血清白蛋白體系的結合常數(shù)比以蛋白熒光變化為考察對象的熒光光譜法大兩個數(shù)量級，表明以藥物熒光變化為考察對象的研究更準確、合理，并通過紫外光