食管鱗癌復(fù)合分子標(biāo)志物的研究.pdf

1、有效的分子標(biāo)志物或者組合是輔助腫瘤臨床分型、指導(dǎo)精確診斷和治療以及預(yù)防的重要手段之一。本研究利用變性聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)和免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)可能在食管鱗癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中存在的雜合性丟失和異常的蛋白改變進(jìn)行檢測(cè)，并將已測(cè)序數(shù)據(jù)納入進(jìn)行聯(lián)合分析，旨在鑒定可能用于食管鱗癌預(yù)后判斷、早期檢測(cè)的標(biāo)志物及組合。
　　選擇文獻(xiàn)報(bào)道和本課題組前期研究中發(fā)現(xiàn)的總共50個(gè)微衛(wèi)星雜合性丟失位點(diǎn)、6個(gè)高表達(dá)蛋白、以及22個(gè)高頻突變基因作為候選分子標(biāo)志，

2、在食管鱗癌及其配對(duì)的手術(shù)切緣形態(tài)學(xué)正常的組織中進(jìn)行初步分析，鑒定出6個(gè)雜合性丟失較高的微衛(wèi)星位點(diǎn)和3個(gè)在食管鱗癌組織中顯著高表達(dá)、而在手術(shù)切緣組織中不表達(dá)或表達(dá)極低的候選蛋白。在微衛(wèi)星標(biāo)志中，D3S2423的雜合度最高，為87.5％;D13S171的雜合度最低，為58.0％。LOH頻率最高者為D3S1768(48.9％)，最低為D3S2452(28.8％)。P53、COX2、ANO1等在手術(shù)切緣正常組織中的陽(yáng)性率分別為1.5％(1/69

3、)、1.3％(1/75)、0％(1/64)，而在腫瘤中的陽(yáng)性率分別為54.0％(54/100)、30.8％(32/104)、25.0％(26/104)。對(duì)基因突變的分析結(jié)果顯示，突變頻率較高的為TP53突變39.3％(44/112)、TTN突變41.1％(46/112)、MUC16突變17.0％(19/112)等。將全部標(biāo)志物進(jìn)行組合分析，發(fā)現(xiàn)D3S1768、D13S171、D13S1493的LOH、TTN突變、以及P53蛋白高表達(dá)五標(biāo)

4、志物組合時(shí)，其中任意兩個(gè)同時(shí)出現(xiàn)陽(yáng)性的頻率為82.9％;D3S1768、D13S171、D13S1493的LOH、TP53突變及TTN突變五標(biāo)志物組合中任意兩個(gè)在早期癌(Ⅰ/Ⅱa)病例中同時(shí)為陽(yáng)性的頻率為63.3％，高于任何單一標(biāo)志的畸變頻率，有可能成為食管鱗癌早期診斷的標(biāo)志物組合。
　　Kaplan-Meier總生存分析結(jié)果顯示，PBRM1(P=0.016)、SYNE2(P=0.157)基因突變和COX2(P=0.079)蛋白高

5、表達(dá)的患者的術(shù)后生存期相對(duì)較短。多因素Cox回歸模型分析發(fā)現(xiàn)，PBRM1突變(P=0.012)、COX2高表達(dá)(P=0.044)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.006)為食管癌患者術(shù)后的獨(dú)立預(yù)后因素。PBRM1突變/SYNE2突變/pN（有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移）三標(biāo)志物組合中至少兩個(gè)指標(biāo)為陽(yáng)性的食管鱗癌患者的總生存期顯著短于僅有一個(gè)指標(biāo)陽(yáng)性或均為陰性的患者(P=0.014)。提示其可能作為食管鱗癌預(yù)后判斷的標(biāo)志物組合。
　　本研究表明，食管鱗癌中存在