重金屬鉛的免疫檢測(cè)技術(shù)研究.pdf

1、隨著工農(nóng)業(yè)迅速發(fā)展,大量的污染物進(jìn)入環(huán)境引起環(huán)境質(zhì)量嚴(yán)重惡化,其中重金屬的污染尤為嚴(yán)重。重金屬由于污染范圍廣,持續(xù)時(shí)間長(zhǎng),又不能在生物物質(zhì)循環(huán)和能量交換中分解,易在已在環(huán)境中累積,而成為環(huán)境中一類重要的污染物,尤其是鉛、隔污染尤為嚴(yán)重。鉛在自然界不分解,在環(huán)境中可以長(zhǎng)期累積,廣泛分布于大氣、土壤、水和食物中,通過(guò)呼吸道、消化道被人體吸收,對(duì)環(huán)境和人體健康產(chǎn)生嚴(yán)重的危害。鉛也是危害生物生長(zhǎng)范圍較廣的重金屬,高濃度鉛對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育有害。重金

2、屬不是植物生長(zhǎng)的必需元素然而它們可以被植物吸收,從而進(jìn)入食物鏈對(duì)動(dòng)物和人體健康產(chǎn)生危害。這些物質(zhì)對(duì)機(jī)體的危害,在短期內(nèi)并不明顯,但經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期累積,會(huì)影響神經(jīng)系統(tǒng)、內(nèi)臟功能和生殖、遺傳等。因此,建立快速靈敏的檢測(cè)方法勢(shì)在必行。 以實(shí)驗(yàn)室成功制備的鉛單克隆抗體為基礎(chǔ),選取一個(gè)雜交瘤細(xì)胞株系(4/7)對(duì)其培養(yǎng)上清進(jìn)行ELISA檢測(cè)。結(jié)果表明,培養(yǎng)上清效價(jià)為300倍稀釋；親和常數(shù)為2.19×1010L/mol;對(duì)Fe3+、Cu2+、Cd2

3、+、Hg2+的交叉反應(yīng)率依次為1.19％、2.59％、2.6％、2.49％,對(duì)其它11種金屬離子的交叉反應(yīng)率則均小于0.1％；包被抗原工作濃度為4000倍稀釋,培養(yǎng)上清為5倍稀釋,3％BSA作封閉物,反應(yīng)基質(zhì)HBS中NaCl的離子強(qiáng)度為0 mol/L,pH值為5.0;利用優(yōu)化后的實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)并建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,線性化標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為Y=1.0434X-2.6768,相關(guān)系數(shù)R2=0.9932,檢測(cè)范圍0.0001 m