高效液相色譜與共振瑞利散射聯(lián)用技術(shù)在抗精神病類和抗組胺類藥物中的研究與應(yīng)用.pdf

1、高效液相色譜是現(xiàn)代儀器分析應(yīng)用最廣泛的一種分析方法，具有分離效能高、選擇性好的優(yōu)點。在高效液相色譜的裝置中，檢測器起著重要的作用，常用的檢測器主要有紫外檢測器、熒光檢測器、電化學(xué)檢測器等。
　　共振瑞利散射是20世紀90年代發(fā)展起來的一種新的光譜分析方法。因其方法簡便、分析速度快，最重要的是靈敏度極高，因而獲得科研工作者的廣泛關(guān)注。但是共振瑞利散射的選擇性不夠高，容易受復(fù)雜基質(zhì)的干擾，對于結(jié)構(gòu)相似的物質(zhì)很難進行有效分析檢測。因此，

2、高效液相色譜與共振瑞利散射的聯(lián)用一方面可以利用高效液相色譜的分離效能高的優(yōu)勢彌補共振瑞利散射選擇性不足的缺點，同時發(fā)揮共振瑞利散射靈敏度高的優(yōu)勢。另一方面也可以促進液相色譜的進一步發(fā)展。本文的主要研究內(nèi)容如下：
　　1.高效液相色譜與共振瑞利散射聯(lián)用技術(shù)檢測人體尿液中的六種抗精神病類藥物
　　本文建立了一個高靈敏度和高選擇性地檢測六種抗精神病類藥物的新方法-高效液相色譜聯(lián)用共振瑞利散射光譜法。六種藥物分別為鹽酸多塞平(Dox

3、epin hydrochloride)、鹽酸異丙嗪(Promethazine hydrochloride)、鹽酸阿米替林(Amitriptyline hydrochloride)、鹽酸丙咪嗪(Imipraine hydrochloride)、鹽酸氯丙嗪(Chlorpromazine hydrochloride)和鹽酸氯米帕明(Clomipramine hydrochloride)。實驗流動相為乙腈：0.1％三乙胺(用磷酸調(diào)節(jié)pH為3.1

4、)=40:60，柱溫35℃，流速為0.4mL·min-1。六種藥物經(jīng)過高效液相色譜的分離后依次進入柱后衍生裝置，然后在pH4.2的BR緩沖溶液中與赤蘚紅(Erythrosine)結(jié)合形成1:1離子締合物，從而導(dǎo)致共振瑞利散射信號顯著增強。本文對實驗條件進行了一系列優(yōu)化，包括檢測波長、流速、反應(yīng)溫度、反應(yīng)管長等。并且采用量子化學(xué)計算，掃描電鏡、吸收光譜等對反應(yīng)機理進行了探討。在最優(yōu)化的實驗條件下，六種藥物的檢測限為0.42～21.05ng

5、·mL-1。線性相關(guān)系數(shù)均高于0.9916。該方法用于測定人體尿液中六種藥物的加標回收率，結(jié)果令人滿意。最后，該方法成功的應(yīng)用于檢
　　測病人尿液中的鹽酸丙咪嗪的含量。
　　2.高效液相色譜與共振瑞利散射聯(lián)用技術(shù)檢測人體尿液中的抗組胺類藥物
　　經(jīng)過高效液相色譜分離后的三種抗組胺藥菲尼拉敏(Pheniramine)、撲爾敏(Chlortrimeton)和苯海拉明(Diphenhydramine)依次進入柱后衍生系統(tǒng)，在

6、pH4.0～4.6的BR緩沖溶液中，上述三種藥物與虎紅(Acid Red94)結(jié)合形成1:1的離子締合物，導(dǎo)致共振瑞利散射信號的顯著增強?；诖嗽恚覀兘⒘烁咝б合嗌V法聯(lián)用共振瑞利散射光譜法檢測上述三種抗組胺藥的新方法。本實驗采用菲羅門Luna C8色譜柱進行分離，分離流速為0.4mL·min-1,柱溫35℃，進樣量20μL。實驗對柱后反應(yīng)條件包括BR緩沖溶液流速、虎紅溶液流速、檢測波長、反應(yīng)酸度、反應(yīng)溫度等一系列反應(yīng)條件進行了優(yōu)

7、化，采用摩爾比法和等摩爾連續(xù)變化法測定了締合物的組成比，探討了共振瑞利散射增強的原因。三種藥物在一定濃度范圍內(nèi)均具有良好的線性關(guān)系，在最佳的反應(yīng)條件下得出菲尼拉敏、撲爾敏、苯海拉明三種藥物的檢測限分別為29.71、8.49、36.75ng·mL-1。最后該方法成功的應(yīng)用于檢測人體尿液中三種藥物的含量并獲得了滿意的結(jié)果。
　　3.米托蒽醌與赤蘚紅相互作用的共振瑞利散射光譜、熒光光譜及其分析應(yīng)用
　　米托蒽醌(Mitoxantr

8、one)屬于蒽環(huán)類抗癌藥物，具有突出的療效和較低的心臟毒性，在臨床上應(yīng)用廣泛。米托蒽醌在2000年通過了美國食品和藥物管理局(FDA)的認證。赤蘚紅有著微弱的共振瑞利散射信號和較強的熒光強度，當(dāng)其與米托蒽醌結(jié)合形成離子締合物后，導(dǎo)致體系共振瑞利散射信號的顯著增強和熒光猝滅。基于此原理，我們建立了共振瑞利散射法和熒光猝滅法檢測米托蒽醌的新方法。相比于熒光猝滅法，共振瑞利散射法的靈敏度更高。因此，共振瑞利散射法更適于微量及痕量米托蒽醌濃度的

9、檢測。
　　本文對一些列反應(yīng)條件諸如酸度，赤蘚紅濃度，反應(yīng)時間進行了優(yōu)化。并且對赤蘚紅與米托蒽醌的結(jié)合位點和結(jié)合方式進行了探討，結(jié)果表明米托蒽醌通過靜電引力和疏水作用力與赤蘚紅結(jié)合而形成1:2的離子締合物。在最優(yōu)化的實驗條件下得到共振瑞利散射法和熒光猝滅法的線性范圍分別為0.03～3.0μg·mL-1和0.1～1.5μg·mL-1,線性相關(guān)系數(shù)R分別為0.9991和0.9989。檢測限分別為2.1和15.0ng·mL-1。最后共振