酶催化光度法在環(huán)境及食品分析中的應(yīng)用.pdf

1、隨著各種分析儀器自動(dòng)化程度的提高，分析檢測(cè)的靈敏度、檢測(cè)限、準(zhǔn)確度等都得到很大的改善，然而這些儀器大都造價(jià)昂貴，且需要專(zhuān)門(mén)的技術(shù)人員，不利于推廣應(yīng)用。此外，所面對(duì)的分析對(duì)象日益復(fù)雜，采用現(xiàn)代分析儀器直接測(cè)定往往比較困難，因此需要借助各種預(yù)處理方法。如液液萃取，微波萃取、蒸餾、離心、沉淀等，它們操作步驟繁多，處理時(shí)間長(zhǎng)，試劑用量大，此外，在預(yù)處理中還容易損失樣品，產(chǎn)生較大誤差。 本論文利用酶法分析方法與簡(jiǎn)單易行的紫外－可見(jiàn)分光光度

2、法結(jié)合起來(lái)對(duì)環(huán)境及食品樣品進(jìn)行分析檢測(cè)，將其應(yīng)用于雨水、白酒及唾液中有關(guān)組分的測(cè)定。樣品無(wú)需預(yù)處理，且操作步驟簡(jiǎn)便。將酶法分析方法直接應(yīng)用于唾液中乙醇的測(cè)定，無(wú)需借助分析儀器，通過(guò)反應(yīng)前后溶液顏色的顯著改變，即可定性判斷出唾液中是否含有乙醇，為鑒定酒后駕車(chē)肇事提供了良好的判定依據(jù)，也為商品化試劑盒的研制作了基礎(chǔ)性的研究，具有較強(qiáng)的實(shí)際意義和潛在的社會(huì)價(jià)值。本工作由以下三部分組成： 1、采用過(guò)氧化氫酶對(duì)雨水中過(guò)氧化氫的含量進(jìn)行了測(cè)

3、定。它是基于反應(yīng)產(chǎn)物在505nm處有較強(qiáng)的吸收，利用此波長(zhǎng)下的吸光度值測(cè)定過(guò)氧化氫的含量。在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，線性范圍為0.0030～0.3000mmol/L，回收率為95.7％～106.0％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.99％～3.58％。該法具有線性范圍寬、操作簡(jiǎn)便、回收率高等特點(diǎn)。 2、將醇氧化酶的酶促反應(yīng)和過(guò)氧化氫酶的指示反應(yīng)相結(jié)合，對(duì)飲酒者唾液中的乙醇含量進(jìn)行了測(cè)定。本文首次提出用酶催化光度法測(cè)定飲酒者唾液中乙醇的含量。實(shí)驗(yàn)表明在

4、最優(yōu)實(shí)驗(yàn)條件下，測(cè)量指示反應(yīng)產(chǎn)物在505nm處的峰值吸收，可間接測(cè)定乙醇的含量。本法在0.06860～5.115mmol/L范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，回收率為92.1％～103.4％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.60％～3.06％。用于實(shí)際樣品的測(cè)定，結(jié)果滿(mǎn)意。 3、采用甲醛脫氫酶對(duì)白酒中的甲醛進(jìn)行了測(cè)定。它是基于甲醛與NAD+(氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸)的反應(yīng)，后者的還原產(chǎn)物在340nm處具有最大吸光度值，利用此波長(zhǎng)下的吸光度值間接測(cè)定甲