無機(jī)磷試劑輔助下氨基酸成肽反應(yīng)及寡肽的分離與性質(zhì).pdf

1、本文以電噴霧質(zhì)譜為檢測手段，研究了無機(jī)磷試劑輔助下L-絲氨酸、L-蘇氨酸的自組成肽反應(yīng)，實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明：1)L-絲氨酸在POCl3或PCl5輔助下，均能成肽，最長肽鏈為六肽，成肽產(chǎn)物主要是O-磷?；嚯模?)在四氫呋喃溶液中絲氨酸、蘇氨酸成肽較好，兩種氨基酸的轉(zhuǎn)化率較高；3)提高L-絲氨酸初始濃度可加快成肽速率；4)升高溫度會加快絲氨酸或蘇氨酸成肽反應(yīng)速率，并能促進(jìn)絲氨酸生成磷?；嚯?，但反應(yīng)溫度高于50℃(對于絲氨酸)或60℃(對于

2、蘇氨酸)會導(dǎo)致大量的副反應(yīng)發(fā)生，不利于成肽反應(yīng)；5)時(shí)間對L-蘇氨酸成肽反應(yīng)影響不大，但反應(yīng)時(shí)間超過6小時(shí)(20℃下)會產(chǎn)生一些副產(chǎn)物。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)L-絲氨酸與L-蘇氨酸的成肽有差異。絲氨酸最長能達(dá)到六肽，而L-蘇氨酸生成的最長肽僅為三肽，L-絲氨酸主要成肽產(chǎn)物為磷?；嚯?，L-蘇氨酸則傾向于生成多肽，這些差異應(yīng)與兩種氨基酸的結(jié)構(gòu)差別有關(guān)。 利用反相高效液相色譜，以乙腈和水作為流動(dòng)相，對蘇氨酸寡肽進(jìn)行了分離純化。研究了

3、流動(dòng)相的不同組成對分離的影響并優(yōu)化了色譜條件，當(dāng)以0～10min，1～5﹪乙腈/水(v/v)梯度洗脫；11min后，5﹪乙腈/水(v/v)恒定洗脫時(shí)，分離的效果最佳，能達(dá)到蘇氨酸、二肽和三肽完全分離，并制備得到了蘇氨酸二肽和三肽產(chǎn)品，其結(jié)構(gòu)經(jīng)電噴霧質(zhì)譜、紅外光譜、1HNMR和13CNMR分析進(jìn)行了表征。 利用紫外光譜分析，對色氨酸二肽(Trp-Trp)與二價(jià)金屬離子(Cu2+、Ca2+、Zn2+)相互作用進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)色氨酸二