血清雌二醇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與四種嘌呤核苷類標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制.pdf

1、近年來，隨著檢測技術(shù)的發(fā)展，血清雌二醇和四種嘌呤核苷類物質(zhì)成為新的指標(biāo)應(yīng)用于臨床，因此其相關(guān)領(lǐng)域的檢測也急劇增加，需求日益廣泛，為保證臨床檢驗的標(biāo)準(zhǔn)化，本文研制了血清雌二醇和四種嘌呤核苷類標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)以滿足臨床檢測需求。
　　在血清雌二醇基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制過程中，建立了同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法(ID-LC/MS/MS)準(zhǔn)確測定血清中雌二醇的含量，使用電噴霧三重四級桿串聯(lián)質(zhì)譜多重反應(yīng)監(jiān)測模式(MRM)，通過優(yōu)化色譜質(zhì)譜參數(shù)，確定最佳的

2、儀器分析條件。實驗優(yōu)化了血清樣品的前處理條件，包括比較不同的雌二醇內(nèi)標(biāo)物、添加提取劑、萃取前血清所需的pH值、摸索淋洗條件以及平衡時間等，使雌二醇的提取效果最好，建立了合適的樣品制備路線。并進一步對血清樣品進行均勻性檢驗、穩(wěn)定性監(jiān)測以及不確定度評定，并進行了方法學(xué)驗證（精密度、準(zhǔn)確性、線性關(guān)系、檢測限等）;采用2013 IFCC RELA比對(JCTLM)樣品和歐洲標(biāo)準(zhǔn)局標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)血清17β-雌二醇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進行了方法驗證，測量結(jié)果溯源到J

3、CTLM認可的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，保證了標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的溯源性和量值的準(zhǔn)確，從而完成了血清雌二醇基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制。
　　本文結(jié)合國內(nèi)外相關(guān)研究技術(shù)基礎(chǔ)，采用紅外光譜法和質(zhì)譜法對四種嘌呤核苷類樣品主成分進行了定性分析;通過優(yōu)化分析實驗條件完成了基于高效液相色譜的質(zhì)量平衡法與定量核磁共振法兩種不同原理的定值分析方法，同時完成了水分、灰分及無機離子含量的測定;并進一步對四種嘌呤核苷類標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進行了均勻性檢驗、穩(wěn)定性監(jiān)測以及不確定度的評定。結(jié)果表明，四

4、種嘌呤核苷類標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)純度較高，其中鳥苷純度為90.89％，擴展不確定度0.56％(k=2);2'-脫氧鳥苷純度為94.51％，擴展不確定度0.34％(k=2);8-羥基-鳥苷純度為94.22％，擴展不確定度0.34％(k=2);8-羥基-2'-脫氧鳥苷純度為91.02％，擴展不確定度0.28％(k=2);四種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)均勻性良好且一年范圍監(jiān)測穩(wěn)定性良好。
　　血清中雌二醇基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制填補了國內(nèi)空白，四種嘌呤核苷類純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的