P204-正辛醇反膠束萃取谷胱甘肽最佳工藝研究.pdf

1、反膠束萃取技術(shù)具有成本低，溶劑可反復(fù)利用，條件溫和不會引起生物活性物質(zhì)變性，操作簡單可以連續(xù)生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。谷胱甘肽是一種活性三肽，具有出色的抗氧化作用，在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、化學(xué)、食品等領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用。 本文制備新型P204/正辛醇反膠束體系；以試劑GSH為原材料，研究反膠束萃取GSH的機(jī)制：在pH小于pI條件下，GSH的氨基帶正電荷，與陰離子表面活性劑P204和正辛醇組成反膠束中的負(fù)電荷氧形成靜電相互作用，從而被萃取進(jìn)入該反膠束。

2、 GSH在P204/正辛醇反膠束中的氧化半衰期約為10.9h，與其在水溶液中的氧化半衰期相比，增加了0.8h，增加率為7.3％。.Ala、Lys及Asp的游離氨基與GSH的氨基競爭負(fù)電荷氧，游離氨基數(shù)量越多，與競爭性越強(qiáng)；另外氨基酸分子體積越小，越容易進(jìn)入反膠束，致使競爭性越強(qiáng)。 水相pH值、反膠束含水量W<,0>、陽離子濃度、萃取時間和表面活性劑濃度對萃取GSH有影響。當(dāng)水相pH值大于2.0時，GSH帶正電荷逐漸減少，

3、與P204中負(fù)電荷氧的靜電引力減弱，萃取率E隨pH值的增大而減??；W<,0>為10時，E達(dá)到最大，為28.3％；陽離子對P204萃取GSH的影響順序是：K<'+>>Na<'+>>Ca<'2+>>NH<,4><'+>，K<'+>、Na<'+>、Ca<'2+>、NH<,4><'+>的堿性也依次減小，二方面相互對應(yīng)；陽離子濃度為0.1mol/L時，E達(dá)到最大值；超過0.1mol/L后，由于陽離子壓縮了反膠束雙電層，增強(qiáng)了對GSH與P204間靜

4、電引力的屏蔽作用，致使E減小。此時萃取1 5min即達(dá)到平衡。L<'16>(4<'5>)正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果指出，萃取GSH的最佳的工藝條件為：水相pH值為2.0；K<'+>濃度為0.1mol/L；萃取時間為15min；表面活性劑的濃度為0.16mol/L，在此條件下GSH的萃取率為33.1％，二次萃取率為49.7％。各因素所選的各水平內(nèi)，對萃取GSH的影響力大小順序?yàn)椋篬K<'+>]>含水量W<,0>>水相pH值>[P204]>萃取時間。

5、 反萃取水相pH值、Ca<'2+>濃度、萃取時間對GSH的反萃取率E'均有影響。水相pH值在9.0到12.0區(qū)間變化時，E'逐漸增大直至平穩(wěn)；Ca<'2+>濃度在0.2mol/L至0.6mol/L區(qū)間變化時，其對GSH與P204間靜電引力的屏蔽增強(qiáng)，使得E'逐漸升高；反萃取需45min達(dá)到平衡。L<'9>(3<'4>)正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果指出，反萃取GSH的最佳工藝條件為：反萃取水相的pH值為11.0；Ca<'2+>的濃度為0.6mol/L