基于膠體金光熱效應(yīng)的快速檢測(cè)方法研究及裝置研制.pdf

1、近年來，食品安全問題越來越受到社會(huì)的重視，其中對(duì)食品中致病菌、農(nóng)獸藥殘留等有害物質(zhì)的檢測(cè)方法研究是監(jiān)督食品安全的重要保障。對(duì)食品中有害物質(zhì)的檢測(cè)方法有多種，膠體金（Gold nanoparticles, GNPs）試紙條檢測(cè)方法是常用的快速檢測(cè)方法之一。膠體金試紙條檢測(cè)方法包括膠體金免疫層析技術(shù)和膠體金免疫滲濾技術(shù)，本論文主要研究基于膠體金免疫層析技術(shù)的檢測(cè)方法。膠體金免疫層析技術(shù)是一種以GNPs作為顯色物質(zhì)的免疫層析檢測(cè)技術(shù)，通常根據(jù)

2、抗原上表位的數(shù)目分為雙抗夾心法和競(jìng)爭(zhēng)法，載體可以為硝酸纖維素膜(Nitrocellulose membrane, NC)，玻璃等，廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)療檢測(cè)等領(lǐng)域。傳統(tǒng)膠體金免疫層析試紙條通常通過視覺檢測(cè)法得出檢測(cè)結(jié)果，但這種檢測(cè)方法靈敏度一般較低。
　　本研究分為五個(gè)部分：第一章概述了試紙條檢測(cè)方法的分類、GNPs的制備方法和性質(zhì)，介紹了GNPs的標(biāo)記技術(shù)和光熱效應(yīng)機(jī)理，重點(diǎn)介紹了膠體金試紙條的視覺檢測(cè)方法和膠體金試紙條讀卡器檢測(cè)

3、方法及其研究進(jìn)展，以及基于GNPs光熱效應(yīng)的應(yīng)用及其研究進(jìn)展。第二章建立了一種基于GNPs光熱效應(yīng)的鼠傷寒沙門氏菌層析式試紙條檢測(cè)方法。制備了GNPs，并與抗體組成金標(biāo)抗體復(fù)合物，制作了鼠傷寒沙門氏菌免疫層析式試紙條，對(duì)其制作過程進(jìn)行了優(yōu)化。優(yōu)化了光熱檢測(cè)的激光照射時(shí)間，分別用視覺檢測(cè)法及熱像儀光熱效應(yīng)檢測(cè)法檢測(cè)，得到了鼠傷寒沙門氏菌的最低檢測(cè)限，分別為1.57×107 CFU·mL-1和1.7×106 CFU·mL-1，光熱效應(yīng)檢測(cè)法

4、與視覺檢測(cè)法相比，靈敏度提高了約9倍。第三章選用雙抗夾心法商品化鼠傷寒沙門氏菌試紙條和競(jìng)爭(zhēng)法商品化鹽酸克倫特羅試紙條雙抗夾心，利用視覺檢測(cè)法及熱像儀光熱效應(yīng)檢測(cè)法進(jìn)行了定量檢測(cè)，確定了商品化膠體金試紙條采用視覺檢測(cè)法及熱像儀檢測(cè)法檢測(cè)鼠傷寒沙門氏菌及鹽酸克倫特羅的最低檢測(cè)限。鼠傷寒沙門氏菌試紙條視覺檢測(cè)法和熱像儀檢測(cè)法的檢測(cè)限分別為1.13×107 CFU·mL-1及1.2×106 CFU·mL-1，熱像儀檢測(cè)方法與視覺檢測(cè)方法相比，靈

5、敏度提高了約9倍。鹽酸克倫特羅試紙條視覺檢測(cè)法和熱像儀檢測(cè)法的檢測(cè)限分別為5 ng·mL-1及0.5 ng·mL-1，熱像儀檢測(cè)方法與視覺檢測(cè)方法相比，靈敏度提高了約10倍。第四章研制了一種小型紅外溫度傳感器裝置，將第二章和第三章中測(cè)試的自制和商品化鼠傷寒沙門氏菌試紙條和商品化鹽酸克倫特羅試紙條用紅外溫度傳感器進(jìn)行光熱檢測(cè)。分別對(duì)激光照射距離、傳感器測(cè)量距離及激光照射時(shí)間進(jìn)行了優(yōu)化，確定了膠體金免疫試紙條方法采用視覺檢測(cè)法及紅外傳感器光

6、熱效應(yīng)檢測(cè)法檢測(cè)鼠傷寒沙門氏菌及鹽酸克倫特羅的最低檢測(cè)限。自制鼠傷寒沙門氏菌試紙條視覺檢測(cè)法和傳感器檢測(cè)法檢測(cè)限分別為1.57×107 CFU·mL-1及1.25×106 CFU·mL-1，傳感器檢測(cè)方法與視覺檢測(cè)方法相比，靈敏度提高了約12倍。商品化鼠傷寒沙門氏菌試紙條視覺檢測(cè)法和傳感器檢測(cè)法檢測(cè)限分別為1.13×107 CFU·mL-1及1.0×106 CFU·mL-1，傳感器檢測(cè)方法與視覺檢測(cè)方法相比靈敏度提高了約11倍。鹽酸克倫