定性檢測青霉素的膠體金免疫層析檢測方法和試劑研制.pdf

1、隨著人們對生活質(zhì)量要求的日益提升，食品中抗生素的濫用受到高度關(guān)切，所以加強(qiáng)對食品中抗生素的檢測，具有顯著的社會效應(yīng)和經(jīng)濟(jì)效應(yīng)。目前對于抗生素的檢測有很多方式，大多能符合靈敏度的要求，但操作都不夠簡便，并不適合基層單位的使用。本論文的目的就是為了開發(fā)出一種操作更簡便、使用更快捷，同時靈敏度也符合國家標(biāo)準(zhǔn)(4ng/mL)的產(chǎn)品。本研究將利用青霉素酶的高效性與專一性以及膠體金技術(shù)的簡便快速性，研制開發(fā)出一款兩者合為一體的檢測青霉素的膠體金免疫

2、層析試劑。
　　本論文的研究內(nèi)容將主要包括以下四個方面:
　　1.由于青霉素是小分子藥物，我們按照檢測小分子藥物的方法，研制了競爭法檢測青霉素的試劑，結(jié)果表明，所研制的檢測試劑，只對陰性結(jié)果出現(xiàn)檢測線顯色，而對陽性結(jié)果不再出現(xiàn)顯色檢測線。
　　2.通過化學(xué)偶聯(lián)法—碳二亞胺(EDC)法，把青霉素結(jié)合到生物大分子（如BSA，BTG等），再將其包被到硝酸纖維素膜上，形成固定化青霉素的硝酸纖維素膜。對包被物濃度和噴量進(jìn)行了優(yōu)化

3、，得到了合適的濃度和噴量分別為1.5mg/mL和1.0μL/cm。
　　3.進(jìn)行了膠體金pH值以及標(biāo)記量的篩選，將青霉素酶進(jìn)行標(biāo)記，并確定了標(biāo)記后的青霉素酶在聚酯膜上合適的濃度和噴量分別為OD=30和2.0μL/cm。
　　4.通過選擇合適的緩沖體系和表面活性劑，成功處理了樣品墊和膠體金墊，很好地促進(jìn)了青霉素酶和青霉素的結(jié)合，增強(qiáng)了檢測線的顯色效果，同時還消除了非特異性結(jié)合，使得檢測試劑的效果更佳。
　　通過上述的工作