酶聯(lián)免疫檢測(cè)技術(shù)測(cè)定牛奶中青霉素含量和試劑盒研制.pdf

1、自青霉素發(fā)明以來(lái)，抗生素由于其良好的抗菌效果，較低毒副作用被廣泛使用。但是近年來(lái)過(guò)渡濫用抗生素，出現(xiàn)了不少嚴(yán)重影響人類健康的問(wèn)題，其中在牛乳產(chǎn)品生產(chǎn)中為預(yù)防和治療奶牛的乳腺炎問(wèn)題過(guò)渡使用青霉素導(dǎo)致相關(guān)乳制品中青霉素的過(guò)量殘留，已經(jīng)引起了各國(guó)藥品監(jiān)管部門的重視，并對(duì)乳制品中允許的青霉素類抗生素含量進(jìn)行了明確的規(guī)定。因此，如何正確檢測(cè)青霉素含量是監(jiān)管青霉素過(guò)度使用的一個(gè)重要手段。
　　本研究以探索出一種有效、準(zhǔn)確、方便的青霉素含量檢測(cè)

2、方法為目標(biāo)，研制和開(kāi)發(fā)出一款酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒。本論文首先從蠟狀芽孢桿菌培養(yǎng)液中提取高活性的青霉素酶，設(shè)計(jì)了以鹽析、親和層析、透析復(fù)性等為主要步驟的分離流程，其中親和層析為關(guān)鍵步驟;我們把氨芐青霉素連接到用溴化氰活化的瓊脂糖凝膠上，制備成新的親和層析劑，成功用于親和層析，為高效分離青霉素酶打下基礎(chǔ)。通過(guò)該分離過(guò)程的實(shí)施，實(shí)現(xiàn)了從蠟狀芽孢桿菌中分離得到高活性青霉素酶。其次，在酶聯(lián)免疫檢測(cè)技術(shù)基礎(chǔ)上，根據(jù)競(jìng)爭(zhēng)法的檢測(cè)原理，將青霉素酶包被于聚