2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、生物活性硫醇小分子,包括半胱氨酸(Cys)、同型半胱氨酸(Hcy)和還原型谷胱甘肽(GSH),在生物體的許多生理活動和新陳代謝過程中,扮演著重要的角色。硫醇的代謝和運輸與體內(nèi)許多重要的酶和蛋白質(zhì)功能表達密切相關(guān),硫醇濃度異常預(yù)示著相應(yīng)的酶和蛋白質(zhì)發(fā)生異常,可能導(dǎo)致許多疾病的發(fā)生。因此,定量檢測生物體中的硫醇濃度,可為疾病的預(yù)防和診斷起到提示作用,在生命科學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)中具有非常重要的意義。在各種各樣檢測硫醇的方法中,熒光探針以其選擇性好、

2、靈敏度高、檢出限低、儀器簡單和操作簡便等特點,被認(rèn)為是最簡便有效的手段,廣泛應(yīng)用于檢測識別活體組織和細胞中的微量樣品。鑒于硫醇的生理重要性,近年來利用熒光探針方法檢測硫醇含量的研究非?;钴S。
  本論文主要利用硫醇中巰基的強親核性,設(shè)計合成了五種可與硫醇發(fā)生邁克爾加成反應(yīng)的新型熒光成像探針,并通過研究探針分子與硫醇加成前后的紫外和熒光光譜變化,達到對硫醇識別檢測的目的。具體研究工作如下:
  1.設(shè)計合成了一種基于方酸衍生物

3、的近紅外硫醇熒光成像探針2-1,硫醇分子中的巰基可以親核加成缺電子的方酸四碳環(huán),通過紫外吸收光譜和熒光發(fā)射光譜可以發(fā)現(xiàn),該探針可以快速特異性識別Cys/Hcy,而GSH及其他氨基酸對識別幾乎不產(chǎn)生干擾。共聚焦成像實驗表明,探針2-1可用于活細胞內(nèi)檢測Cys/Hcy。
  2.以三苯胺為熒光團,馬來酰亞胺為識別基團,設(shè)計合成了一種高選擇性識別硫醇的熒光成像探針3-1,該探針基于邁克爾加成機理實現(xiàn)了對硫醇的快速和特異性識別,反應(yīng)機理經(jīng)

4、核磁和質(zhì)譜方法進一步確定,并成功應(yīng)用于細胞成像實驗。
  3.設(shè)計合成了一種以萘酰亞胺為熒光團,馬來酰亞胺為識別基團的硫醇熒光成像探針4-1,可以對硫醇進行快速地高選擇性識別,識別過程熒光表現(xiàn)為off-on。響應(yīng)時間研究表明,探針對硫醇的識別可在120s內(nèi)達到平衡。共聚焦成像實驗證明4-1可用于檢測HepG2活細胞內(nèi)的硫醇。
  4.設(shè)計合成了兩個萘酰亞胺-馬來酰亞胺同分異構(gòu)體衍生物,通過研究它們與硫醇及其他氨基酸作用前后的

5、熒光變化,篩選出能基于邁克爾加成機理,快速、特異性識別Cys的熒光成像探針5-1,檢出限低至0.064μM,并成功應(yīng)用于檢測活細胞內(nèi)的Cys。
  5.設(shè)計合成了一種新型雙熒光團組合型硫醇熒光成像探針6-1,可用于在生理條件下特異性比率識別Cys/Hcy。探針本身表現(xiàn)為藍色熒光,Cys/Hcy通過邁克爾加成催化分子內(nèi)脫羧,進而誘導(dǎo)分子內(nèi)開環(huán)重排,導(dǎo)致共軛體系被破壞,表現(xiàn)為熒光紅移(125nm),熒光強度比值(I560/I435)分

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