野生毛花獼猴桃遺傳多樣性及AsA含量與SSR的關(guān)聯(lián)分析.pdf

1、基于江西省武功山境內(nèi)野生毛花獼猴桃資源的調(diào)查與收集，對(duì)其果實(shí)表型性狀進(jìn)行變異分析和SSR遺傳多樣性分析;并對(duì)隨機(jī)采集的70份不同植株的野生毛花獼猴桃成熟葉片和幼嫩果實(shí)的AsA（抗壞血酸）含量進(jìn)行了測(cè)定與分析，旨在發(fā)掘毛花獼猴桃優(yōu)異種質(zhì)，為野生毛花獼猴桃資源的合理開(kāi)發(fā)利用及探討AsA積累機(jī)制提供理論依據(jù);同時(shí)，利用關(guān)聯(lián)分析的方法，檢測(cè)野生群體內(nèi)葉片和果實(shí)AsA含量的自然變異與SSR標(biāo)記的關(guān)聯(lián)分析，可為發(fā)掘野生毛花獼猴桃優(yōu)異基因及遺傳改良提

2、供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:
　　1、野生毛花獼猴桃果實(shí)表型性狀分析及SSR遺傳多樣性分析
　　根據(jù)UPOV公布的獼猴桃屬種測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)對(duì)供試材料的果實(shí)表型性狀進(jìn)行觀(guān)測(cè)。參照獼猴桃遺傳連鎖圖譜，選用分布于獼猴桃基因組中的70對(duì)SSR引物對(duì)供試材料進(jìn)行遺傳多樣性分析。結(jié)果表明，隨機(jī)采集的70份野生毛花獼猴桃種質(zhì)資源中，其果實(shí)表型性狀和DNA分子水平均存在豐富的變異和較高的遺傳多樣性。聚類(lèi)分析將供試的野生毛花獼猴桃資源分為圓形和橢

3、圓形混合果實(shí)組、橢圓形果實(shí)組以及圓柱形果實(shí)組。21對(duì)多態(tài)性高的SSR引物共檢測(cè)出127個(gè)等位變異位點(diǎn)，變異范圍在2-12之間，平均每對(duì)SSR引物可檢測(cè)到6.04個(gè)等位位點(diǎn);資源間的遺傳相似性系數(shù)(GS)變異范圍為0.5306～0.9252，平均值為0.7805。21對(duì)SSR標(biāo)記對(duì)70份野生毛花獼猴桃種質(zhì)的區(qū)分率為100％。GS值在0.65水平上，UPGMA聚類(lèi)分析可將供試的野生毛花獼猴桃種質(zhì)資源劃分成Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ共3個(gè)組。圓形、橢圓形和圓

4、柱形果實(shí)形狀的種質(zhì)均有各自聚類(lèi)的趨勢(shì)，果實(shí)表型性狀聚類(lèi)分析與SSR標(biāo)記分析結(jié)果具有極顯著的相關(guān)性。
　　2、野生毛花獼猴桃葉片和果實(shí)AsA含量變異分析
　　供試的野生毛花獼猴桃成熟葉片和幼嫩果實(shí)的AsA含量存在豐富的變異，成熟葉片AsA含量變異系數(shù)為41.30％，幼嫩果實(shí)AsA含量變異系數(shù)為21.88％;通過(guò)對(duì)成熟葉片和幼嫩果實(shí)AsA含量分布的頻率的分析，成熟葉片AsA含量主要集中在1.00～2.75mg·g。1 FW，占總

5、數(shù)的77％。幼嫩果實(shí)AsA含量在10.00～17.00mg·g-1 FW區(qū)間內(nèi)集中分布，分布頻率為80％;經(jīng)變異分析和方差分析，篩選了8份高果實(shí)AsA含量的野生毛花獼猴桃優(yōu)異種質(zhì)，分別為編號(hào)9、35、15、56、57、14、7、27號(hào)種質(zhì);8份高果實(shí)AsA含量?jī)?yōu)異種質(zhì)的果實(shí)AsA含量均在17.00mg·g-1 FW以上，其中9號(hào)種質(zhì)最高(21.27mg·g-1 FW);單果質(zhì)量在6.35g以上;可溶性固形物在5.77％以上;可溶性糖最低

6、為0.72％;可滴定酸在0.73％以上。
　　3、野生毛花獼猴桃葉片和果實(shí)AsA含量與SSR標(biāo)記關(guān)聯(lián)分析
　　供試的70個(gè)野生毛花獼猴桃單株的葉片與果實(shí)均采自江西省武功山境內(nèi)，以其幼葉基因組DNA為模板，應(yīng)用21對(duì)覆蓋全基因組的SSR分子標(biāo)記對(duì)供試材料進(jìn)行多態(tài)性?huà)呙?，并進(jìn)行群體結(jié)構(gòu)分析，進(jìn)一步應(yīng)用Tassel2.1軟件中的GLM模型和MLM模型進(jìn)行野生毛花獼猴桃AsA含量的關(guān)聯(lián)分析。供試的野生毛花獼猴桃成葉和幼果的AsA含量

7、存在豐富的變異，通過(guò)群體結(jié)構(gòu)分析可將70份野生毛花獼猴桃種質(zhì)材料分為4個(gè)亞群;GLM模型分析結(jié)果顯示，在P＜0.01水平上，檢測(cè)有7個(gè)SSR標(biāo)記與葉片和果實(shí)AsA含量緊密相關(guān)，各個(gè)標(biāo)記對(duì)其葉片和果實(shí)AsA含量變異的解釋率在0.0825-0.1755;MLM模型分析結(jié)果顯示，在P＜0.01的水平上，共檢測(cè)到有6個(gè)SSR標(biāo)記分別與葉片和果實(shí)AsA含量緊密相關(guān)，各個(gè)標(biāo)記的解釋率在0.0736-0.1546之間。利用SSR標(biāo)記分析了70份野生毛