高速逆流色譜法用于線蟲脂質(zhì)組學(xué)的研究.pdf

1、“脂質(zhì)組學(xué)”由Han和Gross于2003年首次提出，是生命科學(xué)中繼基因組學(xué)、蛋白組學(xué)后發(fā)展起來的一門新興學(xué)科。一般認為脂質(zhì)組學(xué)是一門對生物體、組織或細胞中的脂質(zhì)以及與其相互作用的分子進行全面系統(tǒng)的分析、鑒定，了解脂質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能，進而揭示脂質(zhì)代謝與細胞、器官乃至機體的生理、病理過程之間關(guān)系的學(xué)科。脂質(zhì)組學(xué)一經(jīng)提出，迅速成為研究的一個熱點。
　　高速逆流色譜(HSCCC)是近20多年來發(fā)展起來的一項液-液分配分離技術(shù)。與高效液相色

2、譜相比，該分離技術(shù)不使用任何固態(tài)支撐體，具有如下優(yōu)點:(1)無不可逆吸附現(xiàn)象;(2)樣品回收率高;(3)溶劑體系選擇范圍廣;(4)更換溶劑快捷方便。此外，HSCCC儀器價格低廉、性能可靠，已被應(yīng)用于生物化學(xué)、生物工程、醫(yī)藥、天然產(chǎn)物化學(xué)、有機合成等領(lǐng)域。
　　本文首先對脂質(zhì)組學(xué)及其分析技術(shù)進行了綜述，對高速逆流色譜分離機理、工作原理及應(yīng)用做了系統(tǒng)介紹，提出應(yīng)用高速逆流色譜對復(fù)雜生物樣品進行初分離，以達到降低樣品復(fù)雜度的目的。

3、>　　第二章詳細介紹了本文實驗對象——秀麗隱桿線蟲——的培養(yǎng)方法。借助薄層色譜、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用兩種分析手段對氯仿-甲醇脂質(zhì)提取法和甲基叔丁基醚脂質(zhì)提取法進行了比較。
　　第三章采用薄層色譜法對血漿和線蟲的總脂質(zhì)粗提物進行了分離、檢測分析，并探討了展開缸內(nèi)蒸氣飽和度、濕度以及展開方式對TLC分離效果的影響。將ImageJ圖像處理軟件應(yīng)用到薄層色譜圖像的分析處理中，考察了此分析方法的重復(fù)性，及脂質(zhì)含量與灰度曲線閉合面積的線性關(guān)系。

4、
　　第四章應(yīng)用高速逆流色譜分離技術(shù)對線蟲的總脂質(zhì)粗提物進行了分組分離。借助薄層色譜分析，考察了線蟲的總脂質(zhì)粗提物在正己烷-乙醇-水(6∶5∶1，V/V)、正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（5∶5∶7∶3和1∶1∶1∶1，V/V）、石油醚-二氯甲烷-甲醇-正丙醇-水(1∶5∶6∶1∶4和3∶5∶6∶1∶4，V/V)、正丁醇-甲基叔丁基醚-乙腈-水(3∶1∶1∶5，V/V)等不同兩相溶劑體系中的分配情況。通過對溶劑比例進行調(diào)整，確定了最佳