腫瘤抗原肽和雞卵黃免疫球蛋白的IgY的分離和分析研究.pdf

1、腫瘤抗原可以誘導(dǎo)機(jī)體的免疫應(yīng)答,是腫瘤的免疫治療中多肽疫苗的分子基礎(chǔ).隨著對(duì)腫瘤抗原的新認(rèn)識(shí),腫瘤疫苗的研究至今已有許多重大發(fā)展.近十年來(lái)發(fā)展起來(lái)的腫瘤抗原肽篩選方法,為臨床腫瘤免疫治療提供了大量備選抗原分子.該文總結(jié)了腫瘤抗原的種類和目前尋找腫瘤抗原方法,并簡(jiǎn)單介紹了高效液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)儀器結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)尋找抗原肽方面的應(yīng)用.實(shí)驗(yàn)采用細(xì)胞膜酸洗技術(shù)洗脫細(xì)胞表面的抗原多肽,除鹽濃縮后用高效液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)洗脫物進(jìn)行分離分

2、析,根據(jù)質(zhì)譜中氨基酸殘基的組成和精確的質(zhì)量數(shù),推算出了質(zhì)譜圖中抗原多肽質(zhì)量數(shù)所對(duì)應(yīng)的氨基酸組成.實(shí)驗(yàn)對(duì)酸洗液的酸度和洗脫時(shí)間及其后處理(分別用C18柱和納濾脫鹽)進(jìn)行了探討,最后還摸索了二次液相分離抗原多肽的規(guī)律性.用水稀釋脫脂-兩步鹽析-凝膠過(guò)濾法從免疫雞卵黃中分離純化IgY,經(jīng)SDS-PAGE電泳分析IgY的純度.實(shí)驗(yàn)對(duì)電泳的各種條件進(jìn)行了摸索,找到了最佳的電泳條件.通過(guò)電泳圖可以看出IgY的純度達(dá)到98％.說(shuō)明此分離純化IgY的方