卵黃免疫球蛋白的分離純化研究.pdf

1、在本論文中，采用氯仿.甲醇法系統(tǒng)考察了水稀釋法的操作參數(shù)對卵黃除脂率的影響，獲得了水稀釋法的最佳脫脂工藝為：利用去離子水將卵黃溶液稀釋6倍，調(diào)節(jié)pH至5.0，在-20℃冷凍8 h后，4℃離心5 min，最小離心力為1200×g，經(jīng)上述處理后，除脂率可達(dá)100％。 利用參數(shù)掃描超濾技術(shù)對脫脂后的IgY粗溶液進(jìn)行了分離和純化研究?？疾斓某瑸V工藝有兩種：(1)利用100-kDa再生纖維素膜進(jìn)行單步分離。最佳分離工藝條件為：30mM N

2、aCl+10 mM磷酸鈉緩沖溶液(pH6.0)，攪拌速率600 rpm，流速13.3 L/m2h。利用此工藝獲得的IgY純度為85％，回收率為90％；(2)利用100-kDa聚醚砜膜和100-kDa再生纖維素膜進(jìn)行二級分離。100-kDa聚醚砜膜的最佳分離工藝條件為：70 mM NaCl+10 mM磷酸鈉緩沖溶液(pH8.0)，攪拌速率1200 rpm，流速26.5 L/m2h；100-kDa再生纖維素膜的最佳分離工藝為：70 mM N

3、aCl+10 mM磷酸鈉緩沖溶液(pH4.5)，攪拌速率600 rpm，流速13.3 L/m2h。利用此工藝獲得的IgY純度為93％，回收率為85％。 通過等點(diǎn)聚焦、電泳、圓二色光譜、紅外光譜和抑菌實(shí)驗(yàn)等對超濾獲得IgY進(jìn)行了分析和表征，從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，IgY的等電點(diǎn)為pI6.2；IgY分子由兩條重鏈和兩條輕鏈組成，重鏈68 kDa，輕鏈28 kDa，IgY的分子量約為192 kDa；其二級結(jié)構(gòu)中β折疊占48％；活性高于鹽析法獲