抗耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）卵黃免疫球蛋白（IgY）的制備與性質研究.pdf

1、免疫球蛋白(immunoglobulin)是具有抗體活性的一種糖蛋白，主要存在于血漿中，也見于其他體液、組織和一些分泌液中。人血漿內(nèi)的免疫球蛋白可分為五類，即免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白D(IgD)和免疫球蛋白E(IgE)，其中IgG是最主要的免疫球蛋白。而母雞血液中的免疫球蛋白可傳遞到雞卵黃中，并且在雞發(fā)育過程中起保護作用，此種免疫球蛋白稱為雞卵黃免疫球蛋白(IgY)[1]。IgG

2、是存在于雞卵黃中的主要免疫球蛋白，而IgM和IgA則主要存在于血清蛋白中[2]。IgY屬多克隆抗體，多克隆抗體在疾病的診斷和防治方面具有許多特定優(yōu)點，通常一次性大量制備是相當困難的，而多次制備，又導致抗體的均一性差。母雞一經(jīng)免疫應答后，可從其卵黃中不斷獲得特異性的抗體。IgY純度高、特異性強，不會象其他哺乳動物產(chǎn)生的抗體那樣會發(fā)生交叉血清反應或過敏反應，因而它是最安全的生物制劑，可替代免疫小鼠、豚鼠或兔等哺乳動物所制備的抗體而大量生產(chǎn)。

3、近年來，IgY的研究和應用是免疫學領域的熱點和十分活躍的課題。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌是引起院內(nèi)感染的重要致病菌，其致病性強，對多種抗菌藥物耐藥，在治療上十分棘手。本文用耐甲氧西林金黃色葡萄球菌作為抗原免疫母雞制備了抗耐甲氧西林金黃色葡萄球菌IgY，并對其理化性質和生物學活性進行了研究，旨在為其以后在診斷和防治方面的應用奠定基礎[3-4]。 目的： 觀察雞卵黃中抗耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)抗體的含量、純度、來源

4、及穩(wěn)定性。 方法： 用耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)作為抗原免疫Leghorn雞；通過改良水稀釋法提取卵黃中的IgY；雙紫外光波長測定抗體含量，SDS-PAGE電泳檢測抗體純度；Westernblot免疫印跡法測定該抗體來源；ELISA檢測IgY對溫度、酸堿度、胃蛋白酶、胰蛋白酶的穩(wěn)定性。 結果： 抗體含量13.3mg/mL蛋黃液，抗體純度達96％；免疫印跡證明IgY與雞血清中的IgG具有相同的分子