特異性鈉通道調(diào)制劑致傷害性的脊髓上位中樞機(jī)制研究.pdf

1、蝎蟄會(huì)產(chǎn)生強(qiáng)烈的疼痛感，并伴隨強(qiáng)烈的炎癥反應(yīng)。東亞鉗蝎(BmK)廣泛分布在我國淮河以北。長期以來，人們對(duì)于蝎蟄后產(chǎn)生一系列痛相關(guān)反應(yīng)的機(jī)制尚不十分清楚，仍有很多問題有待研究。
　　 為了更好地研究這種傷害性現(xiàn)象，也為更好地模擬相關(guān)的臨床痛覺病征，為臨床研究提供穩(wěn)定載體，該實(shí)驗(yàn)室成功地建立了大鼠實(shí)驗(yàn)性蝎蟄痛模型用于模擬蝎蟄后的各種癥狀。前期研究工作表明，東亞鉗蝎粗毒可劑量依賴性地誘發(fā)大鼠自發(fā)痛行為長達(dá)2小時(shí)、熱痛敏反應(yīng)持續(xù)大約1周

2、、機(jī)械痛敏行為持續(xù)超過3周以及持續(xù)的局部炎癥紅腫反應(yīng)，并對(duì)蝎毒誘導(dǎo)的外周及中樞機(jī)制展開了研究和探討。本論文采用行為學(xué)、藥理學(xué)、免疫組織化學(xué)和電生理學(xué)等方法，對(duì)蝎毒致傷害性的脊髓上位中樞機(jī)制進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究。主要結(jié)果如下：
　　 1．脊髓星型膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞的激活在BmK粗毒誘導(dǎo)的大鼠痛相關(guān)行為中的作用,前期的研究工作大都集中在外周和中樞傷害性神經(jīng)元，對(duì)數(shù)量相當(dāng)于神經(jīng)元10-50倍的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞（Neuroglial ce

3、ll）關(guān)注有限。傳統(tǒng)認(rèn)為，神經(jīng)系統(tǒng)中只有神經(jīng)元才具有傳遞和處理信息的能力，而神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞只對(duì)神經(jīng)元起到營養(yǎng)和支持的作用，并缺乏神經(jīng)信號(hào)傳遞與處理的能力。近年來，大量實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在機(jī)體受到傷害性刺激時(shí)，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生許多變化，釋放出大量細(xì)胞因子，直接和間接的參與痛覺的形成。
　　 本研究分別采用GFAP和OX-42為脊髓星型膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)記物，探討了脊髓膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)BmK粗毒誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性大鼠痛相關(guān)行為的貢獻(xiàn)。研究結(jié)果

4、顯示，(1)在大鼠左后足足心注射BmK粗毒后，可以誘發(fā)脊髓星型膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞時(shí)間依賴的激活，其中星型膠質(zhì)細(xì)胞自粗毒注射的第3天才被激活，第7天達(dá)到激活峰值，第14天開始減退，而小膠質(zhì)細(xì)胞自粗毒注射后4小時(shí)便被激活，1天達(dá)到激活峰值，第3天開始消退。(2)當(dāng)提前鞘內(nèi)注射膠質(zhì)細(xì)胞代謝抑制劑Fluorocitrate或腹腔注射小膠質(zhì)細(xì)胞抑制劑Minocycline后，BmK粗毒誘導(dǎo)的自發(fā)痛行為、原發(fā)性熱痛敏和雙側(cè)機(jī)械痛敏均被抑制。(3)

5、Minocycline可以部分的抑制BmK粗毒誘導(dǎo)的脊髓c-Fos表達(dá)，但對(duì)足部局部水腫沒有任何壓抑作用。(4)BmK粗毒注射后第七天再給予鞘內(nèi)注射Fluorocitrate或腹腔注射Finocycline，對(duì)BmK粗毒誘導(dǎo)的痛相關(guān)行為沒有任何抑制作用。
　　 綜上所述，脊髓膠質(zhì)細(xì)胞參與了BmK粗毒誘導(dǎo)的大鼠痛相關(guān)行為，膠質(zhì)細(xì)胞的激活對(duì)這一痛相關(guān)行為具有重要意義。
　　 2．皮層－丘腦相關(guān)腦區(qū)神經(jīng)元對(duì)BmKⅠ誘導(dǎo)的傷害性

6、刺激的動(dòng)態(tài)編碼本研究利用多通道單位神經(jīng)元記錄技術(shù)(Multi-channel)，在清醒大鼠上系統(tǒng)觀察了BmKⅠ誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性疼痛模型中皮層-丘腦回路神經(jīng)元群對(duì)痛相關(guān)活動(dòng)的調(diào)制作用。課題選取大鼠初級(jí)體感皮層（SI）和前扣帶回皮層(ACC)，以及丘腦背內(nèi)側(cè)核(MD)和丘腦腹后核（VP）為研究腦區(qū)，研究了BmKⅠ毒素單側(cè)注射大鼠左后足足心后，相關(guān)腦區(qū)和核團(tuán)的神經(jīng)元響應(yīng)情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與福爾馬林等疼痛模型不同，BmKⅠ誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性疼痛模型大鼠上述