簡介：前言發(fā)育性髖關(guān)節(jié)脫位DEVELOPMENTALDISLOCATIONOFTHEHIPDDH是小兒骨科最常見的、嚴(yán)重危害兒童健康的先天畸形之一地區(qū)與種族不同其發(fā)病率有很大差異。南非的發(fā)病率較低0～01‰芬蘭拉普人、加拿大印第安人、克羅埃西亞人發(fā)病率最高5～195‰在我國發(fā)病率約為11～38‰。早期診斷、早期治療對DDH的預(yù)后至關(guān)重要年齡愈大治療效果愈不佳。15歲以下的患兒經(jīng)保守治療多可治愈超過15歲則多需手術(shù)治療。DDH是最復(fù)雜的三維形態(tài)學(xué)畸形之一手術(shù)術(shù)式的選擇主要依靠矯形外科醫(yī)生對患者術(shù)前影像學(xué)資料的理解。術(shù)者術(shù)前未能正確的認(rèn)識到患者髖關(guān)節(jié)和整個骨盆存在的三維病理形態(tài)學(xué)改變常導(dǎo)致術(shù)式選擇錯誤且術(shù)后患者出現(xiàn)并發(fā)癥的風(fēng)險也隨之增加。輕者在成年后發(fā)生骨關(guān)節(jié)炎常常需要接受全髖置換治療嚴(yán)重者導(dǎo)致患兒終身殘疾。因此克隆DDH的致病基因揭示其發(fā)病機(jī)制是有效地丌展產(chǎn)前診斷及新生兒期高危人群篩查的基礎(chǔ)是提高出生人口素質(zhì)的關(guān)鍵。正確地理解DDH患兒髖關(guān)節(jié)和骨盆存在的三維形態(tài)學(xué)畸形制定合理的矯形治療方案對于改善患兒遠(yuǎn)期治療效果和預(yù)防術(shù)后醫(yī)源性并發(fā)癥的發(fā)生具有重要指導(dǎo)意義。前期我們對一個四代的DDH家系22成員應(yīng)用美國AFFYMETRIX公司的10KSNP芯片進(jìn)行全基因組掃描經(jīng)參數(shù)及非參數(shù)分析結(jié)果支持PAPPA2基因的SNP位點RS726252與該病相連鎖THETA0時LOD2119NPL2698P00156。該家系的22個成員5例患者中的4例80為TT基因型僅1例20為CT基因型。在17例表型正常的成員中1例為TT基因型588其余16例9412均為CT基因型具有明顯的統(tǒng)計學(xué)差異。雖然連鎖分析LOD值未達(dá)到30但是我們發(fā)現(xiàn)家族正常成員的基因型與DDH患者的基因型存在顯著差異。已有研究表明PAPPA2與胚胎及生后的正常發(fā)育密切相關(guān)。因此為了進(jìn)一步驗證PAPPA2與DDH的相關(guān)性我們擬對310例散發(fā)DDH患兒和487例正常對照兒童進(jìn)行病例對照關(guān)聯(lián)分析并對四代DDH家系22位成員中的5位DDH先證者進(jìn)行外顯子區(qū)基因突變篩查。目前對于DDH忠兒髖臼、股骨頸是否存在過度前傾尚有爭議。DDH患兒病變髖臼呈現(xiàn)過度前傾的原因以及股骨去旋轉(zhuǎn)截骨的指征也不明確。而且對于DDH患兒骨盆內(nèi)旋畸形的研究也是鮮有報道。明確上述問題對于改善患兒治療效果和預(yù)防醫(yī)源性并發(fā)癥是非常重要的。二維CT定量分析DDH形態(tài)學(xué)畸形常因患者病變區(qū)解剖形態(tài)學(xué)變異以及在采集圖像時患者體位不標(biāo)準(zhǔn)而常導(dǎo)致其觀測結(jié)果不可靠。前期我們的研究已經(jīng)表明3DCT測量DDH患兒髖臼前傾的可靠性和重復(fù)性優(yōu)于二維CT所以本次研究擬使用3DCT對單髖脫位DDH患兒的髖臼前傾、股骨前傾、結(jié)合前傾以及骨盆形態(tài)學(xué)畸形進(jìn)行分析。當(dāng)前研究的主要目的1通過基于群體的病例對照研究進(jìn)一步明確PAPPA2與DDH的相關(guān)性同時對四代DDH家系22位成員中的5位DDH先證者進(jìn)行外顯子區(qū)基因突變篩查2觀察DDH患兒病變髖是否存在髖臼過度前傾分析髖臼前傾的原因3觀察DDH患兒病變髖股骨頸是否存在過度前傾。測量分析DDH患兒結(jié)合前傾角并對結(jié)合前傾角在股骨去旋轉(zhuǎn)截骨中的意義進(jìn)行初步探討4按照。TONNIS分型分層后對骨盆內(nèi)旋畸形進(jìn)行觀察測量并探討其臨床意義。方法本研究所涉及的DDH患者和正常對照兒童的外周靜脈血以及影像學(xué)資料均來自中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院兒科。所有患兒均經(jīng)臨床及影像學(xué)確診畸形性髖脫位、神經(jīng)源性髖脫位及綜合征性髖脫位被排除在外。所有外周血的留取及影像學(xué)資料的使用均已征得家長的同意并告知用于科學(xué)研究的目的。本課題的研究已經(jīng)中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院醫(yī)學(xué)道德倫理委員會的批準(zhǔn)。一、PAPPA2基因多態(tài)性與發(fā)育性髖關(guān)節(jié)脫位遺傳易感性關(guān)聯(lián)研究TAGMAN探針對SNPRS726252進(jìn)行基因分型按HARDYWEINBCRG定律計算SNP位點的基因型頻率的期望值X2檢驗HARDYWEINBERG平衡。使用SPSS115軟件X2檢驗分析病例組和對照組基因型、基因頻率分布差異P＜005具有明顯的統(tǒng)計學(xué)意義。LOGISTIC多因素回歸分析計算校正性別后PAPPA2基因SNPRS726252基因型和基因頻率變異與DDH發(fā)病風(fēng)險的值ODDSRATIOS及95可信區(qū)間CICONFIDENCEINTERVALS。外顯子區(qū)基因序列PCR擴(kuò)增后送華大基因公司測序。二、三維CT評價發(fā)育性髖關(guān)節(jié)脫位髖臼、股骨、結(jié)合前傾及骨盆旋轉(zhuǎn)畸形一DDH患兒病變髖臼是否過度前傾以及髖臼前傾的原因三維CT測量并對比正常對照組左側(cè)髖和右側(cè)髖的髖臼前傾角ACETABULARANTEVERSIONANGLEAA、坐骨外旋轉(zhuǎn)角LATERALROTATIONALANGLEOFTHEISCHIUMIA、恥骨旋轉(zhuǎn)角PUBICROTATIONALANGLEPA、恥骨相對長度PUBICRELATIVELENGTHPRL和坐骨相對距離ISCHIACRELATIVEDISTANCEIRD。測量并對比DDH患者脫位髖與未受累髖的上述指標(biāo)。PEARSON相關(guān)分析檢測IA與從和IRD的相關(guān)性。二DDH患兒病變側(cè)髖的股骨頸是否存在過度前傾測量分析DDH患兒結(jié)合前傾角三維CT測量并對比DDH患者脫位側(cè)髖與未受累側(cè)髖的髖臼前傾角AEETABULARANTEVERSIONANGLEAA、股骨頸前傾角FEMALNECKANTEVERSIONANGLEFA和結(jié)合前傾角COMBINEDANTEVERSIONANGLECA。PEARSON相關(guān)分析檢測從與FA的相關(guān)性。三DDH患兒骨盆是否存在內(nèi)旋畸形三維CT測量并對比正常對照組左側(cè)髖和右側(cè)髖的髖臼前傾角ACETABULARANTEVERSIONANGLEAA、上骨盆旋轉(zhuǎn)角ROTATIONALANGLEOFUPPERPELVISURA和下骨甕旋轉(zhuǎn)角ROTATIONALANGLEOFLOWERPELVISLRA。測量并對比DDH患者脫位側(cè)髖與未受累側(cè)髖的上述指標(biāo)。PEARSON相關(guān)分析檢測LRA與AA的相關(guān)性。SPSS115軟件對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析P＜005具有明顯的統(tǒng)計學(xué)意義。PEARSON相關(guān)系數(shù)PEARSONCRELATIONCOEFFICIENT和同類相關(guān)系數(shù)ICCTHEINTRACLASSCONELATIONCOEFFICIENT衡量測量數(shù)據(jù)組內(nèi)、組間變異。ICC＞075重復(fù)性和可靠性為優(yōu)ICC值位于075至004之間為好ICC＜004為差。結(jié)果一、PAPPA2基因多態(tài)性與發(fā)育性髖關(guān)節(jié)脫位遺傳易感性關(guān)聯(lián)研究DDH組和對照組患兒基因型分布符合HARDYWEINBERG平衡P0116P0539。DDH患兒組的基因頻率分布不同于正常對照組兒童差別有統(tǒng)計學(xué)意義P0001。經(jīng)LOGISTIC多因素回歸分析校正性別后基因頻率風(fēng)險度估計表明等位基因T為風(fēng)險基因型值為183095CI為13292518。按照性別分層分別對比女性患者和女性對照、男性患者和男性對照結(jié)果表明基因頻率分布差異同樣有統(tǒng)計學(xué)意義P0008P0006。LOGISTIC多因素回歸分析也表明等位基因T為風(fēng)險基因型值分別為1605和368995CI分別為11302281和14509384。DDH患兒組的基因型頻率分布不同于正常對照組兒童差別有統(tǒng)計學(xué)意義P0001。LOGISTIC多因素回歸分析校正性別后發(fā)現(xiàn)TT基因型為風(fēng)險基因型值為208195CI為14433001。按照性別分層分別對比女性患者和女性對照、男性患者和男性對照結(jié)果表明基因型頻率分布差異同樣有統(tǒng)計學(xué)意義P0005P0002。LOGISTIC多因素回歸分析也表明TT為風(fēng)險基因型值分別為1770和473295?分別為11812653和164213634。四代家系中5位DDH先證者的PAPPA2基因23個外顯子區(qū)域進(jìn)行了PER測序基因突變篩查結(jié)果顯示未發(fā)現(xiàn)有基因突變存在。二、三維CT評價發(fā)育性髖關(guān)節(jié)脫位髖臼、股骨、結(jié)合前傾及骨盆旋轉(zhuǎn)畸形一DDH患兒病變髖臼是否過度前傾以及髖臼前傾的原因正常對照組左側(cè)髖和右側(cè)髖的AA、IA、PA、PRL和IRD差別均無統(tǒng)計學(xué)意義P＞005。單髖脫位DDH患兒脫位側(cè)髖和未受累側(cè)髖的PA差別無統(tǒng)計學(xué)意義P＞005。脫位側(cè)髖的PRL值小于未受累側(cè)髖差異有統(tǒng)計學(xué)意義P＜005。脫位側(cè)髖的AA、IA和IRD均大于未受累側(cè)髖差異有統(tǒng)計學(xué)意義P＜005。無論是在脫位側(cè)髖還在未受累側(cè)髖IA均與AA和IRD成正相關(guān)。二DDH患兒病變髖股骨頸是否存在過度前傾測量分析DDH患兒結(jié)合前傾角單髖脫位DDH患兒脫位側(cè)髖的AA和CA均大于未受累側(cè)髖差異有統(tǒng)計學(xué)意義P＜005。脫位側(cè)髖和未受累側(cè)髖的FA差異無統(tǒng)計學(xué)意義P＞005。然而將DDH患兒按照TONNIS分型分組后我們發(fā)現(xiàn)雖然在TONNISⅡ型、Ⅲ型組脫位側(cè)髖和未受累側(cè)髖的FA差異仍無統(tǒng)計學(xué)意義但在TONNISⅣ型組脫位側(cè)髖的FA3597±1024°明顯大于未受累側(cè)髖FA3046±751°差異有統(tǒng)計學(xué)意義P0028。在TONNISⅡ型、Ⅲ型和Ⅳ型組脫位側(cè)髖的AA均大于未受累側(cè)髖差異有統(tǒng)計學(xué)意義。雖然在TONNISⅡ型組脫位側(cè)髖和未受累側(cè)髖的CA差異無統(tǒng)計學(xué)意義但在TONNISⅢ型和Ⅳ型組脫位側(cè)髖的CA均大于未受累側(cè)髖的CA差異有統(tǒng)計學(xué)意義。三DDH患兒骨盆是否存在內(nèi)旋畸形正常對照組左側(cè)髖和右側(cè)髖的URA、LRA和AA差異均無統(tǒng)計學(xué)意義P＞005。單髖脫位DDH患兒脫位側(cè)髖的URA、LRA和AA均大于未受累側(cè)髖差異有統(tǒng)計學(xué)意義P＜005。將DDH患兒按照TONNIS分型分組后我們發(fā)現(xiàn)雖然在TONNISⅡ型和Ⅳ型組脫位側(cè)髖的LRA均大于未受累側(cè)髖且差異有統(tǒng)計學(xué)意義但脫位側(cè)髖的URA與未受累側(cè)髖的URA差異并無統(tǒng)計學(xué)意義。在TONNISⅢ型組脫位側(cè)髖的URA和LRA均大于未受累側(cè)髖差別有統(tǒng)計學(xué)意義。在TONNISⅡ型、Ⅲ型和Ⅳ型組脫位側(cè)髖的AA均大于未受累側(cè)髖差別有統(tǒng)計學(xué)意義。在TONNISⅡ型、Ⅲ型和Ⅳ型組脫位側(cè)髖的AA均與LRA成正相關(guān)R0594P0012R0618P0001R0729P0002。結(jié)論1、中國漢族人群PAPPA2基因與DDH易感性相關(guān)。四代DDH家系中的5位DDH先證者外顯子區(qū)未發(fā)現(xiàn)基因突變。2、DDH患兒髖臼過度前傾是普遍存在的DDH患兒脫位側(cè)髖的坐骨外側(cè)旋轉(zhuǎn)引起坐骨外側(cè)移位是髖臼發(fā)生過度前傾的原因之一。3、TONNISⅡ型和Ⅲ型組脫位側(cè)髖的股骨前傾角與未受累側(cè)髖無統(tǒng)計學(xué)差異這似乎表明在TONNISⅡ和Ⅲ型組對DDH患兒行股骨去旋轉(zhuǎn)截骨也許并不是必須的。TONNISⅣ型組DDH患兒脫位側(cè)髖的股骨前傾角明顯大于未受累側(cè)髖差別有統(tǒng)計學(xué)意義這似乎表明在TONNISⅣ型組對DDH患兒行股骨去旋轉(zhuǎn)截骨是有必要的。結(jié)合前傾結(jié)合也許可以作為衡量DDH患兒是否需要做股骨去旋轉(zhuǎn)截骨的指標(biāo)。4、DDH患兒脫位側(cè)髖的骨貧內(nèi)旋畸形并不是普遍存在的股骨頭脫位程度不同時骨盆內(nèi)旋畸形發(fā)生的機(jī)制并不一致。下骨盆旋轉(zhuǎn)角與髖臼前傾程度呈正相關(guān)。下骨盆旋轉(zhuǎn)角是判斷髖臼在橫斷面前傾程度的較好指標(biāo)對于手術(shù)矯正髖臼過度前傾有較明確的指導(dǎo)意義。5、術(shù)前通過CT個性化評價DDH患兒存在的解剖形態(tài)學(xué)異常制定合理的手術(shù)方案對于改善患兒遠(yuǎn)期治療效果和預(yù)防醫(yī)源性并發(fā)癥是有意義的。

簡介：第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文多巴敏感性肌張力障礙臨床和分子遺傳學(xué)研究姓名張社卿申請學(xué)位級別博士專業(yè)神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師鄭惠民200251第一部分引言多巴敏感性肌張力障礙DOPARESPONSIVEDYSTOILIA，DRD是一種罕見的神經(jīng)系統(tǒng)遺傳性疾病，于1976年由日本SEGAWA首先報道，當(dāng)時稱之為“伴有明顯晝間變化的進(jìn)行性肌張力障礙”，并發(fā)現(xiàn)小劑量左旋多巴對之有顯著療效。據(jù)估計英國和日本的發(fā)病率約1／200萬㈨。1988年美國NYGAARD等提出多巴敏感性肌張力障礙這一名稱時，是泛指所有對左旋多巴有效的肌張力障礙”1。然而，修訂后的標(biāo)準(zhǔn)““1規(guī)定DRD專指嚴(yán)格定義的多巴敏感性肌張力障礙，即“伴有明顯晝間變化的進(jìn)行性肌張力障礙”，以晝間癥狀波動、小劑量左旋多巴有效和癥狀相對進(jìn)展緩慢為特征。我國已有相關(guān)文獻(xiàn)報道2篇”“3，朱文梅等1994以“伴有明顯晝間變化的進(jìn)行性肌張力障礙’J為名報告4例，陳嶸等1999以“多巴反應(yīng)性肌張力障礙”為名報告7例。二者同指一病。按照FESPONSIVE的英文含義“REACTINGQUICKLYORFAVORABLY，EASILYCONTR01LED”，我們認(rèn)為譯為“敏感性”似為較妥，以免導(dǎo)致歧義。多巴敏感性肌張力障礙的基本病因為遺傳的缺陷，其致病基因三磷酸鳥苷環(huán)羥化酶基因，GTPCYCLOHYDROLASELGENE已在1994年被定位在L4Q221222區(qū)域“1，屬常染色體遺傳性疾病，其遺傳方式多數(shù)為顯性，也有不少隱性和散發(fā)病例。關(guān)于其發(fā)病機(jī)理，目前的研究認(rèn)為是紋狀體內(nèi)多巴胺遞質(zhì)的缺乏，這種情況不是由于黑質(zhì)內(nèi)神經(jīng)元的丟失或減少，而是由于黑質(zhì)細(xì)胞不能合成足夠量的多巴胺1。腦內(nèi)多巴胺是由酪氨酸羥化為多巴，再脫羧基而合成；而四氫生物蝶呤是酪氨酸羥化酶的必須的天然輔助因子。所以凡影響四氫生物蝶呤合成的因素都能導(dǎo)致多巴胺的不足。三磷酸鳥苷環(huán)羥化酶是三磷酸鳥苷轉(zhuǎn)化為四氫生物蝶呤的多步驟反應(yīng)中的第一個限速酶，所以三磷酸鳥苷環(huán)羥化酶基因的異常必然影響四氫生物蝶呤的合成，從而影響多巴胺的合成反應(yīng)式如圖1所示，出現(xiàn)臨床癥狀。2

簡介：目的該課題以海島居民這一特殊人群為研究對象用現(xiàn)況調(diào)查結(jié)合病例對照研究的方法研究影響高脂血癥發(fā)病的主要環(huán)境因素和遺傳度結(jié)合分子生物學(xué)實驗技術(shù)檢測APOB基因3′等位基因的多態(tài)性期望通過該次研究為預(yù)防控制高脂血癥的發(fā)生提供科學(xué)依據(jù)結(jié)論高脂血癥是遺傳和環(huán)境因素綜合作用的結(jié)果不同類型的高脂血癥遺傳和環(huán)境因素的作用強(qiáng)度有所不同但共同點是環(huán)境因素和后天性因素起主要作用父親對子女的血脂水平的影響起主要作用海島居民APOB基因3′等位基因的多態(tài)性具有自身特點盡早采取一級和二級預(yù)防措施將對高脂血癥發(fā)生發(fā)展起到良好的預(yù)防和控制作用

簡介：安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文熒光原位雜交檢測慢性淋巴細(xì)胞白血病遺傳學(xué)異常的臨床應(yīng)用研究姓名梁興林申請學(xué)位級別碩士專業(yè)內(nèi)科學(xué)（血液?。┲笇?dǎo)教師夏瑞祥20100501安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文5結(jié)論慢性淋巴細(xì)胞白血病具有多種遺傳學(xué)異常，部分病例具有復(fù)雜核型異常，其中13Q缺失是最常見的核型異常，此外本實驗中還檢測到12、DEL（17P13）、DEL（11Q223）異常。本實驗中13Q缺失在不同性別、年齡分組以及BINET分期中差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P005）。間期熒光原位雜交技術(shù)克服了常規(guī)染色體核型分析的局限性，大大提高了慢性淋巴細(xì)胞白血病染色體異常檢出率，具有敏感、特異、直觀的優(yōu)點，在慢性淋巴細(xì)胞白血病染色體檢測中具有重要的價值，其在慢性淋巴細(xì)胞白血病患者的預(yù)后評測、治療方案的選擇以及腫瘤微小殘留病灶評估中的作用有待進(jìn)一步的研究。關(guān)鍵詞慢性淋巴細(xì)胞白血病；熒光原位雜交；分子細(xì)胞遺傳學(xué)

簡介：上海交通大學(xué)2009級44博士研究生畢業(yè)論文中國漢族敖發(fā)型顳葉癲癇患者的遺傳學(xué)研究一有關(guān)HTRLA多態(tài)性及HTRLB多態(tài)性的研究GENETICSTUDIESOFPATIENTSWITHSPORADICTEMPORALLOBEEPILEPSYLNCHINESEHANANALYSISOFPOLYMORPHISMOFHTRIAANDHTRLB學(xué)科專業(yè)臨床醫(yī)學(xué)神經(jīng)病學(xué)方向作者姓名高源指導(dǎo)教師陳生弟教授答辯日期2013年5月上海交通大學(xué)2009級44博士研究生畢業(yè)論文上海交通大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)上海交通大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密口，在年解密后適用本授權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密口。請在以上方框內(nèi)打“4”學(xué)位論文作者簽名高I佳日期■一弓年籮月嗲日持溯躲嘶日期硎瞬嘶

簡介：凝血障礙是導(dǎo)致出血性疾病的重要原因凝血過程的激活在血栓形成中也具有極為重要的作用該研究通過對部分凝血因子的基因突變和多態(tài)性研究一方面探討了遺傳出血性疾病血友病A和FⅩⅢ缺乏癥的分子機(jī)制另一方面研究了凝血因子Ⅱ、Ⅴ和ⅩⅢ的多態(tài)FⅡ20210A、FVLEIDEN和FⅩⅢAV34L在加拿大紐芬蘭人群和中國臺灣人群中的分布頻率以及與心肌梗死發(fā)病的相關(guān)性結(jié)論1在加拿大紐芬蘭TWILLIGATE地區(qū)中確認(rèn)了一個導(dǎo)致輕型血友病A的FⅧ因子VAL2016ALA方德突變研究中建立的位點特異PCR方法適合快速、準(zhǔn)確、簡便診斷當(dāng)?shù)厝巳旱妮p型血友病A已用于臨床服務(wù)同時發(fā)現(xiàn)拉博道FTEAU地區(qū)的輕型血友病A患者中有一FⅧ因子ALA200THR突變2在紐芬蘭島的FⅩⅢ缺乏癥患者中發(fā)現(xiàn)第6外顯子的剪接受位有一G→A突變3FⅡ20210A可能是MⅠ的一個風(fēng)險因子在MⅠ早發(fā)中更為重要FVL可能是MⅠ早發(fā)的易患因子FⅩⅢALEU34可能僅在男性中獨立導(dǎo)致MⅠ的易患性4FⅡ20210A和FⅩⅢALEU34相互作用產(chǎn)生的協(xié)同效應(yīng)導(dǎo)致MⅠ的強(qiáng)易患性5FⅩⅢALEU34和FVL在紐芬蘭人群中的分布與其他高加索人群一致紐芬蘭人群中FⅡ20210A的分布頻率低于已報告的其他大多數(shù)高加索人群6中國臺灣人群中FVL、FⅡ20210A和FⅩⅢALEU34都有02﹪的極低的分布頻率和01﹪的基因位點頻率

簡介：研究背景擴(kuò)張型心肌病DILATEDCARDIOMYOPATHYDCM是臨床上一類以單側(cè)或雙側(cè)心腔擴(kuò)大和心室收縮功能障礙為主要特征的常見心肌病。既往流行病學(xué)調(diào)查DCM患病率為36510萬近年來具有上升趨勢。進(jìn)行性心力衰竭和各種形式室性心律失常是DCM常見嚴(yán)重合并癥猝死風(fēng)險高因而引起研究人員廣泛關(guān)注。DCM多數(shù)情況下散發(fā)存在部分可呈現(xiàn)家族性發(fā)病趨勢遺傳因素在DCM發(fā)病中具有主導(dǎo)地位。目前國內(nèi)外對DCM家系的大量遺傳學(xué)研究已發(fā)現(xiàn)大約30％50的DCM具有顯著的遺傳基礎(chǔ)涉及近50個基因的相關(guān)變異。這些基因主要編碼肌小節(jié)蛋白、細(xì)胞骨架蛋白、核膜層蛋白等如TTN、MYH7、TNNT2和LMNA等。近來有文獻(xiàn)報道與致心律失常性右室心肌病相關(guān)的編碼橋粒蛋白基因如DSP、DSG2、PKP2以及一些離子通道基因如ABCC9、SCN5A也與DCM發(fā)病有關(guān)具有高度遺傳異質(zhì)性。鑒于DCM患者易合并各種形式心律失常甚至出現(xiàn)惡性心律失常如室性心動過速VENTRICULARTACHYCARDIAVT或心室顫動VENTRICULARFIBRILLATIONVF而導(dǎo)致猝死對DCM發(fā)生心律失常易感性的分子遺傳學(xué)機(jī)制進(jìn)行深入研究具有重要意義。DCM發(fā)病呈現(xiàn)男性多于女性的性別差異然而這種差異產(chǎn)生的原因尚不清楚。性激素或環(huán)境激素干擾物是否是DCM發(fā)病的關(guān)鍵因素還有待研究。雙酚ABISPHENOLABPA是目前公認(rèn)的一類環(huán)境激素干擾化合物廣泛用于制作聚碳酸酯、環(huán)氧樹脂等已成為世界上產(chǎn)量最高的化學(xué)物質(zhì)之一無時無刻不存在于人類生產(chǎn)生活環(huán)境中。自從研究人員發(fā)現(xiàn)BPA可從塑料制品滲出通過飲食進(jìn)入小鼠體內(nèi)并致畸以來BPA對人體健康的危害不容忽視。既往研究顯示人體持續(xù)或高水平暴露于BPA環(huán)境可引起一些激素敏感性疾病如生殖系統(tǒng)毒性、性早熟、不明原因自然流產(chǎn)、乳腺癌、前列腺癌甚至導(dǎo)致腦損害等。近年來一些基于人群的流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù)顯示BPA與心血管疾病及其危險因素有著密切的聯(lián)系且基于動物和細(xì)胞水平的研究發(fā)現(xiàn)長期BPA暴露可影響小鼠的心臟結(jié)構(gòu)和功能。然而BPA與DCM發(fā)病的相關(guān)性迄今未見報道。第一部分?jǐn)U張型心肌病并室性心動過速患者的分子遺傳學(xué)機(jī)制研究目的本研究通過候選基因檢測的方式首次探索鉀通道基因與DCM并VT的分子遺傳關(guān)聯(lián)性同時篩查DCM已知致病基因及離子通道基因新突變位點并進(jìn)一步從分子生物水平對突變基因進(jìn)行功能分析以揭示突變位點對其所編碼蛋白功能的影響深入探索DCM并VT的分子遺傳學(xué)發(fā)病機(jī)制。同時結(jié)合突變攜帶者的病歷資料探討候選基因檢測對臨床診治的潛在指導(dǎo)意義。方法1臨床資料收集經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)并獲得患者知情同意收集在我院心血管內(nèi)科住院且診斷為DCM并VT的患者臨床資料。DCM的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2006年AHA發(fā)布的心肌病當(dāng)代定義和分類以及2007年中國心肌病診斷與治療建議工作組制定的DCM診治建議。根據(jù)2006年ACCAHAESC室性心律失常指南中VT的診斷標(biāo)準(zhǔn)所有入選患者均需至少采集到一次VT發(fā)作時的心電圖記錄2候選基因篩查采集所有入選患者的外周靜脈血25ML提取DNA保存于80℃冰箱。通過候選基因篩查方式利用DNA直接測序法對已知DCM致病基因和候選鉀通道基因的全部外顯子以及外顯子內(nèi)含子交界區(qū)進(jìn)行篩查包括LMNA、MYH7、TNNT2、TNNI3、PKP2、DSP、DSG2、SCN5A和KCNQ1、KCNE1、KCNE2、KCNH2以期發(fā)現(xiàn)致病基因新突變位點對照組為400例來自相同種族但無血緣關(guān)系的健康個體以及70例不伴VT的DCM患者3體外突變誘導(dǎo)及細(xì)胞轉(zhuǎn)染在野生型質(zhì)粒的基礎(chǔ)上采用體外定點突變誘導(dǎo)技術(shù)構(gòu)建突變質(zhì)粒。根據(jù)突變位點設(shè)計誘導(dǎo)突變引物突變誘導(dǎo)后通過DNA測序驗證。通過脂質(zhì)體介導(dǎo)成功轉(zhuǎn)染突變型或野生型質(zhì)粒至人胚腎293細(xì)胞HEK293進(jìn)行表達(dá)4細(xì)胞膜片鉗電生理分析應(yīng)用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)對轉(zhuǎn)染野生型或突變型質(zhì)粒的HEK293細(xì)胞的相應(yīng)離子通道功能進(jìn)行檢測并分析其電生理特征。在室溫記錄所有相關(guān)電生理參數(shù)如電流密度、峰值以及激活曲線等。采用FITMASTER、SIGMAPLOT、IGINPRO75等軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析、繪圖5免疫熒光共聚焦檢測采用細(xì)胞免疫熒光共聚焦檢測技術(shù)觀察突變型與野生型通道蛋白在細(xì)胞內(nèi)的分布情況6蛋白印跡WESTERNBLOT分析通過提取細(xì)胞膜蛋白與漿蛋白進(jìn)行WESTERNBLOT分析轉(zhuǎn)染野生型與R397Q突變型質(zhì)粒的細(xì)胞KCNQ1通道蛋白表達(dá)水平7數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計學(xué)分析所有獲取數(shù)據(jù)均采用SPSS180軟件包進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差X±S表示兩組比較采用T檢驗多組比較采用ANOVA檢驗。結(jié)果以P結(jié)果1本研究共納入符合條件的DCM并VT患者10例其中男性7例女性3例年齡1677歲平均年齡487±204歲。其中2例患者合并右束支傳導(dǎo)阻滯1例合并左束支傳導(dǎo)阻滯超聲心動圖結(jié)果顯示左室舒張末徑5375MM左室收縮末徑4067MM左室射血分?jǐn)?shù)2245。2通過對候選基因編碼區(qū)的全部外顯子以及內(nèi)含子外顯子結(jié)合區(qū)進(jìn)行測序并與400例正常對照以及70例不伴VT的DCM患者進(jìn)行比較共發(fā)現(xiàn)3個基因新突變位點分別為KCNQ1PR397Q、DSG2PR824G和SCN5APV1604M突變。KCNQ1PR397Q突變KCNQ1基因雜合子錯義突變第1190位核苷酸由G變?yōu)锳即C1190GA從而導(dǎo)致第397位氨基酸由精氨酸變?yōu)楣劝滨０贰CNQ1PR397Q突變存在于一位60歲男性DCM并VT患者。該患者入院心電圖QT正常經(jīng)射頻消融術(shù)及口服胺碘酮治療后VT復(fù)發(fā)隨后再次行射頻消融術(shù)并植入ICD目前隨訪患者情況良好。SCN5APV1604M突變SCN5APV1604M突變SCN5A基因雜合子錯義突變第4810位核苷酸由G變?yōu)锳即C4810GA從而導(dǎo)致第1604位氨基酸由纈氨酸變?yōu)榈鞍彼?。該突變存在于一?1歲男性DCM并VT患者。該患者主要表現(xiàn)為胸悶氣逼癥狀。10年前曾在外院經(jīng)超聲心動圖診斷DCM。入我院時心電圖提示完全性右束支傳導(dǎo)阻滯心房顫動24小時動態(tài)心電圖提示短陣VT。目前該患者已失訪病情進(jìn)展情況未知。DSG2PR824G突變DSG2基因雜合子錯義突變第2470位核苷酸由C變?yōu)镚即C2470CG從而導(dǎo)致第824位的精氨酸被甘氨酸替代。DSG2PR824G突變存在于一位65歲男性DCM并VT患者臨床表現(xiàn)為心力衰竭和暈厥表型嚴(yán)重但拒絕行ICD或CRTD植入術(shù)帶藥出院半年后隨訪得知在家中猝死。本研究發(fā)現(xiàn)了5個單核苷酸多態(tài)性位點SNP分別為KCNQ1PI145I、DSG2PR773K、DSG2PT835T、MYH7PI989I以及PKP2PP273P。其中DSG2PR773K、DSG2PT835T和PKP2PP273P為新發(fā)SNP。3全細(xì)胞膜片鉗檢測顯示R397Q突變通道與野生型相比IKS值在電壓為2080MV時明顯降低提示鉀通道功能降低然而R397Q突變型與野生型的穩(wěn)態(tài)激活曲線以及電壓依賴失活常數(shù)均無顯著性差異。與野生型相比R397Q突變并不影響半數(shù)激活電壓以及斜率。4免疫熒光共聚焦結(jié)果檢測提示與野生型相比轉(zhuǎn)染R397Q突變質(zhì)粒的細(xì)胞上紅色免疫熒光幾乎全部被局限在細(xì)胞漿內(nèi)而未能到達(dá)細(xì)胞膜導(dǎo)致KCNQ1蛋白在細(xì)胞膜上的定位明顯下降進(jìn)一步行WESTERNBLOT分析發(fā)現(xiàn)與野生型相比R397Q突變型KCNQ1蛋白在細(xì)胞膜上表達(dá)量明顯減少P結(jié)論1本研究首次揭示KCNQ1基因是DCM并VT致病基因進(jìn)一步通道電生理分析顯示KCNQ1基因R397Q突變可通過“功能減退”導(dǎo)致DCM并VT的發(fā)生。KCNQ1通道蛋白膜定位表達(dá)下降以及轉(zhuǎn)運缺陷均有可能參與了通道“功能減退”的病理機(jī)制。2在DCM并VT患者中檢測到SCN5A基因新突變位點V1604M以及DSG2基因新突變位點R834G提示DCM患者VT致病基因的異質(zhì)性。3本研究檢測到5個SNPS分別為KCNQ1PI145I、DSG2PR773K、DSG2PT835T、MYH7PI989I以及PKP2PP273P。其中DSG2PR773K、DSG2PT835T和PKP2PP273P為新報道SNP。據(jù)他人結(jié)果報道推測KCNQ1PI145I多態(tài)性可能與DCM患者發(fā)生VT易感性有關(guān)。4攜帶KCNQ1PR397Q突變患者經(jīng)射頻消融術(shù)并服用胺碘酮后仍反復(fù)發(fā)作VT說明攜帶基因突變的患者射頻消融和藥物治療效果均欠佳需要ICD置入治療提示基因篩查對臨床治療的潛在指導(dǎo)意義。5DCM不僅是心臟結(jié)構(gòu)疾病也是與離子通道相關(guān)的電生理疾病。本研究成果將為離子通道心肌病新概念的提出提供了堅實的理論支持依據(jù)深入研究離子通道在DCM發(fā)病中的機(jī)制將為尋找DCM治療新靶點提供科學(xué)基礎(chǔ)和理論依據(jù)。第二部分環(huán)境內(nèi)分泌干擾化合物雙酚A與擴(kuò)張型心肌病的相關(guān)性探討目的檢測血清BPA水平以及性激素相關(guān)指標(biāo)在擴(kuò)張型心肌病病例組和健康對照組中的差異探索血清BPA水平對DCM發(fā)病的影響并分析BPA與性激素相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系。方法1通過采用11匹配病例對照研究的方法納入在2012年3月至2013年6月期間在本院心血管內(nèi)科住院并診斷為DCM的患者作為病例組。同期在本院的體檢中心根據(jù)性別年齡匹配原則選取的健康人群作為對照組。排除入組前3個月內(nèi)曾接受激素治療者外所有入選研究對象均簽署知情同意書并對其臨床資料堅持嚴(yán)格保密原則。2所有研究對象均于入院次日或體檢當(dāng)日清晨700至1000采集空腹靜脈血6ML當(dāng)天分離血清并保存于80℃低溫冰箱待集中測定血清BPA水平以及性激素相關(guān)指標(biāo)包括雌二醇E2、睪酮T、性激素結(jié)合蛋白SHBG、雌激素受體ΑERΑ、雌激素受體ΒERΒ。根據(jù)T值和SHBG值利用公式計算游離雄激素指數(shù)FREEROGENINDEXFAI值FAIT100SHBG。采用酶聯(lián)免疫吸附法ELISA測定上述指標(biāo)BPAELISA檢測試劑盒由日本IBL公司提供其余ELISA檢測試劑盒由武漢優(yōu)爾生科技股份有限公司提供。嚴(yán)格按照試劑盒說明書要求采集并保存血清標(biāo)本根據(jù)其提供的操作步驟及要求準(zhǔn)備試劑及控制反應(yīng)條件用酶標(biāo)儀測量標(biāo)本光密度值OD值。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度和OD值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線然后用樣品OD值計算出樣品濃度值。3研究數(shù)據(jù)采用SPSS180軟件包進(jìn)行處理并分析。所有計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差X±S表示計數(shù)資料采用百分比表示呈正態(tài)分布數(shù)據(jù)兩組間比較采用T檢驗非正態(tài)分布數(shù)據(jù)組間比較采用秩和檢驗控制各項混雜因素后采用線性回歸方法分析血清BPA水平與性激素各項指標(biāo)的相關(guān)性。結(jié)果以P結(jié)果1共納入符合標(biāo)準(zhǔn)的DCM病例88例以及健康對照88例。其中DCM組男性59例女性29例男女發(fā)病比為201。DCM組平均年齡是596±132歲對照組平均年齡是590±127歲。兩組在性別年齡比較上無統(tǒng)計學(xué)差異P005。2血清BPA檢測結(jié)果DCM病例組和健康對照組的血清BPA水平分別為69±27NGML38±19NGML兩組比較具有顯著統(tǒng)計學(xué)差異P3性激素相關(guān)指標(biāo)檢測結(jié)果DCM病例組和健康對照組的血清T水平、SHBG水平以及FAI值均存在統(tǒng)計學(xué)差異其結(jié)果分別為4883±1882PGMLVS5558±1658PGML、769±309NMOLLVS410±156NMOLL以及29±35VS53±26兩組比較均具有顯著統(tǒng)計學(xué)差異P4血清BPA與性激素水平的相關(guān)性控制各項混雜因素后采用線性回歸方法分析血清BPA水平與性激素各項指標(biāo)的相關(guān)性結(jié)果顯示血清BPA水平與SHBG水平呈現(xiàn)正相關(guān)性Β004195CI00240058P結(jié)論1與健康人群相比較DCM患者血清BPA水平、SHBG水平均增高而FAI值和血清T水平較低且這些統(tǒng)計學(xué)關(guān)聯(lián)無性別差異。2血清BPA水平與SHBG水平具有正相關(guān)性與其他性激素參數(shù)未見統(tǒng)計學(xué)關(guān)聯(lián)但DCM組BPA水平較高的同時FAI值和T水平均低于健康對照組。這些結(jié)果提示DCM患者BPA高水平暴露可能引起體內(nèi)SHBG水平相應(yīng)升高。

簡介：目的建立粘多糖貯積癥Ⅱ型患者艾杜糖2硫酸酯酶IDS基因突變的檢測方法探討患者IDS基因的常見基因突變類型及突變與表型的相關(guān)性方法生化檢測診斷為粘多糖貯積癥Ⅱ型應(yīng)用PCR技術(shù)擴(kuò)增IDS基因常見突變外顯子2、3、5、7、8、9PCR產(chǎn)物經(jīng)聚合酶鏈反應(yīng)單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析采用中性聚丙烯酰胺凝膠進(jìn)行電泳檢測出現(xiàn)異常電泳條帶的標(biāo)本進(jìn)行DNA測序生物信息學(xué)相關(guān)軟件分析確定基因突變存在及其類型限制性酶切分析驗證突變結(jié)果在4個家系中篩查出2例粘多糖貯積癥Ⅱ型IDS基因突變攜帶者、2例患者DNA序列分析發(fā)現(xiàn)一患者的外顯子7發(fā)生一個新的點突變G1253T一患者外顯子9發(fā)生一個新的點突變C1672T另兩例患者未查到突變限制性酶切分析示預(yù)期電泳條帶酶切結(jié)果進(jìn)一步驗證了序列分析結(jié)果結(jié)論聯(lián)合應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析、DNA測序和聚合酶鏈反應(yīng)限制性片段長度多態(tài)性分析能快速、準(zhǔn)確地檢測出粘多糖貯積癥Ⅱ型患者及攜帶者基因突變位點為粘多糖貯積癥Ⅱ型患者家系的產(chǎn)前診斷打下了基礎(chǔ)

簡介：目的高血糖“代謝記憶”效應(yīng)同糖尿病心血管并發(fā)癥的發(fā)生與發(fā)展密切相關(guān)然而其具體機(jī)制目前仍尚未明確。血管內(nèi)皮細(xì)胞型一氧化氮合酶ENOS功能紊亂在糖尿病血管并發(fā)癥的發(fā)展中發(fā)揮了關(guān)鍵總用。因此本研究擬建立高血糖代謝記憶細(xì)胞模型及動物模型觀察ENOS功能紊亂在糖尿病高血糖“代謝記憶”效應(yīng)中是否發(fā)揮了重要作用并對其具體機(jī)制進(jìn)行探討。方法高血糖代謝記憶人主動脈細(xì)胞分為4組1正常對照組55MM葡萄糖濃度的M200培養(yǎng)基培養(yǎng)4天2持續(xù)高糖組30MM葡萄糖濃度的M200培養(yǎng)基培養(yǎng)4天3代謝記憶組30MM葡萄糖濃度的M200培養(yǎng)基培養(yǎng)24H后轉(zhuǎn)為55MM葡萄糖濃度的M200培養(yǎng)基持續(xù)培養(yǎng)3天4滲透壓對照組245MM甘露醇55MM葡萄糖濃度的M200培養(yǎng)基作為滲透壓對照組持續(xù)培養(yǎng)4天。WISTAR大鼠分為3組1正常對照組飼養(yǎng)24周2糖尿病組STZ誘導(dǎo)成模后飼養(yǎng)24周3代謝記憶組STZ誘導(dǎo)成模后高糖狀態(tài)維持12周隨后使用胰島素控制血糖至正常范圍。檢測內(nèi)皮細(xì)胞及大鼠主動脈組織相關(guān)指標(biāo)內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮NO活性水平前炎癥因子MCP1、ICAM1及IL6MRNA的表達(dá)水平細(xì)胞及組織內(nèi)活性氧水平ENOSMRNA及蛋白的表達(dá)水平以及ENOSSER1177的磷酸化水平。結(jié)果在人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞及大鼠主動脈組織中高糖導(dǎo)致NO水平持續(xù)下降而前炎癥因子MCP1、ICAM1、IL6MRNA的表達(dá)水平以及活性氧水平持續(xù)升高同時NOX活性也持續(xù)升高即使血糖降至正常后仍然未恢復(fù)。抑制細(xì)胞內(nèi)ENOS活性則可降低細(xì)胞及組織中活性氧水平及前炎癥因子的表達(dá)而且抑制細(xì)胞內(nèi)NOX活性可恢復(fù)細(xì)胞內(nèi)NO生物活性水平。我們進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)高糖導(dǎo)致ENOS持續(xù)高表達(dá)而ENOSSER1177的磷酸化水平則持續(xù)下降即使血糖降至正常后仍然未恢復(fù)。結(jié)論早期高血糖誘發(fā)了細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激持續(xù)損傷血管內(nèi)皮舒張功能誘導(dǎo)前炎癥因子的持久高表達(dá)導(dǎo)致持續(xù)的血管內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂而恢復(fù)正常血糖后以上效應(yīng)仍然持續(xù)。功能紊亂的ENOS持久高表達(dá)成為活性氧的持續(xù)供體在高血糖代謝記憶中發(fā)揮了重要作用而NOX在誘發(fā)ENOS功能紊亂中發(fā)揮了重要作用。目的有研究表明高血糖導(dǎo)致血管損傷的關(guān)鍵靶基因發(fā)生了表觀遺傳學(xué)修飾參與了高血糖“代謝記憶”效應(yīng)的形成及發(fā)展。我們前期的研究也顯示早期高血糖導(dǎo)致內(nèi)皮型一氧化氮合成酶ENOS基因表達(dá)活性的持續(xù)改變。因此我們推測高血糖導(dǎo)致了ENOS基因的表觀遺傳學(xué)修飾發(fā)生了持久的改變從而導(dǎo)致其表達(dá)活性的改變。本研究擬建立高血糖代謝記憶細(xì)胞模型觀察ENOS基因的表觀遺傳學(xué)改變并對其具體機(jī)制進(jìn)行探討。方法高血糖代謝記憶人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞分為4組同第一部分一致1正常對照組2持續(xù)高糖組3代謝記憶組4滲透壓對照組。采用電轉(zhuǎn)染法向內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)染SET7特異性的SHRNA表達(dá)質(zhì)粒或者過表達(dá)質(zhì)粒使內(nèi)皮細(xì)胞沉默SET7基因的表達(dá)或者過表達(dá)SET7基因。采用染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)CHIP檢測內(nèi)皮細(xì)胞表觀遺傳學(xué)修飾相關(guān)指標(biāo)ENOS基因啟動子區(qū)H3K4M1H3K4M2H3K4M3H3K9M2及H3K4M3修飾水平以及SET7在ENOS基因啟動子區(qū)富集水平。結(jié)果在人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞中前期短暫高糖導(dǎo)致ENOS基因表達(dá)持續(xù)增加ENOS基因啟動子區(qū)H3K4M1修飾水平持續(xù)升高以及介導(dǎo)H3K4M1修飾的甲基轉(zhuǎn)移酶SET7含量增加而H3K9M2及H3K9M3的修飾水平則持續(xù)下降即使轉(zhuǎn)為正常糖濃度培養(yǎng)仍不能逆轉(zhuǎn)這一變化。沉默細(xì)胞內(nèi)SET7基因的表達(dá)則可逆轉(zhuǎn)高糖導(dǎo)致ENOS基因表達(dá)的持續(xù)增加逆轉(zhuǎn)ENOS基因啟動子區(qū)SET7含量的增加及上述表觀遺傳修飾的改變而使內(nèi)皮細(xì)胞過表達(dá)SET7基因則得到相反的結(jié)果。結(jié)論早期高糖誘發(fā)了人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞中內(nèi)皮型一氧化氮合成酶ENOS基因啟動子區(qū)表觀遺傳學(xué)修飾持久的改變從而導(dǎo)致ENOS基因表達(dá)活性的持久改變即使恢復(fù)正糖后仍未逆轉(zhuǎn)這一改變而甲基轉(zhuǎn)移酶SET7介導(dǎo)了ENOS基因啟動子區(qū)表觀遺傳學(xué)修飾的改變。

簡介：為了解天津地區(qū)MRSA以及MRCONS的流行趨勢，本研究在2002年7月至2004年6月，連續(xù)2年收集了天津市某三級甲等醫(yī)院分離的葡萄球菌臨床株，分析了MRSA的分離率，危險因素和流行趨勢。同時對部分近年來天津市感染疾病研究所收集的天津市八所三級甲等醫(yī)院分離的葡他球菌臨床株進(jìn)行了基因分型研究。初步了解本地區(qū)的MRSA的遺傳特性。第一部分是對天津市葡萄球菌臨床分離株的藥物敏感性和臨床資料分析，以了解本地區(qū)MRSA和MRCONS的地區(qū)流行情況及趨勢，金葡菌攜帶與感染之間是否存在相關(guān)性，為臨床經(jīng)驗性治療以及制定控制MRSA的傳播的措施提供理論依據(jù)。經(jīng)研究得出結(jié)論191株葡萄球菌臨床株的臨床分析結(jié)果體現(xiàn)了葡萄球菌造成感染的高危因素；“配對”篩選的MSSA株P(guān)242和P248的耐藥表型一致，提示攜帶菌株和感染灶治病菌株之間可能存在相關(guān)性。第二部分是36株葡萄球菌臨床株的基因分型研究，用以分析近年來天津市分離的葡萄球菌臨床的遺傳背景，并通過對兩株“配對”MSSA的進(jìn)行基因分型，分析它們的基因背景相關(guān)性。經(jīng)研究得出結(jié)論攜帶SCCMECⅢ的BRAZILIANHUNGARIAN克隆可能是醫(yī)院內(nèi)MRSA感染的優(yōu)勢菌株。在MRCONS中廣泛攜帶MECA基因和SCCMEC基因元件。其中一部分?jǐn)y帶有與EMRSA和CMRSA相同的SCCMEC元件。金黃色葡萄球菌的攜帶與感染之間存在一定的聯(lián)系，但是其關(guān)聯(lián)程度仍需要進(jìn)行大樣本的調(diào)查。多重引物PCR方法，對MRSA和MRCONS所攜帶的SCCMEC基因元件進(jìn)行分型存在一定的局限性。由于SCCMEC的多態(tài)性，該方法難以對所有葡萄球菌所攜帶的SCCMEC進(jìn)行精確的分型，但是能夠?qū)CCMEC的分型提供一定的線索。

簡介：目的對中國漢族遺傳性易栓癥家系進(jìn)行篩選實驗確定臨床分型，并進(jìn)行因子V突變檢測，探索漢族人群的遺傳性活化蛋白C抵抗（RESISTANCEOFACTIVATEDPROTEINCAPCR）癥遺傳特點。方法收集一個中國漢族遺傳性易栓癥家系成員14名臨床資料，并進(jìn)行相關(guān)生化篩查，進(jìn)行初步診斷，對APCR陽性患者應(yīng)用常規(guī)PCR擴(kuò)增、限制性片段長度多態(tài)性（RFLP）分析和DNA測序，以健康正常100名作為對照，對易栓癥相關(guān)基因FV進(jìn)行FVLEIDEN（G1691A）突變檢測以排除突變，并選擇基因其它外顯子進(jìn)行突變檢測。結(jié)果該家系呈常染色體顯性遺傳，易栓癥實驗篩選指標(biāo)凝血酶原時間（PT）、纖維蛋白原（FIB）、蛋白C（PC）、抗凝血酶（AT）、狼瘡抗凝物（LA）、抗心磷脂抗體（ACA）、高同型半胱氨酸（HCY）、蛋白S（PS）、血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）等測定值均在正常范圍內(nèi)，活化部分凝血活酶時間（APTT）縮短、活化蛋白C敏感比值（APCSR）低于正常范圍，均符合遺傳性APCR的診斷標(biāo)準(zhǔn)。通過對這14名APCR陽性家系成員和100名健康正常對照進(jìn)行PCRRFLP和DNA測序分析，結(jié)果顯示易栓癥相關(guān)基因（FV）第10號外顯子均不存在FVLEIDEN突變。但發(fā)現(xiàn)存在FVRS6020AG純合突變，提示在中國漢族人群中可能存在與APCR相關(guān)新的FV基因突變。結(jié)論該遺傳性APCR癥家系中排除了FVLEIDEN突變，提示APCR存在遺傳異質(zhì)性；發(fā)現(xiàn)了FVRS6020AG純合突變，提示在中國漢族人群中可能存在與APCR相關(guān)新的FV基因突變

簡介：點擊查看更多右心室非流出道起源室性期前收縮的心電圖特征、電生理標(biāo)測與射頻消融及遺傳學(xué)特征初步探索.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)（北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院）博士學(xué)位論文反常性痤瘡（毛囊閉塞三聯(lián)征）的遺傳學(xué)調(diào)查與PAK4基因突變的研究姓名劉卓申請學(xué)位級別博士專業(yè)臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師王寶璽20070101北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文位點，其中位于EXON7內(nèi)的為新發(fā)現(xiàn)的一個SNP，另外兩個分別是位于EXONL的RS4803206和位于EXON3的RSL2976664。連鎖不平衡分析提示這3個SNPS位點與反常性痤瘡可能存在連鎖。結(jié)論1河南鶴壁市這一反常性痤瘡家系遺傳方式屬常染色體顯性遺傳，在家系中存在導(dǎo)致反常性痤瘡發(fā)病的突變基因。2在PAK4基因的所有外顯子及臨近的內(nèi)含予區(qū)中未發(fā)現(xiàn)明確的致病突變。進(jìn)一步的連鎖不平衡分析結(jié)果未提示這三個SNPS與反常性痤瘡存在強(qiáng)連鎖關(guān)系。因此可以確定，PAK4基因不是本家系反常性痤瘡發(fā)病的致病基因。但本病屬復(fù)雜疾病，具有遺傳異質(zhì)性，不同家系的主要致病基因可能不同，鑒于PAK4基因功能的特點，PAK4基因仍然是研究反常性痤瘡發(fā)病機(jī)制的很有價值的候選基因。3同時，連鎖不平衡分析的結(jié)果顯示PAK4基因內(nèi)的3個SNPS位點與反常性痤瘡可能存在連鎖，提示本家系反常性痤瘡的致病基因在PAK4基因附近。本家系的致病基因有待進(jìn)一步明確。關(guān)鍵詞反常性痤瘡、毛囊閉塞三聯(lián)征、家系遺傳、PAK4基因突變

簡介：學(xué)校代碼1057L學(xué)號2011010236密級公開一罕見遺傳性脊神經(jīng)鞘瘤病家系臨床及遺傳學(xué)研究THERESEARCHABOUTCLINICALANDGENETICMUTATIONS’FEATURESINARARESCHWANNOMATOSISFAMILY學(xué)科門類臨床醫(yī)學(xué)學(xué)科、專業(yè)外科學(xué)骨外科研究方向年級研究生姓名導(dǎo)師姓名起止日期脊柱脊髓腫瘤的遺傳學(xué)研究二。一一級盧明南郭偉韜教授廣東醫(yī)學(xué)院二。一四年五月LIULIIIIIIIIIIIIIIIIIIII目錄Y2662490中文摘要??????????????????????????????。1ABSTRACT????????????????????????????????????????31前言??????????????????????????????51．1研究背景????????????????????????????51．2研究目的????????????????????????????．71．3研究內(nèi)容????????????????????????????82材料與方法????????????????????????????92．1遺傳性脊神經(jīng)鞘瘤病家系的臨床調(diào)查分析??????????????．92．2脊神經(jīng)鞘瘤病組織的病理學(xué)研究??????????????????162．3遺傳性脊神經(jīng)鞘瘤病家系的遺傳學(xué)研究???????????????173結(jié)果????????????????????????????????????????．．263．1遺傳性脊神經(jīng)鞘瘤病家系臨床分析總結(jié)???????????????263．2遺傳性脊神經(jīng)鞘瘤病家系遺傳學(xué)研究結(jié)果??????????????334{寸論????????????????????????????????????????．404．1該家系是一個罕見的遺傳性脊神經(jīng)鞘瘤病大家系???????????404．2SMARCBL基因的種系突變使家族性神經(jīng)鞘瘤病發(fā)病及遺傳??????404．3NF2基因的體細(xì)胞突變并非神經(jīng)鞘瘤病發(fā)病的必要條件????????424．4本家系可能存在其他位點或其他類型突變??????????????424．5SMARCBI基因突變使神經(jīng)鞘瘤病發(fā)病的下游機(jī)制有待探究??????435小結(jié)????????????????????????????????????????．44參考文獻(xiàn)?????????????????????????????45文獻(xiàn)綜述?????????????????????????????48綜述參考文獻(xiàn)????????????????????????????55致謝????????????????????????????????????????．59P付錄????????????????????????????????????????．60附錄一縮略詞表????．??????????????????????60附錄二碩士期間發(fā)表及參與的論文??????????????????62

簡介：碩士學(xué)位論文論文題目白血病淋巴瘤患者分子遺傳學(xué)異常與預(yù)后相關(guān)性研究研究生姓名高攀科指導(dǎo)教師姓名曹祥山專業(yè)名稱內(nèi)科學(xué)（血液病學(xué)）研究方向惡性血液病分子遺傳學(xué)研究論文提交日期2014年4月