簡介：點擊查看更多非甾體類消炎藥（NSAID）相關(guān)性胃病的臨床分析及遺傳學(xué)機制探討.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目的本實驗通過較大樣本的病例對照研究探討遺傳因素包括染色體異常Y染色體AZF微缺失及AZFC部分缺失與男性不育的關(guān)系。方法對實驗組482例生精障礙患者無精癥患者206例、嚴重少精癥患者153例、少精癥患者123例和對照組214例精液正常已生育男性進行外周血細胞培養(yǎng)染色體核型分析確定染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常與男性不育的關(guān)系并對染色體核型正常的446例生精障礙患者和正常生精男性運用多重PCR技術(shù)檢測AZF微缺失。同時對未發(fā)生AZF微缺失的404例生精障礙患者和正常生精男性進行AZFC區(qū)部分缺失檢測確定AZFC區(qū)部分缺失類型并應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)限制性片段長度多態(tài)性技術(shù)PCRRFLP對存在GRGR和B2B3缺失的標本進行DAZ基因拷貝缺失分析。結(jié)果1染色體檢查在482例生精障礙患者中共發(fā)現(xiàn)36例患者存在染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目的異常發(fā)生率為747％。其中無精癥、嚴重少精癥和少精癥患者的發(fā)生率分別為126226206、5238153、1622123。在對照組中未發(fā)現(xiàn)染色體異常。2AZF微缺失檢測在446例生精障礙患者中檢測出42例AZF微缺失缺失率為942。其中無精癥、嚴重少精癥、少精癥患者的發(fā)生率分別為122222180、117217145、2483121。少精癥患者的AZF基因缺失率與無精癥及嚴重少精癥患者之間在統(tǒng)計學(xué)上均存在顯著性差異P005。42例微缺失中最常見的是AZFDC區(qū)共缺失約占總?cè)笔У?4762342。在對照組中未發(fā)現(xiàn)AZF微缺失。3AZFC區(qū)部分缺失檢測在404例生精障礙患者和對照組中共發(fā)現(xiàn)84例部分缺失其中41例GRGR型缺失42例B2B3型缺失和1例B1B3缺失。無精癥患者、嚴重少精癥患者和少精癥患者與正常生精男性的B2B3缺失率差異均有統(tǒng)計學(xué)意義P4DAZ基因拷貝缺失檢測在GRGR缺失和B2B3缺失患者中共發(fā)現(xiàn)四種DAZ基因拷貝類型缺失DAZ1DAZ2DAZ3DAZ4DAZ1DAZ4DAZ2DAZ3。生精障礙組與對照組間的DAZ3DAZ4型缺失發(fā)生率具有顯著差異性P結(jié)論無精癥和嚴重少精癥患者中存在較高頻率的染色體異常先天性睪丸發(fā)育不全綜合征仍是最常見的導(dǎo)致生精障礙的染色體數(shù)目異常核型生精障礙患者Y染色體微缺失發(fā)生率較高提示Y染色體AZF微缺失與精子生成障礙有相關(guān)性B2B3型缺失在生精障礙患者中發(fā)生率明顯高于正常生精男性提示B2B3型缺失可能是男性不育的一個遺傳因素其導(dǎo)致男性不育的機制可能與DAZ3DAZ4型缺失有關(guān)。

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簡介：上海第二醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文原發(fā)性胃癌分子細胞遺傳學(xué)變化的研究姓名朱亞青申請學(xué)位級別博士專業(yè)外科學(xué)（普外）指導(dǎo)教師尹浩然200341上海第二醫(yī)科大學(xué)博學(xué)位論文結(jié)果CGH研究了23例原發(fā)性胃癌中21例至少有一個染色體臂發(fā)生擴增或丟失，在所有染色體臂中只有14、21號和Y染色體未發(fā)生異常改變。常見的染色體擴增區(qū)域有8Q，20Q，17Q，3Q，7Q，LLQ，13Q，LQ和20P，高水平的DNA擴增區(qū)域有8Q，LQ2125，3Q2629和16Q1113。常見的染色體丟失區(qū)域有17P，18Q，5Q，8P和9P。平均每例腫瘤染色體臂變化數(shù)為752，擴增數(shù)要明顯多于丟失數(shù)538214。總DNA拷貝畸變數(shù)和擴增數(shù)在胃癌TNMILL期和Ⅳ期中均高于TNMI期和II期，兩者比較有顯著性差異。在腫瘤胃壁浸潤至T3、T4時，其總DNA拷貝畸變數(shù)、擴增數(shù)和丟失數(shù)均要高于浸潤至TL、T2。應(yīng)用位于18Q21上的六個微衛(wèi)星標記位點對50例原發(fā)性胃癌組織進行雜合性丟失分析，78％39／50的病人至少有一個位點出現(xiàn)雜合性丟失。D18S450LOH發(fā)生率最高達489％，其次D18S474LOH發(fā)生率為391％，D18S484LOH和D18S487LOH發(fā)生率較低，僅為267％和239％。丟失圖的排列鑒定了一個最小共同丟失區(qū)，定位在D18S450和D18474之間。18Q21LOH多見于淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移的和TNMIII期和Ⅳ期胃癌病人。位于18Q21上的抑癌基因SMAD2、DPC4和DCC位點發(fā)生LOH的頻率分別為551％，592％和367％；SMAD2位點LOH多見于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM1／I期和Ⅳ期胃癌病人；DPC4位點LOH的發(fā)生率隨著胃壁浸潤深度的加深而升高，多見于腫瘤直徑T5ERA和TNMI／I期和Ⅳ期胃癌病人；DCC位點LOH多見于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌病人。SMAD2和DPC4的突變在胃癌中很少見，DCC突變率為2449％12／49所有突變均在DCC基因第201密碼子上，發(fā)生點突變，胞嘧啶C被替換為烏嘌呤G，由CGA精氨酸一GGA甘氨酸。胃竇部胃癌DCC突變率高于胃體和賁門部胃癌，TNMIII期和Ⅳ期DCC突變率要高于TNMI期和Ⅱ期胃癌。位于20Q13上的癌基因ZNF217基因相對拷貝數(shù)在胃癌和正常胃粘膜中比較無顯著性差異，ZNF217基因擴增率在胃癌中為1136％，多見于腫瘤直徑≥5CM的和腸型胃癌。胃癌中BTAK和CAS基因相對拷貝數(shù)均顯著高于正常胃粘膜，胃癌中BTAK擴增率為1667％，CAS擴增率為2973％。BTAK基因擴增與胃癌臨床病理學(xué)指標之間無相關(guān)性。CAS基因擴增多見于淋巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn)移者。結(jié)論原發(fā)眭胃癌中有多處染色體區(qū)域發(fā)生DNA拷貝數(shù)畸變這些區(qū)域中可能存在著與胃癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)的癌基因和抑癌基因，是定位克隆胃癌相關(guān)基因的候選區(qū)域。18Q21在胃癌中存在著高頻的LOH，在D18S450和D18S474之間存在著一個最小共2

簡介：浙江大學(xué)博士學(xué)位論文常染色體顯性遺傳“珊瑚狀”核性白內(nèi)障的分子遺傳學(xué)研究姓名徐偉珍申請學(xué)位級別博士專業(yè)腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師鄭樹20040301淅W大掌博士研競生牛業(yè)論文顯性遺傳性白內(nèi)障的形成，這些基因包括晶狀體蛋白基因CRYAA，CRYAB“1，CRYBA，CRYBB1，CRYGC1，CRYGD“23，HOMEOBOX基因PITX3““，主要內(nèi)源性蛋白基因THEMAJORINTRINSICPROTEIN，MIP““。珠狀絲蛋白基因BEADEDFILAMENTPROTEIN，BFSP2““，EONNEXINS基因CX50““，CX46“”和熱休克轉(zhuǎn)錄因子4基因HSF4‘“。由于遺傳性白內(nèi)障的表型復(fù)雜多樣，且遺傳性白內(nèi)障有著極為明顯的遺傳異質(zhì)性，即同一種基因的不同或同一突變可有不同的臨床表現(xiàn)，甚至出現(xiàn)在同一家系中；而同一臨床表現(xiàn)又可源于不同的致病基因的突變。目前研究工作主要從兩方面著手一方面，從與白內(nèi)障形成有關(guān)的重要功能蛋白出發(fā)，通過各種雜交技術(shù)找到其染色體編碼位點，作為突變研究中的重要候選基因；另一方面，對典型的大樣本家系資料，進行連鎖分析、全基因組掃描確定染色體定位，然后對定位區(qū)域內(nèi)候選基因篩選測序發(fā)現(xiàn)突變位點，來明確與白內(nèi)障形成相關(guān)的基因。本研究在臨床中發(fā)現(xiàn)～個延續(xù)四代帶有罕見表型的自內(nèi)障家系，其表型非常特殊雙側(cè)晶狀體核性混濁，伴后極向前方呈放射狀點片狀白色混濁，象大海中的珊瑚，其間還可見點狀金屬樣反光。其表型與NETTLESHIP首次報道的罕見的珊瑚狀自內(nèi)障表型部分類似。目前國內(nèi)外尚未有與珊瑚狀自內(nèi)障形成相關(guān)的基因缺陷報道，對此家系進行分子遺傳學(xué)研究，希望能明確該病的致病基因，為明確白內(nèi)障的發(fā)生機制，致病途徑和進～步的基因診斷提供基礎(chǔ)。第一部分珊瑚狀核性白內(nèi)障家系通過系列眼病檢查和全身檢查發(fā)現(xiàn)，在38個家系成員中調(diào)查到的所有23例患者中，晶體混濁表現(xiàn)除了程度上略有差別外，形態(tài)完全一致雙側(cè)晶狀體核性混濁，點片狀白色混濁從核向四周放射狀分布在晶體前后極之間的中軸部及其附近，其間還可見點狀金屬樣反光，為較少見的珊瑚狀核性白內(nèi)障。本家系的自內(nèi)障生來就有，其四代中每代都有患者，且該病未見延伸至無親緣關(guān)系的個體，疾病的臨床特點符合遺傳癇的診斷，為先天遺傳性白內(nèi)障。另外，該家系中未發(fā)現(xiàn)其他全身疾病，可排除各類綜合癥，即不是染色體病。從眼部觀察和檢查來看，除晶狀體混濁外均未發(fā)現(xiàn)其他明顯的異常，不存在一般先天性自內(nèi)障較常見的小

簡介：目的研究日本血吸蟲SCHISTOSOMEJAPONICUM中間宿主湖北釘螺ONCOMELANIAHUPENSIS生物學(xué)特性、血淋巴細胞大量獲取的方法學(xué)、血淋巴細胞的形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)特性，以進一步揭示日本血吸蟲攻擊并感染釘螺的侵入機制及其自身保護性機制，研究釘螺分類、遺傳特性及篩選抗性株釘螺，為血吸蟲病流行病學(xué)調(diào)查研究、血吸蟲病防治策略的制訂提供理論依據(jù)。方法參照外周淋巴器官中淋巴細胞的懸浮收集法，獲取釘螺血淋巴細胞，GIEMSA染色后觀察其形態(tài)。血淋巴細胞經(jīng)結(jié)晶紫染色后分別計數(shù)懸浮法、傳統(tǒng)壓片法及針刺法獲取的血淋巴細胞數(shù)，并對其進行方差分析和DUNTT檢驗。取凍融的血淋巴細胞上清進行免疫沉淀、抑菌、吞噬殺菌實驗。十二烷基磺酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳SDSPAGE分析血淋巴細胞蛋白組份相對分子質(zhì)量MR。凝膠層析純化分離釘螺血淋巴細胞蛋白。RMBI1640培養(yǎng)基培養(yǎng)釘螺血淋巴細胞。將秋水仙素作用后的釘螺血淋巴細胞進行低滲、固定、氣干法制片和染色，顯微鏡下閱片，進行染色體核型分析。結(jié)果1釘螺血淋巴細胞分為圓形有絲狀偽足、嗜酸性圓形無絲狀偽足、嗜堿性圓形無絲狀偽足和梭形細胞4種形態(tài)，平均直徑依次約為1093、613、608及1106ΜM，分別約占細胞總數(shù)的50％、30％、5％及15％。每只釘螺懸浮法、傳統(tǒng)壓片法及針刺法獲取的血淋巴細胞均數(shù)分別為150、066及00310ML。2懸浮法與傳統(tǒng)壓片法、針刺法總體均數(shù)差異有統(tǒng)計學(xué)意義F28147，P1567，T2450，兩組P001。3凍融的血淋巴細胞上清，與日本血吸蟲蟲卵可溶性抗原SEA反應(yīng)出現(xiàn)絮狀沉淀。4抑菌試驗血淋巴細胞上清對金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌出現(xiàn)明顯的抑菌圈。5血淋巴細胞對白色念珠菌的吞噬率和殺菌率分別為86％、46％。6血淋巴細胞蛋白組份相對分子質(zhì)量約為MR112300、107100、97200、73500、60000及12000。7凝膠層析分離純化釘螺血淋巴細胞蛋白得到兩個主峰。8PDDBI1640培養(yǎng)釘螺血淋巴細胞因取材污染未能培養(yǎng)成功。9湖北釘螺的染色體數(shù)2N34，核型公式為14M8SM8ST2T性染色體。結(jié)論懸浮法可獲得大量釘螺血淋巴細胞，其具有沉淀SEA、抑制金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌生長及吞噬殺滅白色念珠菌等免疫功能。SDSPAGE顯示釘螺血淋巴細胞蛋白MR約為112300，107100，97200，73500，60000，12000。凝膠層析發(fā)現(xiàn)釘螺血淋巴細胞蛋白有兩個主峰。用釘螺血淋巴細胞氣干法制備染色體標本，方法簡便，增加有絲分裂中期核型，圖像清晰，染色體伸展，形態(tài)良好，著絲粒位置明顯，可讀性好，便于進行核型分析。對釘螺血淋巴細胞的研究，將為研究釘螺與日本血吸蟲之間的共同抗原、相容性及其抗性機制、篩選抗性株釘螺、釘螺對滅螺藥物的敏感性及耐藥性機制等提供參考資料。

簡介：該文在分析了傳統(tǒng)遺傳算法的缺陷機理和揚棄了已有免疫理論的基礎(chǔ)上提出了一種新型有效的優(yōu)化算法免疫遺傳算法IMMUNEGEICALGITHMIGA旨在通過對生物體實際免疫行為的模擬使設(shè)計的優(yōu)化算法能夠有效解決全局搜索能力和局部搜索能力的矛盾、維持演化過程中種群的多樣性從而彌補傳統(tǒng)遺傳算法的缺陷為了從數(shù)學(xué)角度更加深入地分析IGA的優(yōu)化能力及相關(guān)性能利用隨機過程理論對IGA進行分析并證明了IGA的全局收斂性及其他相關(guān)性質(zhì)還對IGA的收斂效果以及對早熟的防治機理進行了研究從而在理論上證明了該文算法的有效性和優(yōu)越性文中又通過對幾類標準測試函數(shù)的優(yōu)化實驗和同其他優(yōu)化方法的尋優(yōu)效果對比從另一方面證明了該文IGA的有效性和優(yōu)越性在實際工程應(yīng)用中針對冗余機械手軌跡規(guī)劃主要研究如何唯一確定運動學(xué)逆解以及如何建立和簡化IGA的優(yōu)化模型針對CSTR系統(tǒng)主要研究跟蹤控制中利用IGA實時優(yōu)化控制參量的問題兩個工程實例的仿真實驗表明了IGA的實際應(yīng)用效果令人滿意

簡介：華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文一先天性白內(nèi)障家系的分子遺傳學(xué)分析姓名黃二文申請學(xué)位級別碩士專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師王擎袁明雄20090520華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文ABSTRACTCONGENITALCATARACTISONEOFTHEMAINCAUSESOFCHILDBLINDNESSCONGENITALCATARACTCANBECAUSEDBYVARIETYOFFACTORS,WHICHRESULTINOPACITYOFLENSANDAFFECTIT’STRANSPARENCEGENETICFACTORSPLAYANIMPORTANTROLEINDEVELOPMENTOFCONGENITALCATARACTTHECOMMONINHERITANCEPATTERNOFCONGENITALCATARACTISAUTOSOMALDOMINANT,BUTAUTOSOMALRECESSIVEANDXLINKEDPATTERNSHAVEBEENALSOREPORTEDINHERITEDCONGENITALCATARACTSHOWSBOTHGENETICANDCLINICALHETEROGENEITYTHESAMEPHENOTYPEOFCATARACTINDIFFERENTPATIENTSCANBECAUSEDBYMUTATIONSINDIFFERENTGENESORBYDIFFERENTMUTATIONSINTHESAMEGENEONTHEOTHERHAND,THEPHENOTYPESVARYDRAMATICALLYINDIFFERENTINDIVIDUALSWITHTHESAMEMUTATIONTODATE,ABOUT40GENETICLOCIHAVEBEENIDENTIFIEDTOBELINKEDWITHCATARACT,AND19DISEASECAUSINGGENESHAVEBEENIDENTIFIEDHOWEVER,MANYFAMILIESARENOTLINKEDTOTHEKNOWNCATARACTLOCI,INDICATINGTHATMORECATARACTGENESREMAINTOBEIDENTIFIEDWECHARACTERIZEDALARGECHINESEHANFAMILYWITHAUTOSOMALDOMINANTCONGENITALCATARACTLINKAGEANALYSISWITHMARKERSINKNOWNCATARACTGENESEXCLUDEDALLOFTHEM,INDICATINGTHATTHECHINESEFAMILYISASSOCIATEDWITHANEWCATARACTGENEAGENOMEWIDELINKAGESCANWASTHENUSEDTOMAPTHECHROMOSOMALLOCATIONOFTHENEWCATARACTGENEINTHECHINESEFAMILYTHEGENEWASFOUNDTOBEONCHROMOSOME1ANDFLANKEDBYTWOMARKERSD1S489ANDD1S3669FURTHERGENOTYPINGOFTWOSINGLENUCLEOTIDEPOLYMORPHISMS（SNPS）INTHEREGIONBYDIRECTDNASEQUENCEANALYSISDEFINEDTHELINKAGEREGIONTOIIP45HSPB7FURTHERFINELINKAGEMAPPINGANALYSISWASCARRIEDOUTUSINGMANYSNPSINTHEREGION,WHICHNARROWEDTHELINKAGEREGIONBETWEENRS677769ANDHSPB7THEINTERVALISABOUT18MBINLENGTHWITHIN1P36211P3613,WHICHISSMALLENOUGHTOBEAPPROPRIATEFORFOLLOWUPMUTATIONALANALYSISTOIDENTIFYTHEDISEASECAUSINGGENEDIRECTDNASEQUENCEANALYSISOF20KNOWNGENESWITHINTHESHORTESTLINKAGEINTERVALDIDNOTREVEALANYDISEASECAUSINGMUTATIONTHESERESULTSSUGGESTTHATTHENEWCATARACTGENEISANUNKNOWNORPUTATIVEGENEWITHIN1P36211P3613,ANDMUTATIONALANALYSISINTHESEUNKNOWNORPUTATIVEGENESISEXPECTEDTORESULTINTHEIDENTIFICATIONOFANOVELGENEFORCATARACTTHESERESULTSPROVIDEAFOUNDATIONFORFINDINGANEWGENEFORCATARACTIDENTIFICATIONII

簡介：南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文染色體異常者的胚胎植入前遺傳學(xué)診斷研究姓名吳畏申請學(xué)位級別碩士專業(yè)婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師劉嘉茵20050418南京醫(yī)科大學(xué)碗士學(xué)位論文位中最常見的染色體結(jié)構(gòu)異常，在新生兒中的發(fā)生率為02％，在不孕夫婦或有自然流產(chǎn)史的夫婦中，這一比率更高。染色體結(jié)構(gòu)異常但表型正常的個體稱為攜帶者CARRIERO在生殖細胞減數(shù)分裂，并與配偶的配子染色體配對時產(chǎn)生多種不平衡的核型，導(dǎo)致反復(fù)自然流產(chǎn)、死胎、死產(chǎn)、新生兒死亡、畸形或智力低下的后代，甚至有的核型引起分娩畸形兒和智力低T／的可能性高達LOO％。部分男性攜帶者還可能因染色體斷裂區(qū)域涉及精子發(fā)生相關(guān)基因或調(diào)控基因而伴有生精障礙導(dǎo)致不育。以往這類患者即使僥幸懷孕也只能通過絨毛活檢、羊水細胞檢查、胎兒臍帶穿刺采血，B超形態(tài)學(xué)診斷等傳統(tǒng)的產(chǎn)前診斷方，；L進_4T遺傳學(xué)診斷分析，除了漫長而焦急的等待時間外，還要面對選擇性流產(chǎn)的可能。PGD作為能早期同時解決生育及遺傳診斷這兩大難題的理想技術(shù)越來越被推崇。染色體結(jié)構(gòu)異常者的PGD較數(shù)目異常者PGD復(fù)雜得多，難度也大得多。全世界已進行的6000多個PGD周期中，非整倍體篩查PREIMPLANTATIONGENETICDIAGNOSISFORANEUPLOIDYSCREENING，PGDAS占3／4左右，染色體結(jié)構(gòu)異常的PGD不到1000個周期，國內(nèi)PGD技術(shù)發(fā)展緩慢，染色體結(jié)構(gòu)異常的PGD僅有屈指可數(shù)的凡例報道，大部分為羅氏易位。結(jié)構(gòu)異常中較常見的羅氏易位攜帶者可生成6種配子類型，平衡易位攜帶者可生成18種配子核型，其中各包含了1種正常，1種平衡易位。針對染色體結(jié)構(gòu)異常主要采用熒光原位雜交技術(shù)FISH對胚胎或極體進行遺傳組成的診斷，F(xiàn)ISH是細胞遺傳學(xué)和分子生物學(xué)相結(jié)合的染色體分析方法，通過檢測雜交位點的熒光信號來判斷染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目的變化。用FISH進行PGD，合適的探針選擇是關(guān)鍵，也是限制PGD技術(shù)普及的主要因素之一。

簡介：前言法布里病FABRYDISEASEFDOMIM301500是一種X連鎖遺傳疾病因X染色體上編碼Α半乳糖苷酶AΑGALACTOSIDASEΑGALA基因GLAOMIM300644突變?nèi)苊阁w內(nèi)缺乏ΑGALA活性導(dǎo)致神經(jīng)酞胺三聚己糖苷GLOBOTRIAOSLYCERAEOB3為主的大量代謝物無法分解堆積于細胞內(nèi)造成多器官系統(tǒng)損害的綜合征。臨床表現(xiàn)分為典型FD及非典型FD二類典型FD以彌漫性角化性血管瘤、少汗陣發(fā)性外周神經(jīng)痛等癥狀為主常在幼年發(fā)病非典型FD則分為心臟、腎臟和神經(jīng)三個變異型常在中年后才發(fā)病其中FD心臟變異型FABRYDISEASEATYPICALCARDIACVARIANT臨床表現(xiàn)為肥厚性心肌病尤其是左心室肥厚多數(shù)患者攜帶IVS4919G＞A基因突變FD心臟變異型基因突變。本研究通過測定新生兒干燥血點DRIEDBLOODSPOTDBSΑGALA酶活性值結(jié)合后續(xù)GLA基因測序確定方法來進行新生兒FD及可疑FD家族成員篩檢工作。此外我們還對原診斷為特發(fā)性肥厚型心肌病IDIOPATHICHYPERTROPHICCARDIOMYOPANLYIHCM的患者進行了WS4919G＞A基因突變檢測。由于女性雜合子或WS4919G＞A基因突變攜帶者的ΑGALA酶活性減低不明顯臨床癥狀輕微因此采用測定ΑGALA酶值方法往往不足以篩查此類人群。由此本研究首次采用了高分辨熔解曲線分析技術(shù)HIGHRESOLUTIONMELTINGANALYSISFIRM取代傳統(tǒng)ΑGALA酶值測定方法篩查女性雜合子或IVS4919G＞A基因突變攜帶者以探索其在篩查此類人群中的應(yīng)用價值。對于FD基因突變攜帶者是否該啟動早期治療目前尚有爭議。以往認為GB3與疾病進展和病情嚴重程度相關(guān)但后來研究發(fā)現(xiàn)FD患者FD半合子或雜合子臨床癥狀和血漿或尿液中GB3含量無絕對平行關(guān)系而與血漿或尿液中鞘氨醇三聚己糖苷GLOBOTRIAOSYLSPHINGOSINELYSOGB3含量呈正相關(guān)。由此本論文通過檢測FD典型及心臟病變異型患者病情進展中及治療前后血漿LYSOGB3和GB3水平發(fā)現(xiàn)LYSOGB3比GB3更有臨床相關(guān)性提示血漿LYSOGB3水平可用于指導(dǎo)酶補充療法ENZYMEREPLACEMENTTHERAPYERT的啟動時機。研究對象和方法一、研究對象一新生兒篩查、FD新生兒家族成員及門診MCM病患檢查1、臺灣自2008年1月至2011年6月出生的352581名新生兒男184045名女168536名。2、FD新生兒家族中家庭成員經(jīng)篩查后具任一種基因突變攜帶者或FD患者共253位男54位女199位。3、心臟內(nèi)科門診288位診斷為IHCM患者男198位女90位。二高分辨熔解曲線分析技術(shù)HRM進行GLA基因突變檢測由上述一研究篩選出的140位確診為FD新生兒男121位女19位進行HRM分析。13位正常人作為對照。三血漿LYSOGB3和GB3檢測153位成年FD突變基因攜帶者包括IVS4919G＞A突變攜帶者92人包括典型臨床癥狀男性18位前期臨床癥狀男性27位臨床癥狀女性16位和前期臨床癥狀女性31位20位典型FD基因突變攜帶者男性8位女性12位和41位新型基因突變攜帶者男性19位女性22位。33位正常人作為對照。二、研究方法一新生兒篩查、FD新生兒家族成員及門診MCM病患檢查1、新生兒篩查下列1～4共4項檢查2、FD確診新生兒的家族成員檢查下列2～8共7項檢查。3、門診中IHCM病人檢查下列2～8共7項檢查。1DBS雙步驟檢測。2ΑGALA酶測定。3IVS4919G＞A突變基因檢查。4GL4基因測序。5心臟科超聲心電圖檢查。6腎臟科尿蛋白及肌酸酐檢查。7眼科檢查。8皮膚科檢查。二HRM進行GLA異?；驒z測1、自DBS中提取DNA。2、使用ROCHELIGHTCYCLER480SYSTEMROCHEYSA分出1ST外顯子～7TH外顯子及IVS4的異常曲線。三血漿LYSOGB3和GB3檢測1、以高效液相色譜法串聯(lián)質(zhì)譜儀測量LYSOGB3和GB3。2、統(tǒng)計方法兩組間差異使用學(xué)生T檢驗進行評估。相關(guān)關(guān)系則以斯皮爾曼等級相關(guān)系數(shù)測試。當(dāng)P值＜005時認為有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果一、新生兒篩查結(jié)果1、經(jīng)DBS雙陽性及GLA突變基因檢測共140位新生兒確診為FD新生兒占12518。其中男121人占11521女19人占18870。2、確診FD新生兒中帶IVS4919G＞A突變基因共113人813140帶典型突變基因共6種計6人43帶非典型突變基因共3種計4人2906帶新型突變基因共9種計17人121。二、FD新生兒陽性家族成員檢查共253位家族成員確診為FD患者或帶任一種突變基因之?dāng)y帶者其中帶IVS4919G＞A突變基因者共209人82帶典型突變基因共6種計12人47帶非典型突變基因共3種計8入31帶新型突變基因共9種計24人95。三、心臟科門診中IHCM結(jié)果1、288位IHCM患者其中55位經(jīng)確診為FD患者。其中帶IVS4919G＞A突變基因者計32人58帶典型突變基因共4種計19人346帶非典型突變基因1種計4人73。2、病理學(xué)上變化心肌細胞排列紊亂細胞肥大核內(nèi)有大空泡間質(zhì)纖維化等。四、HRM進行GLA突變基因檢測1、引物設(shè)計包括外顯子71、72及IVS41分別涵蓋舊的外顯子7及IVS4919G＞A該方案可將雜合子及半合子FD病人在HRM上清楚地分開。2、自DBS中抽出的DNA濃度均在6NGΜL左右滿足HRM分析所需。故如應(yīng)用HRM篩查即可免除傳統(tǒng)PCR前須定量DNA的耗時問題相對可快速大量篩查檢體。五、血漿LYSOGB3和GB3檢測1、男、女IVS4919G＞A組與對照組相較LYSOGB3較高兩者有明顯差異。2、男、女IVS4919G＞A組與典型突變組相較LYSOGB3較低兩者有明顯差異。3、男、女性典型突變組相較LYSOGB3較高兩者有明顯差異。4、男性典型突變組和對照組間相較LYSOGB3較高兩者有明顯差異。5、男、女IVS4919G＞A組和男、女對照組相較GB3濃度無顯著差異。6、當(dāng)男性或女性FD患者年齡逐漸增加時LYSOGB3亦逐步升高。7、心臟變異型FD患者LYSOGB3值在臨床癥狀出現(xiàn)前即已升高。8、心臟變異型FD男、女患者的左心室質(zhì)量指數(shù)與LYSOGB3濃度有線性關(guān)連。當(dāng)男、女患者LYSOGB3分別大于80NM與30NM時都早已有肥厚型心肌病變。9、15位接受ERT患者治療后的LYSOGB3均較治療前有明顯下降趨勢。10、6種新突變基因R356QG360CK391TG104VA108T1232T的患者及基因突變攜帶者LYSOGB3都明顯升高＞08NM。結(jié)論1、本論文共收集353581名新生兒涵蓋全臺灣55的新生兒。2、確診為FD男性新生兒比例高達11520。3、所有FD新生兒帶IVS4919G＞A比例高達8L從而遲發(fā)性心臟變異型FD男性新生兒高達118801152081。4、HRM是一項可快速篩選FD隱性女性基因突變攜帶者的靈敏方法。5、使用HRM無須于PCR前先定量DNA濃度可縮短檢測時間大量篩查。6、LYSOGB3是比GB3為更靈敏的追蹤FD心臟病變嚴重度的指標。7、LYSOGB3在FD患者心肌纖維化前早已升高。故當(dāng)發(fā)現(xiàn)LYSOGB3濃度急遽上升時必須及早啟動ERT以免心臟組織發(fā)生不可逆變化

簡介：研究目的先天性心臟病CONGENITALHEARTDISEASECHD是新生兒先天缺陷中最為常見的疾病之一。近年來隨著遺傳學(xué)、胚胎學(xué)、生物化學(xué)和分子生物學(xué)的研究不斷取得新的進展對先天性心臟病的病因有了更深入的認識。本研究第一部分主要從基因組學(xué)方面對CHD的病因和發(fā)病機制進行研究。生殖過程是一個細微而復(fù)雜的過程至今人們對此過程尚未十分了解。男性不育的遺傳學(xué)病因有染色體畸變、Y染色體微缺失和基因突變等。囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)因子CYSTICFIBROSISTRANSMEMBRANECONDUCTANCEREGULATCFTR是一種與表現(xiàn)為先天性雙側(cè)輸雙側(cè)精管缺如特征的男性不育相關(guān)的基因本論文第二部分通過分子生物學(xué)技術(shù)對該類型男性不育患者進行基因突變方面的遺傳學(xué)研究。研究方法選擇同心臟細胞發(fā)育相關(guān)的基因CX43CITED2和SMAD7以及和男性不育相關(guān)的囊性纖維化跨膜介導(dǎo)的調(diào)節(jié)子CFTR基因在先天性心臟病患者和男性不育患者群體中進行測序研究確定突變位點使用BIOEDITEXPASYCLCDNAWKBENCH50等蛋白質(zhì)預(yù)測軟件對突變型蛋白進行預(yù)測。結(jié)果與結(jié)論在三個不同的患者的樣本中分別檢測到CX43基因的突變位點R153Q、G261W、A323V首次在四個不同的患者樣本中分別檢測到CITED2基因的一個突變P140S、S183L、S192G、S196G。疏水性和疏水力矩預(yù)測發(fā)現(xiàn)這七個突變型蛋白對比野生型均有不同程度的改變。從而證實了CX43和CITED2均可能是先天性心臟病的致病的易感基因為闡述先心病的病理機制提供了有價值的遺傳學(xué)研究結(jié)果。在先天性輸精管缺如病人實驗中我們檢測出18個新的突變以及多個已報道的突變很多病人為突變復(fù)合雜合子。說明在漢族人群眾囊性纖維化跨膜介導(dǎo)調(diào)節(jié)子可能是先天性輸精管缺如的潛在致病基因我們計劃擴大研究人群以及選取新的基因進行繼續(xù)研究。

簡介：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文線粒體遺傳病致病突變研究濕性耵聹伴腋臭家系遺傳學(xué)研究姓名尚丹丹申請學(xué)位級別博士專業(yè)臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師魏珉20090601第二部分濕性耵聹伴腋臭家系遺傳學(xué)研究耵聹的干性與濕性是由ABCCLL基因中RSL7822931等位基因型決定的孟德爾遺傳性狀，其中濕性為顯性，與GA／GG等位基因型對應(yīng)。腋臭與濕性耵聹常同時出現(xiàn)，且同樣具有常染色體顯性遺傳的特點，但腋臭的遺傳基礎(chǔ)尚無報道。本文在一個中國漢族濕性耵聹伴腋臭家系中通過聚合酶鏈式反應(yīng)進行了先證者RSL7822931等位基因型檢測，發(fā)現(xiàn)患者為GA等位基因型，并通過限制性片段長度多態(tài)性方法進行了家系成員的相應(yīng)檢測，發(fā)現(xiàn)所有患者均具有GA等位基因型，而正常個體為AA等位基因型，從而首次在家系病例中證明腋臭為RSL7822931等位基因型決定的另一個孟德爾遺傳性狀，作者對濕性耵聹與腋臭的發(fā)病機制及其相關(guān)性進行了討論?！娟P(guān)鍵詞】濕性耵聹；腋臭；ABCCLLRSL7822931；2

簡介：點擊查看更多機器人逆運動學(xué)的模擬退火自適應(yīng)遺傳算法研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：人口老齡化是全球只趨面臨的挑戰(zhàn)，其中涉及到健康和疾病等問題。機體隨年齡增長常伴隨肥胖，而衰老和肥胖又能夠引發(fā)2型糖尿病TYPE2DIABETESMELLITUS，T2DM等許多代謝性疾病。隨著近幾年代謝綜合征METABOLICSYNDROME，MS研究的不斷深入，研究者發(fā)現(xiàn)MS共同的病理生理基礎(chǔ)是胰島素抵抗INSULINRESISTANCE，IR，2007年國際糖尿病聯(lián)盟DF在第二屆“糖尿病前期和代謝綜合癥”國際會議上已經(jīng)把糖尿病前期的發(fā)病機制闡述為胰島素抵抗，可見胰島素抵抗在糖尿病的發(fā)病過程中具有重要的意義。衰老年齡增長和肥胖是增加胰島素抵抗發(fā)生的兩個獨立危險因素。隨著人類壽命的延長，闡明增齡和肥胖產(chǎn)生胰島素抵抗的發(fā)生機理，對不同年齡人群，特別是老年人的健康及疾病的預(yù)防具有重要的指導(dǎo)價值。但到目前為止，胰島素抵抗的分子生物學(xué)機制還不是十分清楚，而表觀遺傳改變有助于將環(huán)境、年齡與疾病發(fā)生風(fēng)險聯(lián)系起來，目前已有證據(jù)顯示表觀遺傳在細胞和器官的衰老中扮演著重要的角色。在人類隨年齡增長逐漸衰老的過程中，表觀遺傳標記比DNA序列更易受到環(huán)境因素的影響而發(fā)生變化，它的輕微變化就可能打開或關(guān)閉基因的表達從而產(chǎn)生一系列的影響，對胰島素抵抗及糖尿病的發(fā)病可能具有重要的意義。肝臟是胰島素作用的關(guān)鍵器官，肝臟對胰島素的敏感性降低將導(dǎo)致肝臟的葡萄糖利用降低以及葡萄糖輸出增加，與糖尿病的發(fā)病密切相關(guān)。研究肝臟在胰島素抵抗以及糖尿病發(fā)病機理中的作用對于探討糖尿病的病因以及治療糖尿病具有重要意義。本課題擬從衰老和肥胖兩方面探討肝臟糖代謝相關(guān)基因的表觀遺傳學(xué)調(diào)控機制，為闡述胰島素抵抗和糖尿病的分子生物學(xué)發(fā)生機制提供依據(jù)。方法和結(jié)果一、不同鼠齡大鼠肝臟糖代謝相關(guān)基因的表觀遺傳學(xué)研究1大鼠的基本指標14周齡年輕鼠、40周齡中年鼠和80周齡老年鼠的WISTAR大鼠空腹血糖均正常，但空腹胰島素水平隨鼠齡增高而增高，表明中年及老年鼠處于胰島素抵抗階段。2肝臟糖代謝相關(guān)基因的表達水平肝臟糖代謝基因GLUT2，GCK和LPK基因的表達水平均隨大鼠的鼠齡增加而降低，肝臟的糖原水平也隨鼠齡的增加而逐漸降低。3不同鼠齡大鼠肝臟糖代謝相關(guān)基因的表觀遺傳學(xué)研究1建立了一種定量DNA甲基化的簡單可行的方法，即DNA經(jīng)亞硫酸氫鹽處理后PCR擴增并直接測序，根據(jù)測序峰值圖中“T”和“G”堿基的峰高計算CPG位點的甲基化程度。2利用該甲基化定量的方法，檢測了GLUT2、GCK和LPK基因啟動子的DNA甲基化程度，發(fā)現(xiàn)GLUT2基因的啟動子區(qū)甲基化程度在不同鼠齡大鼠肝臟中不存在差異，而GCK和LPK基因啟動子的DNA甲基化程度隨大鼠鼠齡增加而逐漸增高，呈現(xiàn)明顯的年齡依賴性特點，提示肝臟GCK和LPK基因啟動子區(qū)的甲基化程度與其基因的轉(zhuǎn)錄水平可能存在負相關(guān)關(guān)系。二、肥胖大鼠肝臟糖代謝相關(guān)基因與表觀遺傳學(xué)的研究肥胖是機體產(chǎn)生胰島素抵抗的重要因素之一，我們探討了表觀遺傳學(xué)機制在肥胖所致的胰島素抵抗中的作用1肥胖大鼠模型的建立大鼠4周齡開始給予高脂飼料喂養(yǎng)，大鼠體重隨喂養(yǎng)時間延長而顯著增加，喂養(yǎng)8周鼠齡為12周后成功地建立了肥胖合并胰島素抵抗的大鼠模型。2肥胖大鼠肝臟糖酵解的兩個關(guān)鍵基因GCK和LPK的表達水平顯著低于正常大鼠；肥胖大鼠的肝糖原顯著低于正常體重大鼠。3肥胖大鼠GCK和LPK基因啟動子的甲基化程度顯著高于正常體重大鼠，說明這兩個基因啟動子區(qū)的甲基化程度與基因的轉(zhuǎn)錄水平可能是一種負相關(guān)關(guān)系，提示肥胖可能是影響肝臟GCK和LPK啟動子甲基化程度的重要因素之一。三、游離脂肪酸誘導(dǎo)的胰島素抵抗肝細胞的表觀遺傳學(xué)研究通過建立胰島素抵抗肝細胞模型，在細胞水平上進一步研究表觀遺傳學(xué)與胰島素抵抗之間的關(guān)系1胰島素抵抗肝細胞模型的基因表達變化濃度為01MM的PA誘導(dǎo)大鼠正常肝細胞株BRL細胞24H后即成胰島素抵抗細胞模型BRLIR。該細胞的GCK基因轉(zhuǎn)錄、翻譯及酶活均顯著降低，肝糖原含量顯著降低。2胰島素抵抗肝細胞模型的GCK啟動子區(qū)甲基化程度的變化GCK啟動子區(qū)的甲基化程度幾乎在所有的CPG位點中都稍有增加，提示GCK基因表達與啟動子區(qū)的甲基化之間可能存在負相關(guān)關(guān)系；去甲基化試劑5AZACDR處理過的BRLIR細胞GCK基因表達水平顯著提高。3藥物鹽酸小檗堿BBR對BRLIR細胞的療效觀察BBR能夠顯著提高BRLIR細胞的葡萄糖消耗量及肝糖原含量；顯著增加GEK基因在轉(zhuǎn)錄及翻譯水平上的表達量以及GCK的活性；顯著降低BRLIR細胞內(nèi)聚集的TG含量。BBR處理過的BRLIR細胞GCK啟動子區(qū)的甲基化程度稍降低，提示去甲基化機制可能參與了BBR藥物對GCK基因轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控。4表達GCKSIRNA和GCK基因的腺病毒制備及對胰島素抵抗細胞作用的初步研究成功制備了表達GCKRNA干擾的腺病毒ADGCKSIRNA和表達GCK基因的腺病毒ADGCK。實驗證實ADGCKSIRNA腺病毒能夠顯著降低肝細胞的GCK基因表達量，顯著降低肝細胞的葡萄糖消耗量以及肝糖原含量；ADGCK腺病毒能夠在肝細胞內(nèi)過量表達GCK基因，顯著提高BRLIR細胞的葡萄糖消耗量以及肝糖原含量。通過在肝細胞中過量表達或抑制表達GCK基因，初步證實了GCK基因在肝細胞的胰島素抵抗狀態(tài)中具有重要的作用，為今后在動物體內(nèi)進行GCK基因的功能研究打下了基礎(chǔ)。結(jié)論胰島素抵抗是逐步發(fā)展形成的，而衰老和肥胖是產(chǎn)生胰島素抵抗的兩個重要因素，并與葡萄糖代謝密切相關(guān)。本課題即從表觀遺傳學(xué)的角度分析衰老及肥胖大鼠發(fā)生胰島素抵抗的分子生物學(xué)機制，發(fā)現(xiàn)了肝臟糖代謝關(guān)鍵基因GCK和LPK在衰老和肥胖兩種胰島素抵抗大鼠肝臟中均存在啟動子區(qū)的甲基化程度與基因表達的負相關(guān)關(guān)系，影響了肝臟的胰島素利用及葡萄糖代謝，是參與胰島素抵抗的重要機制。藥物BBR能夠上調(diào)胰島素抵抗肝細胞的GCK基因表達量，同時也能夠降低GCK基因啟動子的甲基化程度，因此我們推測BBR激活GCK基因表達的機制可能包括GCK基因啟動子的去甲基化機制。綜上所述，本課題對胰島素抵抗動物和細胞模型的甲基化機制進行了初步探索，對今后胰島素抵抗及相關(guān)的代謝性疾病的表觀遺傳學(xué)研究提供了新的思路，同時也為探討通過調(diào)控基因組DNA甲基化狀態(tài)來防治臨床的代謝性疾病提供了新的依據(jù)。

簡介：中圖分類號Q呈窆UDC570碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼墮3蘭密級公玨1770個自然流產(chǎn)家系的細胞遺傳學(xué)研究CYTOGENETICALANALYSISOF1770FAMILIESWITHSPONTANEOUSABORUONL●作者姓名胡亮學(xué)科專業(yè)遺傳學(xué)學(xué)院系、所醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)國家重點實驗室指導(dǎo)教師鄔玲仟教授副指導(dǎo)教師梁德生教授龍志高高級實驗師論文答辯日期絲宦墨蘭參答辯委員會主中南大學(xué)2013年5月碩士學(xué)位論文中文摘要1770個自然流產(chǎn)家系的細胞遺傳學(xué)研究摘要背景自然流產(chǎn)是指因自然原因非人為目的造成的孕周不足28周、胎兒體重不足L0009而妊娠終止。染色體異常等細胞遺傳學(xué)因素在自然流產(chǎn)的發(fā)生、發(fā)展、結(jié)局中起到了十分重要的作用。因此有必要對自然流產(chǎn)者進行細胞遺傳學(xué)研究，明確其遺傳學(xué)病因，為其再生育提供遺傳咨詢和產(chǎn)前診斷。目的對曾發(fā)生自然流產(chǎn)的1770對夫婦進行染色體核型分析。明確其染色體異常的發(fā)生率，并根據(jù)病史，探討自然流產(chǎn)次數(shù)、流產(chǎn)發(fā)生的時間、既往生育史與染色體核型的關(guān)系。方法對受檢者進行G顯帶染色體檢測，對G顯帶不能明確的核型，進一步進行C顯帶、N顯帶以及高分辨顯帶技術(shù)檢測。結(jié)果1770對發(fā)生過自然流產(chǎn)的夫婦中，共發(fā)現(xiàn)111例314％易位、倒位等異常核型；119例336％多態(tài)性變異核型；發(fā)生自然流產(chǎn)的夫婦中染色體異常多見于女方；染色體異常組與染色體正常及多態(tài)組在自然流產(chǎn)次數(shù)的分布上存在差異；染色體異?？蓪?dǎo)致既往異常生育史，但對自然流產(chǎn)的發(fā)生時間無明顯影響；染色體平衡易位易造成多次流產(chǎn)，倒位及多態(tài)對多次流產(chǎn)的發(fā)生影響較小。結(jié)論夫婦雙方染色體異常與自然流產(chǎn)的發(fā)生及流產(chǎn)次數(shù)、既往生育史關(guān)系密切，是自然流產(chǎn)重要的遺傳學(xué)致病因素。關(guān)鍵詞自然流產(chǎn)，細胞遺傳學(xué)，染色體、核型分析