簡(jiǎn)介：由于鈦材料具有較好的力學(xué)性能、耐蝕性能和生物相容性，因此鈦材料作為生物醫(yī)用材料已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于外科植入領(lǐng)域。然而在應(yīng)用過程中仍然存在一些問題，如表面不具有生物活性以及手術(shù)中伴隨的感染問題。而在鈦基體上能通過簡(jiǎn)單的陽(yáng)極氧化獲得垂直于基體的排列整齊有序的TIO2納米管結(jié)構(gòu)，這種結(jié)構(gòu)的物理化學(xué)性質(zhì)都比較穩(wěn)定并且為鈦合金的表面改性和功能圖層的制備提供了方便和可能。本文主要是利用TIO2納米管進(jìn)行負(fù)載改性，并研究它的釋放行為以及生物學(xué)性能方面的評(píng)價(jià)。1采用電化學(xué)陽(yáng)極氧化法在TI表面制備規(guī)則形貌的TIO2納米管，通過熱處理后獲得銳鈦礦型的TIO2納米管。然后選用簡(jiǎn)單的物理吸附和循環(huán)加載的方法向納米管中負(fù)載硫酸慶大霉素（GS）。最后用含有GS的殼聚糖有機(jī)溶液對(duì)載藥納米管進(jìn)行封裝，使在納米管表面形成一層有機(jī)薄膜。實(shí)驗(yàn)表明，這種負(fù)載方法方便且負(fù)載率較高；有機(jī)薄膜不僅起到了控制藥物釋放的作用而且賦予了材料更好的抗菌性和生物相容性，這主要是利用了GS和殼聚糖的協(xié)同抗菌效應(yīng)和殼聚糖良好的生物相容性性能。2通過多元醇化學(xué)還原法向TIO2納米管中負(fù)載納米AG顆粒，通過前期實(shí)驗(yàn)，我們選定了口徑最佳的納米管，它既能使AG均勻負(fù)載又能發(fā)揮納米管這種特殊結(jié)構(gòu)的控制釋放作用。選定納米管后，探索了不同AG含量的還原體系對(duì)負(fù)載、釋放和生物學(xué)性能的影響。通過實(shí)驗(yàn)證明在還原體系中隨AG含量的增加，納米管中AG納米顆粒的負(fù)載量逐漸增加，但是AG納米顆粒在納米管中的分布均勻程度和抗菌性能出現(xiàn)了先增后減的趨勢(shì)，這主要是因?yàn)楫?dāng)還原體系中AG含量過高時(shí)，負(fù)載的AG納米顆粒過度團(tuán)聚和在納米管口堆積，阻礙了AG的負(fù)載和釋放，同時(shí)也失去納米態(tài)顆粒的優(yōu)勢(shì)。

簡(jiǎn)介：隨著納米科技的迅速發(fā)展，多功能納米顆粒為生物成像、納米藥物載體、疾病治療等臨床醫(yī)學(xué)應(yīng)用提供了更加有效的手段。納米顆粒在細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)行為對(duì)生物安全以及高效納米藥物載體的構(gòu)建非常重要，因此研究納米顆粒穿過各種生物障礙比如細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞、細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)的機(jī)制以及納米顆粒的最終歸屬非常關(guān)鍵。但是，現(xiàn)在對(duì)納米顆粒從一種細(xì)胞器轉(zhuǎn)運(yùn)到另一種細(xì)胞器的過程了解還很欠缺，認(rèn)識(shí)納米顆粒引起的細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的變化以及納米顆粒轉(zhuǎn)運(yùn)過程中伴隨著的細(xì)胞作用機(jī)制仍然是很大的挑戰(zhàn)。我們利用信號(hào)肽修飾EUPOMSPAA納米顆粒并研究其在細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)行為，對(duì)細(xì)胞和納米顆粒之間的相互作用有了新的理解。這種納米顆粒適用于生物成像，而且在基于同步輻射的X射線高分辨成像中也有著很大的應(yīng)用潛力。通過線粒體信號(hào)肽的修飾，使納米顆粒可以輕易的穿過細(xì)胞膜，并且成功的靶向到線粒體。而經(jīng)過一段時(shí)間后該納米顆粒在溶酶體中出現(xiàn)的幾率顯著增加，因此在不同時(shí)間階段納米顆粒在細(xì)胞內(nèi)各種細(xì)胞器中的分布是動(dòng)態(tài)變化的。值得注意的是，我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，隨著納米顆粒在線粒體上的積累，會(huì)對(duì)線粒體產(chǎn)生一定程度的損傷，因此引起了線粒體自噬的發(fā)生。通過對(duì)相關(guān)蛋白進(jìn)行分析以及線粒體膜電位染色，我們得出這種現(xiàn)象是PARKIN蛋白介導(dǎo)的、由納米顆粒引起的線粒體膜電位降低導(dǎo)致的。這種納米顆粒引起的細(xì)胞自噬反應(yīng)反過來(lái)會(huì)影響納米顆粒在細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)及分布，同時(shí)為納米顆粒提供了另一種可供選擇的轉(zhuǎn)運(yùn)途徑。在我們的研究工作中發(fā)現(xiàn)的這類納米顆粒和細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器相互作用的新現(xiàn)象，包括納米材料的生物學(xué)效應(yīng)以及宿主細(xì)胞對(duì)納米材料代謝過程的影響變化，有可能為發(fā)展新型納米生物技術(shù)和納米藥物，并最終為人類健康醫(yī)療服務(wù)提供所必要的知識(shí)和手段。

簡(jiǎn)介：磷酸鈣族，尤其是羥基磷灰石CA10PO46OH2，HA，其化學(xué)組成與人骨和牙齒中的組分基本相似，具有良好的生物相容性和骨誘導(dǎo)性。自然骨中主要無(wú)機(jī)成分除HA外，還含有其他多種微量元素，如銅、錳等。因此，如何在HA人工骨材料中添加適量的微量元素以改善植入體的生物活性引起了研究者的廣泛關(guān)注。多級(jí)結(jié)構(gòu)材料是以低維度納米構(gòu)件（納米顆粒、納米管、納米片等）為構(gòu)筑單元，進(jìn)行自組裝或人為組裝而得到的具有特殊形貌和復(fù)雜結(jié)構(gòu)的一類材料。這類材料由于其奇特的分級(jí)結(jié)構(gòu)和卓越的性能使得它能潛在應(yīng)用于催化，電子，傳感，藥物輸送，廢水處理等方面。其中，具有多級(jí)結(jié)構(gòu)的微球因比表面積大、流動(dòng)性好、質(zhì)量輕、注射性能良好等優(yōu)點(diǎn)，而成為材料領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。結(jié)合以上幾者的優(yōu)勢(shì)以及在國(guó)內(nèi)外同類研究的基礎(chǔ)上，本論文利用水熱法，以植酸IP6為調(diào)控劑，分別摻入銅、錳無(wú)機(jī)元素，成功制備出了具有多級(jí)結(jié)構(gòu)的無(wú)機(jī)離子摻雜HA微球。實(shí)驗(yàn)過程中，先將一定量的硝酸鈣和硝酸銅（錳）溶于60ML去離子水中，待其溶解完全后再依次加入IP6和磷酸氫二鈉，保證CAMP167（摩爾比），MMCA5％（摩爾比），其中M代表銅或錳。用硝酸調(diào)節(jié)溶液PH2～3，再加入適量尿素，攪拌均勻后轉(zhuǎn)移至反應(yīng)釜。在150℃恒溫反應(yīng)12H，冷卻至室溫，產(chǎn)物經(jīng)水和乙醇洗滌，置于烘箱內(nèi)，60℃干燥72H，最后收集粉體并對(duì)其進(jìn)行了X射線衍射XRD、傅里葉轉(zhuǎn)換紅外光譜FTIR、透射電鏡TEM、掃描電鏡SEM、N2吸附脫附測(cè)定BET。利用體外降解實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)了HA粉體CA2、CU2離子的釋放規(guī)律，生物學(xué)性能檢測(cè)評(píng)價(jià)了不同結(jié)構(gòu)的HA微粒蛋白吸附性能及對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞粘附、增殖的影響。研究結(jié)果如下1利用水熱合成法，以植酸為調(diào)控劑，分別摻入銅、錳，合成了具有不同結(jié)構(gòu)的HA微粒，其中同時(shí)添加M和IP6時(shí)，HA球形度更完整且具有多孔分級(jí)結(jié)構(gòu)。2考察水熱反應(yīng)時(shí)間對(duì)CUHAIP6生成的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，隨著反應(yīng)時(shí)間的延長(zhǎng)，微粒從無(wú)定形態(tài)向HA結(jié)晶相轉(zhuǎn)變，并逐步形成分層結(jié)構(gòu)。IP6在這形成過程中起到誘導(dǎo)和瞬時(shí)穩(wěn)定ACP的作用，納米片的形成可能是由于IP6高度帶負(fù)電荷，容易吸附在羥基磷灰石A面（帶正電），抑制或降低A面的進(jìn)一步增長(zhǎng)。3考察幾種粉體對(duì)牛血清蛋白BSA吸附的影響，結(jié)果顯示，具有多級(jí)結(jié)構(gòu)的HA微球展現(xiàn)出更加顯著的吸附優(yōu)勢(shì)。4利用體外降解實(shí)驗(yàn)，研究了摻銅粉體在PBS和醋酸緩沖液中鈣、銅的釋放規(guī)律，結(jié)果顯示，摻銅HA粉體可能對(duì)細(xì)胞是無(wú)毒的。5材料浸提液與成骨細(xì)胞共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明，摻入銅、錳離子對(duì)成骨細(xì)胞無(wú)毒副作用摻銅HA粉體與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)表明，經(jīng)銅、IP6調(diào)控的HA更能促進(jìn)細(xì)胞的粘附以及增殖。

簡(jiǎn)介：通過在含有氟離子的電解液中對(duì)近等原子比的鎳鈦（NITI）合金進(jìn)行陽(yáng)極氧化可在其表面制備鎳鈦氧（NITIO）納米管陣列。系統(tǒng)研究了各種陽(yáng)極氧化參數(shù)對(duì)NITIO納米管陣列形成能力及其結(jié)構(gòu)的影響規(guī)律，同時(shí)也研究了不同氧化電壓制備的不同尺寸納米管結(jié)構(gòu)的腐蝕行為、NI離子析出、細(xì)胞相容性，探索了其作為無(wú)酶葡萄糖傳感器電極的可能性。結(jié)果表明，（1）在乙二醇基電解液中，納米管陣列可在較寬的氧化電壓（590V）、電解液溫度（1050℃）和電解液中NH4F含量（002508WT％）范圍內(nèi)形成，但形成納米管的電解液中水含量的范圍卻很窄（0010VOL）。通過調(diào)控這些參數(shù)，可以制備出不同直徑（1570NM）和長(zhǎng)度（451320NM）的NITIO納米管。（2）納米管的尺寸對(duì)NITI合金的腐蝕行為、NI離子釋放和細(xì)胞相容性有顯著影響。尺寸較大的納米管耐腐蝕性較差并釋放較多的NI離子，但細(xì)胞相容性有所提高。這表明雖然尺寸較大的納米管釋放的NI離子較多，但此釋放水平對(duì)細(xì)胞沒有明顯的毒性。（3）制備的NITIO納米管陣列（直徑50NM，長(zhǎng)度800NM）的電極具備良好的無(wú)酶葡萄糖傳感性能，具體表現(xiàn)為較寬的線性范圍（0002MM到02MM）、較短的響應(yīng)時(shí)間10S、較低的檢測(cè)極限（013ΜM，SN3時(shí)）、較高的靈敏度（83ΜAMM1CM2）和較好的穩(wěn)定性、重復(fù)性等優(yōu)點(diǎn)。以上研究結(jié)果表明，納米管陣列的形成雖然使NITI合金的耐腐蝕性有所降低，但能提高其生物學(xué)性能。

簡(jiǎn)介：廈門大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立完成的研究成果。本人在論文寫作中參考其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表的研究成果，均在文中以適當(dāng)方式明確標(biāo)明，并符合法律規(guī)范和廈門大學(xué)研究生學(xué)術(shù)活動(dòng)規(guī)范試行。另外，該學(xué)位論文為課題組的研究成果，獲得課題組經(jīng)費(fèi)或?qū)嶒?yàn)室的資助，在實(shí)驗(yàn)室完成。請(qǐng)?jiān)谝陨侠ㄌ?hào)內(nèi)填寫課題或課題組負(fù)責(zé)人或?qū)嶒?yàn)室名稱，未有此項(xiàng)聲明內(nèi)容的，可以不作特別聲明。聲明人C簽觸圣≥雹∽／‘誶弓月羅日L摘要摘要皮質(zhì)鑒定問題是當(dāng)前鞋服及制革質(zhì)量檢驗(yàn)行業(yè)亟待解決的技術(shù)問題。本課題采用傅里葉變換顯微紅外光譜法MICROFTIR對(duì)各類天然皮革、人造革材料進(jìn)行顯微圖像及紅外光譜分析。并在此基礎(chǔ)上使用分子生物學(xué)技術(shù)，以典型皮革材料牛、豬、山羊皮革為例，對(duì)皮革中的DNA進(jìn)行優(yōu)化提取，采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR擴(kuò)增并DNA序列測(cè)定的方法進(jìn)行鑒定。首先使用MICROFTIR對(duì)天然皮革、再生皮革和人造革等鞋服用革類材料進(jìn)行分析，考察了樣品的顯微可見圖像及各部位的紅外光譜，結(jié)果發(fā)現(xiàn)天然皮革中的全粒面頭層皮革、修飾面頭層皮革、干法移膜剖層皮革、濕法移膜剖層皮革、絨面剖層皮革，再生革和人造革中的聚氨酯合成革、聚氯乙烯人造革具有明顯差異的顯微紅外光譜特征，根據(jù)顯微紅外光譜特征譜圖可以對(duì)以上材料進(jìn)行分類鑒別，并總結(jié)出這幾類革類材料的顯微紅外光譜特征。其次利用分子生物技術(shù)，通過提取牛、豬、山羊皮革中殘留的DNA，選擇合適引物進(jìn)行PCR反應(yīng)，擴(kuò)增出線粒體CYTB基因中的目標(biāo)DNA片段，通過序列測(cè)定進(jìn)行動(dòng)物種類判斷。經(jīng)過試驗(yàn)，由于影響PCR成功擴(kuò)增的因素較多，導(dǎo)致存在較高的假陰性判斷的風(fēng)險(xiǎn)，但通過典型皮革材料PCR擴(kuò)增并測(cè)序，陽(yáng)性判斷的準(zhǔn)確率高。而且選擇合適引物，確定合適長(zhǎng)度的擴(kuò)增靶序列、純化DNA模板、NESTEDPCR技術(shù)均有利于提高PCR擴(kuò)增成功的機(jī)會(huì)。本實(shí)驗(yàn)采用巢式通用引物對(duì)，擴(kuò)增長(zhǎng)度約220BP的CYTB基因片段，通過測(cè)序比對(duì)能夠準(zhǔn)確鑒定上述幾種天然皮革材料?；谘芯拷Y(jié)果，總結(jié)了傅里葉變換顯微紅外光譜法鑒定各類皮革的方法要點(diǎn)，驗(yàn)證PCR擴(kuò)增測(cè)序鑒定動(dòng)物皮革種類的可行性，運(yùn)用巢式PCR等措施提高了擴(kuò)增成功率，并提出存在的問題和今后工作的方向，為最終解決皮質(zhì)鑒定問題打下基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞顯微紅外光譜法；PCR擴(kuò)增；皮革鑒定

簡(jiǎn)介：開發(fā)高效低毒的基因轉(zhuǎn)染載體是基因治療領(lǐng)域中的關(guān)鍵技術(shù)問題。近年來(lái)，憑借其獨(dú)特的理化性質(zhì)，功能化石墨烯在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域引起了人們的廣泛關(guān)注，顯示出良好的應(yīng)用前景。我們的前期研究發(fā)現(xiàn)，與傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)染試劑相比，聚乙二醇與聚乙烯亞胺共同修飾的氧化石墨烯NGOPEGPEI對(duì)質(zhì)粒DNA和SIRNA的轉(zhuǎn)染效率更加理想，然而在高濃度下仍表現(xiàn)出一定的細(xì)胞毒性。因此，本課題將系統(tǒng)研究并揭示其細(xì)胞毒性機(jī)理，以便將其進(jìn)一步優(yōu)化，并為開發(fā)出理想的基因轉(zhuǎn)染載體提供重要的理論依據(jù)。本研究主要內(nèi)容包括⑴對(duì)NGOPEGPEI的細(xì)胞毒性進(jìn)行了研究。MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，10ΜGML左右的NGOPEGPEI處理可造成多種細(xì)胞活性降低。ANNEXINⅤFITCPI雙染實(shí)驗(yàn)表明該材料的細(xì)胞毒性是通過細(xì)胞壞死途徑產(chǎn)生，而非細(xì)胞凋亡途徑。通過比較MTT實(shí)驗(yàn)與ANNEXINⅤFITCPI雙染實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)兩種實(shí)驗(yàn)方法的結(jié)果存在一定差異，結(jié)合其實(shí)驗(yàn)原理，分析得出NGOPEGPEI可能影響了細(xì)胞周期。后續(xù)一系列研究表明，NGOPEGPEI引起HELA細(xì)胞的S期細(xì)胞阻滯現(xiàn)象，且絕大部分死亡細(xì)胞處于S期這些細(xì)胞因?yàn)椴荒茼樌瓿捎蒘期向G2期的轉(zhuǎn)變，導(dǎo)致細(xì)胞壞死。將細(xì)胞同步化在G1期后再經(jīng)NGOPEGPEI處理，發(fā)現(xiàn)，NGOPEGPEI處理組的細(xì)胞整個(gè)細(xì)胞周期變長(zhǎng)，且進(jìn)入S期時(shí)有顯著的延遲。⑵對(duì)NGOPEGPEI引發(fā)S期細(xì)胞阻滯的分子機(jī)理進(jìn)行了深入研究。實(shí)驗(yàn)表明，NGOPEGPEI引起了嚴(yán)重的DNA損傷，而且引發(fā)S期檢驗(yàn)點(diǎn)活化所必需的CDC25A高度磷酸化。免疫印跡的結(jié)果表明，NGOPEGPEI處理后的細(xì)胞中，CDC25A活化通路中的相關(guān)蛋白質(zhì)，包括ATMATR及其它們對(duì)應(yīng)的底物CHK2和CHK1，其磷酸化水平均顯著提高。此外，NGOPEGPEI引發(fā)的S期細(xì)胞阻滯及細(xì)胞形態(tài)的改變可被CDC25A磷酸化抑制劑AZD7762所抑制。由以上結(jié)果分析可知，NGOPEGPEI進(jìn)入細(xì)胞后，通過某種未知途徑引起DNA損傷，而DNA損傷通過ATMCHK2及ATRCHK1兩條信號(hào)通路激活CDC25A，從而激活S期檢驗(yàn)點(diǎn)，最終引起S期細(xì)胞阻滯和細(xì)胞周期的延長(zhǎng)，嚴(yán)重時(shí)，造成細(xì)胞壞死。⑶揭示了NGOPEGPEI介導(dǎo)的真核細(xì)胞壞死的分子機(jī)制，為深入探索GO及其衍生物的細(xì)胞學(xué)效應(yīng)，尤其是其對(duì)真核細(xì)胞的細(xì)胞周期的影響方面，提供了重要的理論依據(jù)，同時(shí)也為GO及其衍生物的改性以成為高效無(wú)毒的基因轉(zhuǎn)染載體提供了重要信息，在納米材料的生物學(xué)效應(yīng)及生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用研究等方面有重大理論與實(shí)踐意義。

簡(jiǎn)介：農(nóng)作物秸稈作為第二代生物質(zhì)燃料乙醇的原料，纖維素酶解率低一直是制約其商業(yè)運(yùn)營(yíng)的關(guān)鍵因素。為此本課題依照工業(yè)生產(chǎn)實(shí)際情況，對(duì)長(zhǎng)期自然條件下儲(chǔ)存的小麥秸稈蛋白進(jìn)行研究，探討蛋白對(duì)纖維素酶活力的影響，得出如下結(jié)果1經(jīng)過長(zhǎng)期在室溫條件下的儲(chǔ)存，小麥秸稈中蛋白含量?jī)H剩約324％，很大一部分在儲(chǔ)存過程中發(fā)生降解。分別采用SDS浸提緩沖液、NAOH浸提緩沖液、NACL浸提緩沖液對(duì)這些蛋白進(jìn)行了浸提，從提取率來(lái)看SDS浸提緩沖液能得到最大蛋白提取率。2對(duì)SDS蛋白浸提液提取小麥秸稈的條件進(jìn)行優(yōu)化，通過單因素和正交試驗(yàn)研究，結(jié)果表明最佳提取條件為浸提時(shí)間12H，浸提溫度50℃，固液比1∶20，最大浸提率為2176±001％，通過對(duì)浸提蛋白分子量的測(cè)定發(fā)現(xiàn)，浸提蛋白分子量分別約為18KD，22KD，32KD和40KD。3研究去除蛋白后小麥秸稈纖維素酶水解的效果，蛋白去除方式為A蛋白浸提B蛋白水解C未處理。對(duì)蛋白酶水解秸稈蛋白條件進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，最佳條件為蛋白酶用量100MG，固液比1∶20，水解溫度45℃，水解PH30，水解時(shí)間12H。對(duì)比三種方式處理后蛋白殘余量，蛋白去除效果為蛋白水解＞蛋白浸提＞未處理對(duì)三種方式處理過的小麥秸稈粉末進(jìn)行纖維素酶解條件優(yōu)化，通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)得到各自最大纖維素酶解率為蛋白水解樣品酶解率5623％，蛋白提取樣品酶解率4917％，未處理樣品酶解率3501％，說(shuō)明蛋白去除效果與纖維素酶解率正相關(guān)，該蛋白質(zhì)對(duì)纖維素酶解過程存在抑制作用。4提取出的蛋白自身不具備內(nèi)源性纖維素酶活力，但是當(dāng)它與纖維素酶共同作用時(shí)對(duì)纖維素酶存在一定抑制作用，當(dāng)反應(yīng)體系中蛋白濃度為12MGML時(shí)，總酶活和內(nèi)切葡聚糖酶活最大抑制率分別可達(dá)978％和5242％，而對(duì)Β葡萄糖苷酶具有促進(jìn)作用，當(dāng)溶液體系中蛋白濃度為12MGML時(shí)，Β葡萄糖苷酶活力達(dá)到最大增幅7144％。5考察蛋白添加順序?qū)w維素酶解的影響，可以明確知道何種成分和纖維素結(jié)合而影響了纖維素酶作用，結(jié)果為當(dāng)?shù)鞍紫扰c纖維素酶充分結(jié)合對(duì)酶解的抑制作用更為明顯，說(shuō)明該蛋白可能占有了纖維素酶的活性中心位點(diǎn)，從而降低了纖維素酶活力。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多鈦表面 PDA-PEG-PLGA-INH 抗結(jié)核控釋涂層的構(gòu)建及生物學(xué)性能研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：阿姑二褒太學(xué)碩士學(xué)位論文題目歐李生物學(xué)特性和性狀相關(guān)性的研究作者姓名錢越指導(dǎo)教師程擅崖熬攮學(xué)科專業(yè)國(guó)莖所在學(xué)院壅堂瞳廣■匝堅(jiān)提交論文ET期至Q13年絲月分類號(hào)661UDC密級(jí)公玨單位代碼10076農(nóng)業(yè)推廣碩士專業(yè)學(xué)位論文歐李生物學(xué)特性和性狀相關(guān)性的研究作者姓名指導(dǎo)教師企業(yè)導(dǎo)師申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別學(xué)科領(lǐng)域所在單位授予學(xué)位單位錢誠(chéng)程福厚王迎濤農(nóng)業(yè)推廣碩士園藝農(nóng)學(xué)院河北工程大學(xué)

簡(jiǎn)介：植物在生長(zhǎng)發(fā)育過程中很容易受到周圍環(huán)境的影響，由病原體灰霉菌BOTRYTISCINEREA引起的番茄灰霉病是危害番茄生產(chǎn)的主要因素之一。根據(jù)課題組前期的研究結(jié)果顯示，MIR394響應(yīng)灰霉菌的感染。本研究利用過表達(dá)MIR394的轉(zhuǎn)基因擬南芥和LCR突變株擬南芥，進(jìn)一步明確了MIR394在番茄防御灰霉病過程中的功能及其作用機(jī)制，主要研究結(jié)果如下1、用灰霉菌處理MICROTOM番茄，在不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行樣品采集，QRTPCR結(jié)果表明，MIR394參與植物對(duì)灰霉菌的防御。2、為了進(jìn)一步確定MIR394的功能作用，我們將過表達(dá)MIR394的轉(zhuǎn)基因及其靶基因LCR的突變株擬南芥接種灰霉菌。發(fā)現(xiàn)與野生型相比，過表達(dá)MIR394的轉(zhuǎn)基因擬南芥和LCR突變株擬南芥的葉片表面均出現(xiàn)較大的病變面積，且綜合臺(tái)盼藍(lán)染色的結(jié)果，說(shuō)明擬南芥MIR394通過直接作用于靶基因LCR作為擬南芥防御灰霉菌感染的負(fù)調(diào)節(jié)劑，使得植物對(duì)灰霉菌更加敏感。3、轉(zhuǎn)基因株系中MIR394的過表達(dá)對(duì)其它脅迫相關(guān)MIRNAS產(chǎn)生影響。利用QPCR檢測(cè)結(jié)果顯示除MIR159以外，MIR156、MIR168以及MIR172的表達(dá)水平在各個(gè)株系中均上調(diào)，表明這些MIRNAS與MIR394存在潛在聯(lián)系。4、對(duì)MIRNA合成和作用過程中的7個(gè)相關(guān)蛋白基因在轉(zhuǎn)基因株系中進(jìn)行表達(dá)檢測(cè)，其中DDL、DRB4和AGO1共3個(gè)基因的表達(dá)上調(diào)，說(shuō)明MIR394的過表達(dá)對(duì)這些基因具有正反饋?zhàn)饔谩?、植物中的兩條激素調(diào)節(jié)途徑茉莉酸及水楊酸途徑中的4個(gè)關(guān)鍵基因在過表達(dá)MIR394的轉(zhuǎn)基因植株和LCR突變株中被檢測(cè)，高水平的MIR394或低水平的LCR均導(dǎo)致PDF12PLANTDEFENSIN12和PR4PATHOGENESISRELATEDPROTEIN4表達(dá)量的增加，這可能也作為一種潛在的影響因素，使得MIR394LCR對(duì)灰霉菌感染的敏感性增強(qiáng)。6、已有相關(guān)報(bào)道揭示MIR394參與植物的非生物脅迫應(yīng)答，我們對(duì)此進(jìn)行了驗(yàn)證，并得到一致的結(jié)果，說(shuō)明MIR394的過表達(dá)使得擬南芥耐旱而不耐鹽。本研究探討了MIR394LCR在擬南芥抵抗灰霉菌中的作用，明確了MIR394LCR在應(yīng)答灰霉菌時(shí)可能協(xié)同JASA途徑的相關(guān)基因。這些研究將為進(jìn)一步明確MIR394LCR的調(diào)控機(jī)制和灰霉菌的分子防治提供技術(shù)依據(jù)。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多金黃色葡萄球菌噬菌體qdsa001的生物學(xué)特性及初步應(yīng)用.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：關(guān)于學(xué)位論文原創(chuàng)性和使用授權(quán)的聲明本人所呈交的學(xué)位論文，是在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行科學(xué)研究所取得的成果。對(duì)在論文研究期間給予指導(dǎo)、幫助和做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人或集體，均在文中明確說(shuō)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。本人完全了解山東農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留和使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留和按要求向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文紙質(zhì)本和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)山東農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文，同時(shí)授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)，并向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。論文作者簽名導(dǎo)師簽名捆墊￡必日期址多N目錄中文摘要IABSTRACTIII11雞傳染性貧血病毒CHICKENINFECTIONANAEMIAVIRUS，CAV1111CAV病原學(xué)特征2112分子生物學(xué)特征2113流行病學(xué)3114臨床癥狀與病理變化73115診斷方法4116CAV的預(yù)防和防制612豬圓壞病毒PORCINECIRCOVIRUS，PCV6121病原學(xué)特征7122PCV的分子生物學(xué)特征7123PCV的發(fā)病機(jī)制8124流行病學(xué)8125PCV診斷方法9126PCV的防制1013鸚鵡喙羽病毒病PSITTACINEBEAKANDFEATHERDISEASEVIRUSPBFDV11131病原學(xué)特征1L132分子生物學(xué)特征1L13。3PBFDV組織病理學(xué)L2134診斷與防治1214鴨圓環(huán)病毒DUCKCIRCOVIRUS，DUCV一13141鴨圓環(huán)病毒的病原學(xué)13142鴨圓環(huán)病毒的基因組13143鴨圓環(huán)病毒的流行病學(xué)15144鴨圓環(huán)病毒的診斷1515細(xì)胞凋亡的研究16151細(xì)胞凋亡特征16152細(xì)胞凋亡過程以及機(jī)制17153細(xì)胞凋亡的調(diào)節(jié)18

簡(jiǎn)介：酪氨酸酶EC114181是一種含銅的氧化還原酶，廣泛的存在于植物、動(dòng)物和微生物中，在生物體正常生命活動(dòng)中起關(guān)鍵作用。近年來(lái)，以酪氨酸酶底物結(jié)構(gòu)為母核，設(shè)計(jì)合成一系列酶抑制劑已受到越來(lái)越多實(shí)驗(yàn)室的重視。本論文根據(jù)酪氨酸酶底物結(jié)構(gòu)，從構(gòu)效關(guān)系出發(fā)，設(shè)計(jì)合成了一系列肉桂酸烷基酯，研究了其相關(guān)生物學(xué)效應(yīng)。首先我們研究了系列肉桂酸烷基酯對(duì)酪氨酸酶的抑制效應(yīng)和抑制機(jī)理。然后研究了系列肉桂酸烷基酯的抑菌殺蟲效應(yīng)。最后，利用RTPCR對(duì)小菜蛾體內(nèi)的酪氨酸酶基因表達(dá)量進(jìn)行了研究。本論文利用二氯亞砜以及DMAP、EDCHCL酯合成方法成功合成系列肉桂酸烷基酯，采用400目硅膠過柱，得到純化的目的產(chǎn)物，并且通過質(zhì)譜核磁對(duì)產(chǎn)物做了進(jìn)一步的鑒定。對(duì)于系列肉桂酸烷基酯抑制酶活性的研究發(fā)現(xiàn)，低碳酯具有較好的抑制活性，其中肉桂酸甲酯和肉桂酸乙酯的IC50分別是19MM和08MM。隨著碳鏈的增長(zhǎng)，抑制活性下降。肉桂酸庚醇到肉桂酸葵醇均不表現(xiàn)出抑制活性。由于酪氨酸酶參與眾多生命體活動(dòng)，在細(xì)菌真菌中合成黑色素保護(hù)其免受紫外線的傷害。在昆蟲中，酪氨酸酶在表皮的黑化，骨針的形成，傷口的愈合起著重要作用，本論文分別以兩種細(xì)菌和兩種真菌以及小菜蛾來(lái)研究肉桂酸烷基酯的抑菌殺蟲能力。研究發(fā)現(xiàn)，低碳肉桂酸烷基酯（肉桂酸甲酯、肉桂酸丙酯、肉桂酸丁酯和肉桂酸己酯）具有較好的抑制細(xì)菌真菌能力，其中肉桂酸丙酯對(duì)白色假絲酵母、黑曲霉、枯草芽孢桿菌、銅綠假單胞菌的MIC分別為05、075、075、1MGML。高碳肉桂酸烷基酯（肉桂酸庚酯、肉桂酸辛酯和肉桂酸壬酯）具有較強(qiáng)的殺蟲能力，其中肉桂酸甲酯和肉桂酸壬酯的半致死濃度分別165、121MGML。最后我們利用RTPCR證明隨著肉桂酸甲酯的濃度升高，小菜蛾體內(nèi)的酪氨酸酶基因表達(dá)量隨之下降。

簡(jiǎn)介：海參是我國(guó)傳統(tǒng)的海洋食物和藥物資源。近年來(lái)，隨著對(duì)海參研究的不斷深入，國(guó)內(nèi)外學(xué)者發(fā)現(xiàn)海參具有提高機(jī)體免疫力、抗腫瘤、促進(jìn)造血功能、抗凝血和降血脂等多種生理功效，海參及海參產(chǎn)品也因此得到越來(lái)越多的關(guān)注。海參膠囊、即食海參、海參口服液等產(chǎn)品的出現(xiàn)，豐富了海參產(chǎn)品的種類，進(jìn)一步提升了海參的價(jià)值。傳統(tǒng)的海參鑒定方法主要依據(jù)海參的外部形態(tài)和解剖特征，但這種方法不適用于加工后的海參的種類鑒定。因此建立快速、簡(jiǎn)便的海參種類鑒定方法，對(duì)于規(guī)范海參市場(chǎng)、保護(hù)消費(fèi)者權(quán)益至關(guān)重要，對(duì)加快海參產(chǎn)業(yè)鏈的發(fā)展具有重要的意義。隨著DNA條形碼概念的提出，基于DNA條形碼的分子生物學(xué)技術(shù)取得了快速發(fā)展，在種類鑒定領(lǐng)域發(fā)揮越來(lái)越重要的作用。本論文研究了海參線粒體細(xì)胞色素C氧化酶亞基ⅠMITOCHONDRIALCYTOCHROMECOXIDASESUBUNITⅠ，COⅠ基因作為DNA條形碼用于海參種類鑒定的可行性。利用DNASTAR61、DNAMAN60和MEGA41軟件對(duì)海參線粒體COⅠ基因序列進(jìn)行分析，計(jì)算不同海參的堿基組成，海參的種間遺傳距離和種內(nèi)遺傳距離，分別利用鄰接法和最大簡(jiǎn)約法構(gòu)建了分子系統(tǒng)樹。結(jié)果表明海參的種間遺傳距離顯著大于種內(nèi)遺傳距離，同種海參不同個(gè)體在系統(tǒng)樹中分別形成各自獨(dú)立的分支，表明以COⅠ基因作為海參DNA條形碼進(jìn)行種類鑒定具有一定的可行性。在DNA條形碼的基礎(chǔ)上，建立了斑點(diǎn)雜交方法用于四種常見經(jīng)濟(jì)海參種類的鑒定。首先利用DNASTAR61對(duì)加州擬刺參PARASTICHOPUSCALIFNICUS，北大西洋瓜參CUCUMARIAFRONDOSA，仿刺參APOSTICHOPUSJAPONICAS及梅花參THELENOTAANANAS四種海參的線粒體COⅠ基因序列進(jìn)行比對(duì)分析，然后采用PRIMERPREMIER50軟件設(shè)計(jì)四種海參的特異性探針，用于斑點(diǎn)雜交實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的四條探針具有高度的特異性，靈敏度可達(dá)100NG，能夠?qū)崿F(xiàn)四種海參的準(zhǔn)確鑒定。根據(jù)對(duì)四種海參線粒體COⅠ基因的比對(duì)結(jié)果，采用PRIMERPREMIER50設(shè)計(jì)合成了四組特異性引物，建立了多重PCR方法用于四種海參種類的鑒定。仿刺參、梅花參、加州擬刺參和北大西洋瓜參的擴(kuò)增片段長(zhǎng)度分別為212BP、301BP、261BP和358BP，能夠通過電泳得到區(qū)分。對(duì)多重PCR的特異性和靈敏度進(jìn)行研究，結(jié)果表明，四組引物具有高度的特異性，靈敏度達(dá)到NG級(jí)；對(duì)不同海參的混合樣品進(jìn)行多重PCR鑒定，結(jié)果顯示該方法能夠同時(shí)檢測(cè)混合樣品中的所有海參種類。表明多重PCR方法是一種特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好的海參種類鑒定方法。采用DNAMAN60對(duì)加州擬刺參PARASTICHOPUSCALIFNICUS，北大西洋瓜參CUCUMARIAFRONDOSA，仿刺參APOSTICHOPUSJAPONICAS，梅花參THELENOTAANANAS及輻肛參ACTINOPYGALECANA線粒體COⅠ基因進(jìn)行分析，建立酶切圖譜，選擇BAMHⅠ，KPNⅠ，PSTⅠ，XBAⅠ，ECO31Ⅰ用于五種海參的PCRRFLP的分析。采用限制性內(nèi)切酶對(duì)五種海參線粒體COⅠ基因進(jìn)行酶切，酶切結(jié)果與分析結(jié)果吻合，沒有非特異性酶切條帶的出現(xiàn)。對(duì)不同海參的混合樣品進(jìn)行了鑒定，結(jié)果表明，本研究建立的PCRRFLP方法能同時(shí)鑒定兩種海參。說(shuō)明建立的PCRRFLP是一種簡(jiǎn)單、快速、可靠的海參種類鑒定方法。分別采用斑點(diǎn)雜交、多重PCR、PCRRFLP方法對(duì)四種海參的不同加工樣品進(jìn)行鑒定，結(jié)果顯示，本論文建立的三種方法中，多重PCR鑒定的準(zhǔn)確率最高，達(dá)到了100％，PCRRFLP方法其次，為875％，斑點(diǎn)雜交方法為75％。綜上所述，本論文建立了三種分子生物學(xué)方法，可以用于海參種類的快速、準(zhǔn)確鑒定，三種方法的建立，為構(gòu)建海參鑒定體系，實(shí)現(xiàn)海參產(chǎn)品的種類鑒定，規(guī)范海參市場(chǎng)秩序，維護(hù)消費(fèi)者權(quán)益具有重要的意義。

簡(jiǎn)介：癌癥，危害人類健康的殺手之一，其發(fā)病率越來(lái)越高，嚴(yán)重威脅人類的生命。至今為止，治療癌癥的方法很多，主要有化學(xué)療法、放射療法、手術(shù)療法、光動(dòng)力療法PDT等。其中，光動(dòng)力療法由于靈敏性高等優(yōu)點(diǎn)成為癌癥治療上的最有發(fā)展?jié)摿Φ闹委煼椒ㄖ弧５?，它也存在一些缺點(diǎn)，比如在治療過程中紫外線輻射會(huì)使機(jī)體產(chǎn)生自由基損害人體正常機(jī)能。隨著納米技術(shù)的迅速發(fā)展，納米材料特有的性質(zhì)在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用已嶄露頭角，顯示了其巨大的應(yīng)用潛力。然而，許多納米材料由于其自身存在的毒性嚴(yán)重限制了其在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用。本論文的研究圍繞生物相容性良好的CEO2納米粒子。論文采用熒光倒置顯微鏡、共聚焦掃描顯微鏡、MTT34，5二甲基噻唑22，5二苯基四氮唑溴鹽法、活性氧檢測(cè)等方法，研究了CEO2納米粒子對(duì)癌細(xì)胞K562，HEPG2和正常細(xì)胞HACAT，HELF的生物作用，并將CEO2納米粒子的研究應(yīng)用擴(kuò)展至降低癌癥光療副作用和負(fù)載抗癌藥物的方向上。本論文的主要研究?jī)?nèi)容如下；1CEO2納米材料的合成我們采用一種新型簡(jiǎn)易的合成方法成功制備出了二氧化鈰納米粒子，經(jīng)X射線衍射XRD、透射電子顯微鏡TEM、高分辨透射電鏡HRTEM等方法表征，發(fā)現(xiàn)其具有顆粒狀螢石結(jié)構(gòu)，分散性良好，粒徑分布均勻，制備方法簡(jiǎn)單、廉價(jià)。2納米材料細(xì)胞毒性的考察一種納米材料能否應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)方面，其前提就是納米材料是否具有良好的生物相容性，即不會(huì)因?yàn)樽陨淼募?xì)胞毒性使機(jī)體受到傷害。基于這種考慮，我們首先考察了CEO2納米粒子的細(xì)胞毒性。研究發(fā)現(xiàn)，CEO2納米粒子具有Ⅰ級(jí)或0級(jí)安全性，沒有細(xì)胞毒性；且細(xì)胞存活率沒有因?yàn)榧?xì)胞株的不同而呈現(xiàn)顯著性差異。這些結(jié)果為CEO2納米粒子在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用提供了可能性，也為后續(xù)實(shí)驗(yàn)奠定了基礎(chǔ)。3二氧化鈰納米粒子的選擇性保護(hù)正常細(xì)胞的探索研究伴隨癌癥治療過程中產(chǎn)生的毒副作用通常會(huì)對(duì)機(jī)體內(nèi)正常細(xì)胞或組織造成嚴(yán)重的傷害。針對(duì)這一問題，我們考察了CEO2納米粒子的誘導(dǎo)保護(hù)細(xì)胞反應(yīng)及其對(duì)人體正常細(xì)胞的選擇性保護(hù)作用。結(jié)果表明，經(jīng)紫外線誘導(dǎo)照射后，CEO2納米粒子對(duì)正常細(xì)胞具有保護(hù)作用，而對(duì)癌細(xì)胞卻有較強(qiáng)的殺傷和抑制作用。也就是說(shuō)，在運(yùn)用PDT治療癌癥的過程中，CEO2納米粒子可以有效地降低副作用對(duì)人體帶來(lái)的傷害，這為CEO2納米粒子在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用提供了新的發(fā)展途徑。4CEO2納米材料作為藥物載體運(yùn)輸抗癌藥物由于抗癌藥物自身因素的限制使得其進(jìn)入癌細(xì)胞內(nèi)的有效濃度偏低，影響了癌癥治療的效果。對(duì)于這一問題，我們利用CEO2納米粒子聯(lián)合抗癌藥物柔紅霉素DNR共同作用癌細(xì)胞。結(jié)果表明，CEO2納米粒子可攜載更多柔紅霉素分子進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，使得細(xì)胞內(nèi)藥物的有效濃度明顯增高。這些研究結(jié)果表明，基于CEO2納米粒子的雙重功能即作為高效的藥物載體并保護(hù)正常細(xì)胞免受紫外線損傷為其在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用提供了新的思路。