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簡(jiǎn)介：太原理工大學(xué)碩士學(xué)位論文ITRANSLATIONREPTONEXCERPTSOFATEXTBOOKFHIGHEREDUCATIONCELLMOLECULARBIOLOGYCONCEPTSEXPERIMENTS7THEDITIONABSTRACTBOOMINGBIOLOGICALSCIENCETECHNOLOGYIN21STCENTURYBOOSTSTHEDEVELOPMENTOFFOODPRODUCTIONMEDICALCAREMANYENGINEERINGDOMAINSLEADINGTOENMOUSEFFTSINTHECULTIVATIONOFBIOLOGICALTALENTSINBOTHBASICAPPLIEDRESEARCHITHASCREATEDAGREATDEMOFTRANSLATEDBIOLOGICALTEXTBOOKSTHROUGHREADINGTRANSLATEDTEXTBOOKSSTUDENTSGAINACOMPREHENSIVEPICTUREABOUTBIOLOGYACQUIREACCURATEPROFESSIONALKNOWLEDGETHELATESTPROGRESSOFTHISDISCIPLINEAREALSOPRESENTEDINTRODUCEDINTHESETEXTBOOKSTHEREPTISBASEDONTRANSLATIONPRACTICEOFCELLMOLECULARBIOLOGYCONCEPTSEXPERIMENTS7THEDITIONBYGERALDKARPFROMTHEIGINALBOOKSEVENTEENSECTIONSOFHUMANPERSPECTIVEARECOLLECTEDTHELENGTHOFWHICHISOVER100000INTOTALFMINGACOLLECTIONCELLMOLECULARBIOLOGYUNDERHUMANPERSPECTIVEBIOLOGICALTEXTBOOKSPRESENTFEATURESOFENGLISHFSCIENCETECHNOLOGYESTCONCERNINGBIOLOGYASWELLASTHATOFTEXTBOOKACCDINGTOVERMEERTHEPURPOSEOFTRANSLATIONDETERMINESTHESTRATEGIESWHICHINTHISPROJECTMEANSTHATTRANSLATIONSHOULDFULFILLTHEGOALOFESTTEXTACCURATECONCISEDELIVERYOFKNOWLEDGETHATOFTEXTBOOKSREADABLEACCURATEINSTRUCTIONACCDINGTOAIMSOFTHESOURCETEXTTRANSLATIONSTRATEGIESHAVEBEENANALYZEDFROMTHREEDIMENSIONSTERMINOLOGYSENTENCETEXTOFFIGUREILLUSTRATIONINTHISPAPERTHEAUTHPROPOSESSOLUTIONSFFIGURINGOUTTHEPRECISEMEANINGSOFTHREETYPESOFTERMINOLOGYDIFFICULTTOTRANSLATETHEAUTHALSOOFFERSSTRATEGIESTODEALWITHDEFINITIONSENTENCESNOMINALIZEDSTRUCTURESPASSIVESENTENCESWHICHARECONDUCIVETOREPRODUCETHEUNDERLYINGLOGICOFSENTENCESPRESENTMEANINGSWITHREADERACCEPTABLEEXPRESSIONSMEANWHILEMETHODOLOGIESTOTRANSLATEDEIONPROCESSINFIGUREILLUSTRATIONAREPRESENTEDINTHEPAPERBY

簡(jiǎn)介：IIIIIIIIILUIIIIIIII』Y3393677密級(jí)論文編號(hào)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院學(xué)位論文重組狂犬病病毒的拯救及其礦化疫苗的生物學(xué)特性研究PESCUEOFRECOMBINANTVIRUSANDBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFMINERALIZEDRABIESVACCINE碩士研究生劉翠指導(dǎo)教師殷相平副研究員申請(qǐng)學(xué)位類別獸醫(yī)碩士專業(yè)領(lǐng)域名稱獸醫(yī)培養(yǎng)單位蘭州獸醫(yī)研究所研究生院20I8年5月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)幣指持下避行的研究工作及墩褥的研究成聚。盡我顳知，除了文中特剮翔以標(biāo)注鄹致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)衰或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中國(guó)農(nóng)過辯學(xué)院絨其它教育規(guī)鞫的學(xué)位蠛征捧I蜀使用過滟材料。與我一同工佟的同志對(duì)本研究所徽的侄何羹獻(xiàn)均已在論文巾作了明確的說明并裘示了謝意。研究生簽名訓(xùn)琴時(shí)潤(rùn)列島年6周鍪扣關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人寵全了解中匿農(nóng)業(yè)科學(xué)院有關(guān)繰鬻、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即中隘農(nóng)業(yè)科學(xué)院有權(quán)絳留送交論文黥復(fù)印件鄹磁盤，允許論文被查閱鞫謹(jǐn)潮，可以采用影印、緩印或掃撼等復(fù)剿手段僳存、匯綻學(xué)位論文。同意巾圍農(nóng)韭科學(xué)院可以用不同方式在不陵媒體上發(fā)裘、傳播學(xué)位論文的全部豉酃分內(nèi)容?；蔷可灻麑?dǎo)篩簽名參I群般翻時(shí)閉；叫留年5月妒G事聞必，G年J月節(jié)翻該呵

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多海棠果中酵母菌優(yōu)良株的篩選及主要生物學(xué)特性研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：生物活性玻璃BIOGLASS是目前唯一能同時(shí)和骨組織、軟組織相結(jié)合的骨修復(fù)材料，其具有很高的生物活性。碳納米纖維CARBONNANOFIBER因其優(yōu)異的機(jī)械強(qiáng)度、大的比表面積、穩(wěn)定的化學(xué)性以及易被表面官能化等性能，目前已經(jīng)成為眾多領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。基于這兩種材料的性能優(yōu)勢(shì)，本研究結(jié)合溶膠凝膠法和靜電紡絲法，再經(jīng)過水解、預(yù)氧化和高溫碳化過程，成功制備得到了具有高生物活性和優(yōu)異的機(jī)械性能的生物活性玻璃摻雜碳納米纖維BIOGLASSCNF復(fù)合納米材料，并通過改變?nèi)苣z前驅(qū)體體系的陳化時(shí)間和生物玻璃的鈣磷比，分別探究了其對(duì)BIOGLASSCNF復(fù)合材料的結(jié)構(gòu)演變及生物學(xué)性能的影響機(jī)制。本文系統(tǒng)研究了溶膠前驅(qū)體體系的陳化時(shí)間與BIOGLASSCNF復(fù)合材料的結(jié)構(gòu)演變及生物學(xué)性能的關(guān)聯(lián)性。首先采用粘度分析儀、激光粒度分析及核磁共振分析NMR對(duì)陳化不同時(shí)間的純玻璃溶膠凝膠過程體系粘度和元素結(jié)合情況進(jìn)行了分析，再結(jié)合光學(xué)顯微鏡直觀觀察了其形成過程。結(jié)果表明前驅(qū)體溶膠凝膠體系中隨著陳化時(shí)間的變化，主要發(fā)生硅氧網(wǎng)絡(luò)的縮合與團(tuán)聚，陳化時(shí)間越長(zhǎng)溶膠凝膠的網(wǎng)絡(luò)越完善，體系的粘度呈增大趨勢(shì)，而對(duì)應(yīng)的體系粒徑因網(wǎng)絡(luò)的結(jié)合而在前4天表現(xiàn)出逐漸增大的趨勢(shì)，到第四天以后，溶膠凝膠網(wǎng)絡(luò)發(fā)生團(tuán)聚，從而表現(xiàn)出粒徑逐漸減小的結(jié)果對(duì)應(yīng)的核磁分析可以看到體系的SIOSI結(jié)構(gòu)是逐漸增多的，也表明硅氧網(wǎng)絡(luò)的縮合團(tuán)聚隨著陳化時(shí)間的延長(zhǎng)逐步完善。由此，實(shí)驗(yàn)后期選取了具有代表意義的陳化1，4，7天陳化了前驅(qū)體紡絲液，經(jīng)靜電紡絲和高溫碳化后得到BIOGLASSCNF復(fù)合材料，再結(jié)合掃描SEM、透射TEM及高分辨HRTEM電鏡和傅里葉紅外光譜分析FTIR、X射線衍射儀XRD對(duì)BIOGLASSCNF形態(tài)與結(jié)構(gòu)進(jìn)行了分析表征。結(jié)果顯示，陳化時(shí)間較短時(shí)主要生成無定形的硅酸鈣，隨著陳化時(shí)間的延長(zhǎng)逐步生成結(jié)晶的硅酸鈣，但陳化時(shí)間過長(zhǎng)，雖然生成的硅酸鈣結(jié)晶越明顯，但也伴隨著結(jié)晶二氧化硅的生成。此外，礦化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，陳化時(shí)間較短時(shí)生成的大量無定形硅酸鈣的溶解速率快于結(jié)晶硅酸鈣，表現(xiàn)出最快的HCA結(jié)晶生長(zhǎng)速率，而陳化時(shí)間較長(zhǎng)時(shí)，對(duì)應(yīng)的硅酸鈣結(jié)晶越完善，越不容易發(fā)生溶解，使得其生成的HCA的速率也越慢。與此同時(shí)，陳化時(shí)間為7天時(shí)，因其BIOGLASSCNF體系中不均勻的玻璃粒子的存在，導(dǎo)致前期生成的HCA的分布也不均。本文系統(tǒng)研究了溶膠前驅(qū)體體系的鈣磷比CAP與BIOGLASSCNF復(fù)合材料的結(jié)構(gòu)演變及生物學(xué)性能的關(guān)聯(lián)性。利用SEM，TEM，XRD和FIR對(duì)其玻璃陶瓷粒子形成情況進(jìn)行了分析表征，結(jié)果表明，CAP為10時(shí)，體系中主要生成無定形的磷酸鈣和少量的結(jié)晶硅酸鈣CAP為167時(shí)，主要生成結(jié)晶的硅酸鈣而CAP為25時(shí)，生成的硅酸鈣結(jié)晶更加完善，但同時(shí)伴隨著結(jié)晶氧化鈣的出現(xiàn)。在此基礎(chǔ)上，將不同CAP的BIOGLASSCNF的材料進(jìn)行了生物體外礦化和細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)，經(jīng)SEM觀察和XRD、FTIR分析表明，鈣磷比越小材料的生物礦化和細(xì)胞相容性越好，鈣磷比越大對(duì)應(yīng)體系生成的氧化鈣具有一定的細(xì)胞毒性，不利于生物礦化和細(xì)胞的培養(yǎng)。

簡(jiǎn)介：鹽漬海帶因其加工、儲(chǔ)運(yùn)、食用方便，深受消費(fèi)者歡迎，在海藻市場(chǎng)占有較大份額，但在非冷鏈儲(chǔ)運(yùn)和銷售期間，鹽漬海帶會(huì)出現(xiàn)滲出紅色鹵水、腐敗現(xiàn)象，這勢(shì)必會(huì)影響產(chǎn)品品質(zhì)，并存在食品安全隱患。本文以基于小分子有機(jī)酸鹽的低營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)技術(shù)和宏基因組高通量測(cè)序技術(shù)為手段，揭示鹽漬海帶常溫貯藏期間微生物的種群組成與群落結(jié)構(gòu)，確定未知菌株分類學(xué)地位，并研究了部分菌株產(chǎn)胞外水解酶性質(zhì)。每2個(gè)月取常溫貯藏的成品鹽漬海帶的鹵水樣品S1～S7，采用平板分離技術(shù)分離培養(yǎng)樣品中的微生物。16SRRNA基因分析結(jié)果表明，所分離菌株均為嗜鹽古菌，從S1樣品中分離到80株菌，分屬3個(gè)屬的5個(gè)分類單元從S2樣品中分離到87株菌，分屬9個(gè)屬的12個(gè)分類單元從S3樣品中分離到76株菌，分屬13個(gè)屬的18個(gè)分類單元從S4樣品中分離到80株菌，分屬17個(gè)屬的22個(gè)分類單元從S5樣品中分離到63株菌，分屬12個(gè)屬的16個(gè)分類單元從S6樣品中分離到79株菌，分屬15個(gè)屬的23個(gè)分類單元從S7樣品中分離到86株菌，分屬16個(gè)屬的20個(gè)分類單元。S1～S6樣品的優(yōu)勢(shì)類群均為HALOBACTERIUM類群，S7樣品優(yōu)勢(shì)類群為HALOSIMPLEX類群。常溫貯藏一年的鹽漬海帶中微生物優(yōu)勢(shì)類群的優(yōu)勢(shì)度逐漸降低，但微生物的多樣性與均勻度升高。通過對(duì)鹽漬海帶鹵水S1～S7進(jìn)行ILLUMINAMISEQ測(cè)序，共獲得488294條序列，這些序列歸屬于2391個(gè)OTU，分別屬于EURYARCHAEOTA、NANOHALOARCHAEOTA、THAUMARCHAEOTA門下的HALOBACTERIA、NANOHALOARCHAEA、NITROSOSPHAERIA綱中的28個(gè)屬和一些未知類群。鹽漬海帶樣品S1～S7優(yōu)勢(shì)類群始終均為HALOBACTERIUM類群。常溫貯藏一年的鹽漬海帶中微生物群落結(jié)構(gòu)由簡(jiǎn)單到多樣，最后趨于穩(wěn)定。多相分類學(xué)研究表明，分離自鹽漬海帶的3個(gè)菌株HD845、HD851和HD883分別代表1個(gè)新屬和2個(gè)新種SALINIBACULUMLITEUMGENNOV，SPNOV、HALUSSUSLITEUSSPNOV和HALUSSUSSALINUSSPNOV。從分離菌株中，選擇21株菌株為代表進(jìn)行菌株的胞外酶分析，其中有約57％的菌株具不同程度的產(chǎn)胞外蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、褐藻膠酶活性。HALOARCHAEOBIUSIRANENSISHD1272蛋白酶活力最高，HALOARCULAARGENTINENSISHD828淀粉酶活力、脂肪酶活力均最高，HALOBACTERIUMJILANTAIENSEHD1625褐藻膠酶活力最高，這3個(gè)物種可能對(duì)鹽漬海帶的“紅腐”貢獻(xiàn)較大。

簡(jiǎn)介：烯醇化酶是一種普遍存在的細(xì)胞質(zhì)糖酵解酶，它在糖酵解過程中催化磷酸烯醇式丙酮酸PEP與2磷酸甘油酸PGA之間的轉(zhuǎn)化。最近的研究表明，烯醇化酶不僅僅只在糖酵解與糖異生過程中發(fā)揮酶的催化作用，它還是一種具有多種不同功能的蛋白質(zhì)。烯醇化酶可作為自身抗原，誘發(fā)機(jī)體免疫反應(yīng)，參與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎發(fā)病也可作為CMYC啟動(dòng)子結(jié)合蛋白負(fù)向調(diào)控CMYC表達(dá)，參與調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)、分化過程可作為纖維蛋白溶酶原受體參與纖溶過程，還可作為特異性標(biāo)志物用于肺癌的診斷等。在各種傳染病及自身免疫病中被檢測(cè)到烯醇化酶抗體，這些抗體在病理生理?xiàng)l件下可能促使了某些特定器官的微生物感染及細(xì)胞不可控的增長(zhǎng)繁殖。本文旨在研究烯醇化酶單克隆抗體對(duì)于烯醇化酶的特異性作用及其抗原表位的預(yù)測(cè)分析，從而探討烯醇化酶抗體在人體病理生理活性研究中的潛在價(jià)值。本文通過分子克隆技術(shù)構(gòu)建人Α烯醇化酶基因的重組表達(dá)載體，并將成功表達(dá)的人Α烯醇化酶純化后作為抗原免疫小鼠，用以制備烯醇化酶單克隆抗體。經(jīng)過細(xì)胞融合，有限稀釋，陽性克隆檢測(cè)以及克隆化培養(yǎng)后，成功篩選出一株單克隆抗體6B2，同時(shí)應(yīng)用免疫熒光技術(shù)和免疫組化技術(shù)對(duì)此抗體加以驗(yàn)證。噬菌體隨機(jī)十二肽展示技術(shù)篩選6B2單克隆抗體的抗原表位，并應(yīng)用ELLIPRO、PYMOL等生物學(xué)軟件分析預(yù)測(cè)其抗原表位。研究結(jié)果如下1通過PCR擴(kuò)增得到人Α烯醇化酶目的基因，構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒PET28AENO，經(jīng)過單雙酶切驗(yàn)證后，轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL21DE3中誘導(dǎo)表達(dá)。經(jīng)過SDSPAGE分析，在37℃，05MMIPTG誘導(dǎo)表達(dá)6H條件下，烯醇化酶的表達(dá)量最大。超聲破碎，所得上清及沉淀經(jīng)過SDSPAGE分析，烯醇化酶在細(xì)胞上清液中有很高的可溶性表達(dá)。2將入Α烯醇化酶與本實(shí)驗(yàn)室之前制備大腸桿菌烯醇化酶作為抗原免疫小鼠，四次免疫后血清效價(jià)稀釋一百倍時(shí)OD值達(dá)到15，可用于細(xì)胞融合。通過細(xì)胞融合成功制備一株抗入Α烯醇化酶單克隆抗體命名為6B2，生物學(xué)特性檢測(cè)顯示屬于IGG1亞型，能夠與人Α烯醇化酶和大腸桿菌烯醇化酶發(fā)生特異性反應(yīng)，與人Α烯醇化酶的特異性反應(yīng)強(qiáng)于大腸桿菌烯醇化酶。3應(yīng)用免疫熒光技術(shù)、免疫組化技術(shù)驗(yàn)證單克隆抗體6B2與組織細(xì)胞內(nèi)的Α烯醇化酶的反應(yīng)。由于烯醇化酶在進(jìn)化上高度保守，所以取小鼠腹腔巨噬細(xì)胞做細(xì)胞爬片，人Α烯醇化酶抗體6B2作為一抗，驗(yàn)證單克隆抗體與組織細(xì)胞內(nèi)的烯醇化酶的結(jié)合情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，此單抗6B2能結(jié)合巨噬細(xì)胞的烯醇化酶。4應(yīng)用噬菌體隨機(jī)十二肽展示庫篩選6B2單克隆抗體的抗原表位，經(jīng)過三輪的擴(kuò)增與淘選后，提取特異性結(jié)合的噬菌體DNA，測(cè)序分析。測(cè)序結(jié)果顯示插入的相同序列為CGCACTGCCCAGTAGACCTGAGAACTTCAGTTCCAG，相對(duì)應(yīng)的氨基酸序列DLDFKSPDDPSR，此序列與人Α烯醇化酶的259262及267269的氨基酸相同。經(jīng)過ELLIPRO、PDB等生物學(xué)軟件預(yù)測(cè)分析，發(fā)現(xiàn)所測(cè)得的氨基酸序列恰好位于烯醇化酶三維結(jié)構(gòu)中的兩個(gè)凸環(huán)上，分別為第259262氨基酸與第267269氨基酸。本研究通過雜交瘤技術(shù)以及克隆化培養(yǎng)等，成功制備一株Α烯醇化酶特異性單克隆抗體，為研究Α烯醇化酶提供了有用的工具。

簡(jiǎn)介：目的構(gòu)建融合基因蜂毒肽MELITTIN與人變構(gòu)白介素2MIL288ARG125ALA畢赤酵母分泌型表達(dá)載體PPICZΑAMIL288ARG，125ALA，轉(zhuǎn)化畢赤酵母菌GS115。篩選多拷貝陽性菌株，甲醇誘導(dǎo)多拷貝陽性菌株表達(dá)融合蛋白，分離純化該融合蛋白，并進(jìn)行抗菌及抗腫瘤生物學(xué)活性研究。方法以質(zhì)粒PET15BMIL288ARG，125ALA為模板，PCR獲得目的基因，構(gòu)建重組載體PPICZΑAMIL288ARG，125ALA通過電轉(zhuǎn)法轉(zhuǎn)化畢赤酵母GS115MMH，MDH篩選MUT表型陽性菌株GS115ZEOCINTM梯度法及熒光定量PCR法篩選多拷貝轉(zhuǎn)化酵母菌株。陽性轉(zhuǎn)化子經(jīng)甲醇持續(xù)誘導(dǎo)表達(dá)，提取上清，SDSPAGE及BCA法檢測(cè)最佳誘導(dǎo)時(shí)間，WESTERNBLOT鑒定抗原性及特異性。經(jīng)硫酸銨分級(jí)沉淀法、透析法、鎳離子親和層析純化融合蛋白液相測(cè)定法研究融合蛋白抑菌活性，CCK8法檢測(cè)該融合蛋白抗腫瘤活性。結(jié)果成功構(gòu)建畢赤酵母陽性轉(zhuǎn)化菌株GS115MIL288ARG，125ALA。經(jīng)MDH及MMH篩選出MUT型重組菌株GS115MIL288ARG，125ALA。ZEOCINTM梯度法及熒光定量PCR法成功篩選出兩株多拷貝轉(zhuǎn)化酵母菌株。SDSPAGE檢測(cè)在26KDA左右有明顯目的條帶，與理論值相符。BCA法測(cè)定甲醇誘導(dǎo)120H融合蛋白表達(dá)量達(dá)到最高濃度8145MGL，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于該融合蛋白存原核系統(tǒng)中產(chǎn)量。WESTERNBLOT鑒定該融合蛋白具有抗原特異性。經(jīng)硫酸銨分級(jí)沉淀法、透析法、鎳離子親和層析法獲得純度為99％的目的蛋白，經(jīng)濃縮管濃縮獲得濃度為4325MGL的目的蛋白5ML。經(jīng)檢測(cè)純化的融合蛋白具有抑制金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的生長(zhǎng)活性，具有較強(qiáng)抑制人卵巢癌細(xì)胞SKOV3細(xì)胞及HELA的生長(zhǎng)增殖的生物活性。結(jié)論成功構(gòu)建畢赤酵母分泌表達(dá)重組載休PPICZΑAMIL288ARG，125ALA，篩選出可以穩(wěn)定高表達(dá)的多拷貝重組菌株，表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)純化，獲得具有抑菌活性，抗腫瘤活性的高純度融合蛋白MIL288ARG125ALA。為進(jìn)一步研究制備低毒、高效的新型抗腫瘤藥物奠定基礎(chǔ)。

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簡(jiǎn)介：⑧論文作者簽名量墜亟指導(dǎo)教師簽名緝論文評(píng)閱人L評(píng)閱人2評(píng)閱人3評(píng)閱人4評(píng)閱人5答辯委員會(huì)主席勤垂壟選出噬委員L委員2委員3委員4委員5答辯日期二零一四年三月七日堡差國(guó)大一農(nóng)恤毒幽㈣㈣粼～1I一藍(lán)是笪趕盈囪畿擔(dān)浙江大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得逝婆太堂或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名盔LJ手碾簽字日期伽F鏟了刖知學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解逝婆太堂有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交本論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)逝江太堂可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索和傳播，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書學(xué)位論文作者簽名舢尋弓蟊簽字日期如L午年了月J歹日如I‘R／J／導(dǎo)師簽簽字日期口棚F年月哆日

簡(jiǎn)介：細(xì)菌在給人類帶來益處的同時(shí)，也時(shí)刻威脅著人類的生活和健康。面對(duì)致病菌的威脅，抗生素的使用必不可少。然而，隨著細(xì)菌耐藥性的愈演愈烈以及有效抗生素的日趨減少，開發(fā)不依賴于傳統(tǒng)抗生素結(jié)構(gòu)修飾或改造的新型抗菌材料具有十分重要的意義。針對(duì)這個(gè)問題，本研究在比較了現(xiàn)有無機(jī)抗菌劑和有機(jī)抗菌劑后，選擇高分子抗菌材料為研究對(duì)象，以哌嗪（PA）和乙二胺四乙酸二酐（EDTAD）為原料設(shè)計(jì)并制備了一種具有獨(dú)特結(jié)構(gòu)的新型哌嗪聚合物PE。首先，利用傅立葉變換紅外光譜儀（FTIR）、核磁共振波譜儀（NMR）、元素分析儀（EA）、差示掃描量熱計(jì)（DSC）、熱重分析（TG）以及光學(xué)顯微鏡等對(duì)其基本結(jié)構(gòu)和性能進(jìn)行了系統(tǒng)表征；接著，考察了PE對(duì)革蘭氏陽性菌金黃色葡萄球菌（SAUREUS）和革蘭氏陰性菌大腸桿菌（ECOLI）及相應(yīng)生物膜形成過程的影響；然后，利用掃描電鏡（SEM）、透射電鏡（TEM）、FTIR、紫外分光光度計(jì)（UV）、酶標(biāo)儀、凝膠電泳等對(duì)PE的抗菌作用機(jī)理進(jìn)行了探討；最后，采用SD大鼠乳鼠顱蓋骨成骨細(xì)胞檢測(cè)了PE的細(xì)胞毒性。在對(duì)PE的抗菌性能和細(xì)胞毒性進(jìn)行了系統(tǒng)的評(píng)價(jià)后，本研究進(jìn)一步將與成骨細(xì)胞功能表達(dá)相關(guān)的生物活性因子MGFCT24E引入到PE的分子結(jié)構(gòu)中以期制備出另一種具有更小細(xì)胞毒性的新型抗菌性哌嗪聚合物PEM。對(duì)于所獲得的產(chǎn)物，采用FTIR、NMR、EA、氨基酸分析儀（AAA）、DSC及TG等對(duì)其基本結(jié)構(gòu)和性能進(jìn)行了表征；然后，評(píng)價(jià)了PEM的體外抗菌性能和細(xì)胞毒性，并與PE進(jìn)行了系統(tǒng)的比較；最后，將兩種新型哌嗪聚合物PE和PEM與具有良好生物相容性和骨傳導(dǎo)性的多孔羥基磷灰石（HA）陶瓷支架進(jìn)行復(fù)合，并對(duì)所得復(fù)合物的抗菌性能和生物相容性進(jìn)行了初步評(píng)價(jià)。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)論如下所述①以PA和EDTAD為原料通過一種簡(jiǎn)單且綠色的方法制備了一種新型的哌嗪聚合物PE1）FTIR、13CNMR和EA的分析結(jié)果表明，PE分子中的PA和EDTAD基本以11進(jìn)行反應(yīng)，最后形成了兩端為羧基封端的聚合物。2）熱分析結(jié)果顯示PE的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度（TG）為5009℃，熱分解溫度為200℃。3）當(dāng)PE溶液處于較低溫度時(shí)，由于分子內(nèi)和分子間氫鍵的作用，會(huì)形成直徑約為5ΜM的凝膠，而隨著溫度的升高（45℃），該凝膠態(tài)逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)槿芤簯B(tài)。②將新型哌嗪聚合物PE作用于ECOLI和SAUREUS，以考察其相應(yīng)的抗菌性能，檢測(cè)指標(biāo)主要包括細(xì)菌敏感性、MIC和MBC值，細(xì)菌生長(zhǎng)抑制情況以及與細(xì)菌生物膜形成過程相關(guān)的游離細(xì)菌和粘附細(xì)菌的快速殺滅作用，細(xì)菌生物膜生長(zhǎng)抑制情況等。除此之外，還考察了環(huán)境因素對(duì)PE抗菌性能的影響。所得結(jié)果如下所示1）與環(huán)丙沙星對(duì)照組相比，PE能夠更好地抑制和殺滅ECOLI和SAUREUS，且其對(duì)ECOLI的作用效果更明顯。2）PE對(duì)ECOLI和SAUREUS的MIC值受到環(huán)境PH值和最初細(xì)菌接種量的影響，具體表現(xiàn)為隨著環(huán)境PH值的上升，PE對(duì)兩種細(xì)菌的MIC值均呈現(xiàn)出先增大后減小的趨勢(shì)；隨著兩種細(xì)菌初始接種量的增加，PE相應(yīng)的MIC值增大。3）PE能夠顯著的影響細(xì)菌生物膜的形成過程，具體表現(xiàn)為與環(huán)丙沙星對(duì)照組相比，PE能夠濃度依賴性的對(duì)游離細(xì)菌和粘附細(xì)菌起到更好的快速殺滅作用，且其對(duì)細(xì)菌生物膜生長(zhǎng)的抑制作用與環(huán)丙沙星對(duì)照組相當(dāng)。③將一定濃度的PE作用于ECOLI和SAUREUS一段時(shí)間后，采用SEM和TEM觀察細(xì)菌形態(tài)的變化；采用FTIR和UV檢測(cè)細(xì)菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)成分的改變；檢測(cè)培養(yǎng)液中K和MG2的濃度以及乳酸脫氫酶（LDH）和Β半乳糖苷酶的活性等以考察PE對(duì)細(xì)菌細(xì)胞膜完整性的影響；檢測(cè)菌體內(nèi)DNA的含量和破損情況以了解PE對(duì)細(xì)菌遺傳物質(zhì)的影響。結(jié)果如下所示1）PE會(huì)直接作用于細(xì)菌的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜，破壞其結(jié)構(gòu)，并使得細(xì)菌內(nèi)容物泄漏，DNA丟失。2）PE會(huì)直接作用于細(xì)菌的遺傳物質(zhì)DNA，使其發(fā)生斷裂，并最終影響細(xì)菌的分裂增殖。④將PE與SD大鼠乳鼠顱蓋骨成骨細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，以檢測(cè)其細(xì)胞毒性，具體包括PE對(duì)成骨細(xì)胞形態(tài)、鋪展、增殖、周期、分化及礦化的影響，所得結(jié)果如下所示1）PE作用于成骨細(xì)胞4H后幾乎不會(huì)對(duì)其鋪展造成影響，而隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)到24H時(shí)，PE對(duì)成骨細(xì)胞鋪展的影響呈現(xiàn)出濃度依賴性，但是均優(yōu)于環(huán)丙沙星對(duì)照組。2）PE會(huì)濃度依賴性地抑制成骨細(xì)胞的增殖；其主要作用方式包括一、當(dāng)PE濃度達(dá)到一定值后，會(huì)對(duì)成骨細(xì)胞的鋪展造成影響，并減少最初粘附的細(xì)胞數(shù)目；二、阻礙成骨細(xì)胞進(jìn)入S期，堆積在G1期，從而出現(xiàn)G2M期阻滯現(xiàn)象，并最終導(dǎo)致成骨細(xì)胞的增殖受到抑制。3）PE會(huì)濃度依賴性地影響成骨細(xì)胞的成熟、分化和礦化，且其抑制作用小于環(huán)丙沙星對(duì)照組。⑤在系統(tǒng)地評(píng)價(jià)了PE的體外抗菌性能和細(xì)胞毒性后，以EDC和NHS為縮合劑，將力生長(zhǎng)因子MGFCT24E引入到PE的分子結(jié)構(gòu)中從而制備出了另一種新型哌嗪聚合物PEM1）FTIR、13CNMR、EA和AAA的分析結(jié)果表明，MGFCT24E已經(jīng)在PE中成功引入，且其含量約為139ΜMOLG。2）熱分析結(jié)果顯示PEM的TG為3656℃，熱分解溫度為315℃。⑥測(cè)試了PEM的體外抗菌活性和細(xì)胞毒性，并與PE進(jìn)行了系統(tǒng)的比較，所得結(jié)果如下所示1）與PE相比，PEM對(duì)ECOLI和SAUREUS的MIC值和MBC值有所增加，但是對(duì)應(yīng)濃度的PEM卻表現(xiàn)出了比PE更優(yōu)的抗菌性能。2）SEM和TEM的結(jié)果顯示，PEM與PE具有相似的抗菌機(jī)理，即破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，并使得遺傳物質(zhì)DNA發(fā)生斷裂或呈現(xiàn)濃縮緊張態(tài)。3）細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，MGFCT24E的引入不僅會(huì)降低材料的細(xì)胞毒性，而且會(huì)發(fā)揮MGFCT24E相關(guān)的生物學(xué)功能。⑦將針狀的HA和球狀的HA按照一定比例進(jìn)行混合后燒結(jié)，獲得具有一定力學(xué)強(qiáng)度的多孔HA陶瓷支架，將PE和PEM分別與該支架進(jìn)行復(fù)合后評(píng)價(jià)所得復(fù)合物的抗菌性能和生物相容性，結(jié)果如下所示1）FTIR和SEM結(jié)果顯示，PE和PEM已經(jīng)與多孔HA陶瓷支架成功復(fù)合。2）抗菌性能測(cè)試結(jié)果表明，復(fù)合物能夠顯著的抑制或殺滅與其直接接觸的細(xì)菌。3）細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與空白對(duì)照組相比，復(fù)合物可以顯著的促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖和總蛋白的分泌。

簡(jiǎn)介：本文以我國(guó)華東地區(qū)采煤沉陷區(qū)復(fù)墾場(chǎng)地為研究對(duì)象，通過收集資料、場(chǎng)地調(diào)查和室內(nèi)分析相結(jié)合的方法系統(tǒng)分析了煤矸石充填復(fù)墾土壤生物學(xué)特性時(shí)空變化特征；煤矸石、粉煤灰及湖泊底泥三種物料對(duì)充填復(fù)墾土壤生物學(xué)特性的影響；通過相關(guān)性分析揭示充填復(fù)墾場(chǎng)地土壤生物學(xué)指標(biāo)與土壤物理、化學(xué)、重金屬含量之間的關(guān)系；利用激發(fā)效應(yīng)機(jī)理，提出了加入小分子碳源、氮源改善充填復(fù)墾土壤生物學(xué)指標(biāo)的措施。主要研究結(jié)論如下1采煤沉陷區(qū)煤矸石充填復(fù)墾場(chǎng)地020CM和2040CM土層土壤微生物數(shù)量、微生物量碳含量、微生物量氮含量、微生物熵、土壤基礎(chǔ)呼吸速率、Β葡萄糖苷酶活性、過氧化氫酶活性、酸性磷酸酶活性、脲酶活性、蔗糖酶活性和芳基硫酸酯酶活性等生物學(xué)指標(biāo)在復(fù)墾后呈增加趨勢(shì)，土壤微生物代謝熵呈降低趨勢(shì)。2分別采用全量數(shù)據(jù)集法和最小數(shù)據(jù)集法對(duì)煤矸石充填復(fù)墾土壤綜合質(zhì)量指數(shù)SQI進(jìn)行評(píng)價(jià)，回歸分析表明充填復(fù)墾土壤SQI值隨復(fù)墾時(shí)間呈增加趨勢(shì)，充填復(fù)墾土壤質(zhì)量演替方向?yàn)檎蜓萏?；最小?shù)據(jù)集法能代替全量數(shù)據(jù)集法對(duì)復(fù)墾土壤質(zhì)量進(jìn)行評(píng)價(jià)。3湖泊底泥充填復(fù)墾土壤生物學(xué)指標(biāo)值高于煤矸石復(fù)墾場(chǎng)地和粉煤灰復(fù)墾場(chǎng)地土壤。湖泊底泥充填復(fù)墾土壤微生物數(shù)量、微生物量碳含量、微生物量氮含量、土壤基礎(chǔ)呼吸速率、微生物代謝熵、Β葡萄糖苷酶活性、酸性磷酸酶活性、蔗糖酶活性、脲酶活性等指標(biāo)超過對(duì)照?qǐng)龅赝寥?，分別高出對(duì)照?qǐng)龅赝寥?％、115、431、12、398、52、99、37和87。4基于全量數(shù)據(jù)集法和最小數(shù)據(jù)集法對(duì)煤矸石、粉煤灰與湖泊底泥充填復(fù)墾土壤質(zhì)量綜合指數(shù)進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果表明基于兩種計(jì)算方法的SQI變化趨勢(shì)一致。復(fù)墾土壤SQI從高到低依次是湖泊底泥復(fù)墾土壤、煤矸石復(fù)墾土壤與粉煤灰復(fù)墾土壤，兩種方法評(píng)價(jià)結(jié)果差異較小，通過最小數(shù)據(jù)集法計(jì)算的SQI結(jié)果能表征復(fù)墾土壤質(zhì)量情況。5煤矸石粉煤灰抑制生長(zhǎng)期內(nèi)冬小麥的根長(zhǎng)、根生物量、根系活力等指標(biāo)。與對(duì)照土壤相比，煤矸石與粉煤灰降低了拔生長(zhǎng)期內(nèi)冬小麥根系分泌物產(chǎn)生速率Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。相關(guān)性分析表明冬小麥根系分泌物產(chǎn)生速率與根系活力成正相關(guān)。復(fù)墾土壤中煤矸石與粉煤灰對(duì)土壤氮素轉(zhuǎn)化速率、多酚氧化酶活性、脲酶活性有抑制作用。相關(guān)性分析表明，復(fù)墾土壤氮素轉(zhuǎn)化效率、土壤酶活性與冬小麥根系分泌物產(chǎn)生速率成正相關(guān)。6小分子碳源和氮源能通過激發(fā)效應(yīng)提高復(fù)墾土壤生物學(xué)指標(biāo)。與對(duì)照土壤相比，高濃度碳源10MGG1提高土壤微生物量碳含量27677天和184430天、微生物量氮量12987天和148930天、Β葡萄糖苷酶活性8917天和102930天、酸性磷酸酶活性16447天和130330天、芳基硫酸酯酶活性54117天和317630天。高碳低氮組（10MGG1葡萄糖和1MGG1硝酸銨）的對(duì)土壤生物學(xué)特性的激發(fā)作用也非常明顯。復(fù)墾場(chǎng)地土壤中可利用碳源含量是影響復(fù)墾土壤生物學(xué)指標(biāo)的限制性因子，碳源加入能迅速激活土壤生物學(xué)活性。相對(duì)于單一碳源或氮源的加入，調(diào)整復(fù)墾場(chǎng)地土壤碳氮比例要比單純施肥更有利于復(fù)墾土壤生物學(xué)功能的恢復(fù)。

簡(jiǎn)介：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文中國(guó)狂犬病毒P和M基因分子生物學(xué)特征研究姓名王曉光申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師侯勇躍唐青20080501RESEARCHONCHARACTEROFMOLECULARBIOLOGYOFRABIESVIRUSPMGENESINCHINAABSTRACTALTHOUGHTHEBULKOFDATAANDRESEARCHONRVNOWEXISTINTHEPUBLICARCHIVES，THERELATIVELYFEWRESEARCHABOUTTHECHARACTERISTICSOFBOTHPHOSPHOPROTEINPPANDMATRIXPROTEINMPGENEOFRABIESVIRUSAREAVAILABLEINTHISSTUDYTHEDFAPOSITIVEHUMANANDDOGSAMPLESWERECOLLECTEDFROMSIXPROVINCESINCLUDINGGUANGXI，GUIZHOU，HUNAN，JIANGSU，ANHUIANDYUNNANTHENUCLEOTIDESEQUENCESOFTHEPPANDMPGENESWHICHWEREAMPLIFIEDBYRTPCRTECHNIQUESWEREDETERMINEDANDCOMPAREDWITHOTHERKNOWNRVISOLATESINGENBANKTHESIMILARITYFUNCTIONALSITESANDPHYLOGENETICANALYSESWEREPERFORMED，WHICHAREHELPFULTOTHEFURTHERRESEARCHONMOLECULARBIOLOGYANDSTRUCTUREOFRABIESVIRUSESINCHINATHERESULTSSHOWTHATTHESIMILARITYOFNUCLEOTIDEANDAMINOACIDSEQUENCESOFPPGENEARE818～100％AND8296997％RESPECTIVELYWHILETHOSEOFMPGENEARE887～100％AND950～1OO％RESPECTIVELYTHEHIGHLYCONSERVEDREGIONOFPGENEISTHEINTERACTIVEREGIONBETWEENPPANDENDOCHYLEMADYNEINLIGHT，CHAIN8LC8，ANDTHEFIRST19AMINOACIDSINTHEINTERACTIVEREGIONBETWEENPPANDLP1ARGEPROTEINTHEREISAFEWSUBSTITUTIONSITESINTHEPGENESUCHASTHESPECIFICSERPHOSPHORYLATIONSITESANDSOMESITESAMONGTHEINTERACTIVEREGIONAA209216BETWEENPPANDNPNUCLEOPROTEINTHEVARIABLEREGION’AA5075LOCATEDINTHESIGNALDOMAINTHEANALYSESOFMGENESHOWTHE58伽AMINOACIDRESIDUEANDTHEPPXYDOMAINAREHI曲LYCONSERVED，WHILET11E17也一22NDAMINOACIDRESIDUESARELOCATEDINTHEPOTENTIALANTIGENDETERMINANTINTHEENDOFNPACCORDINGTOTHEANALYSESOFPANDMGENE，ALLTHETESTEDRVISOLATESBELONGTABIESVIRUSGENOTYPE1BOTHPANDMGENEAREHIGHLYCONSERVEDANDTHEYTAKEONACOEVOLUTIONALPROPERTYALTHOUGHTHEDISTRIBUTIONOFCHINESEISOLATESISREGIONALLYITISNOTSTRICTLYCORRELATEDTOADMINISTRATIONALAREASTHERABIESVIRUSSTRAINSNOTONLYCIRCULATEDINTHEIRORIGINALPROVINCEBUTALSOSPREADTOTHEADJOININGPROVINCESAROUNDTHENATIONALBOUNDARYBETWEENCHINAANDSOUTHEASTASIANS，THERABIESVIRUSISOLATESARETIGHTLYRELATEDTOEACHOTHERGENETICALLYESPECIALLYBETWEENYUNNANPROVINCEANDTHAILANDALLTHERVSTRAINSISOLATEDFROMDOGANDHUMANSAMPLES，ANDPHYLOGENETIEANALYSESINDICATESTHETENDENCYOFRVEVOLUTIONISFROMDOGSTOHUMANS，WHICHCONFNMSTHEIMPORTANTROLEOFDOGRVINHUMANRABIES

簡(jiǎn)介：密級(jí)分類號(hào)學(xué)校代碼10075學(xué)號(hào)20111139理學(xué)碩士學(xué)位論文二氧化鈰及摻銪四氟釔鈉納米顆粒對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)研究學(xué)位申請(qǐng)人陳士柱指導(dǎo)教師王書香教授張金超教授學(xué)位類別理學(xué)碩士學(xué)科專業(yè)有機(jī)化學(xué)授予單位河北大學(xué)答辯日期二〇一四年六月河北大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研宄成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫的研宄成果，也不包含為獲得河北大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書所使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研宄所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說明并表示了致謝。作者簽名_日期今年月2日學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人完全了解河北大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查鬩和借閱。學(xué)校可以公布論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文。本學(xué)位論文屬于1、保密□，在年______月______日解密后適用本授權(quán)聲明。2、不保密4。請(qǐng)?jiān)谝陨舷鄳?yīng)方格內(nèi)打“V”