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簡介：點擊查看更多【醫(yī)學微生物學教案】第三十六章 逆轉錄病毒（ritroviridae）精彩內容。

簡介：大理大學病毒學檢驗期末備考精華大理大學病毒學檢驗期末備考精華責任編輯總結程家國責任編輯總結程家國第1章細胞培養(yǎng)技術細胞培養(yǎng)技術一、名詞解釋一、名詞解釋11細胞培養(yǎng)技術細胞培養(yǎng)技術CELLCULTURETECHNOLOGYCELLCULTURETECHNOLOGY是模擬體內生理環(huán)境條件，一共細胞適宜的營養(yǎng)和溫度條件，在無菌操作的基礎上，使離體組織細胞生長增殖并進行傳代的技術。22細胞系（細胞系（CELLLINESCELLLINES）原代培養(yǎng)物經傳代培養(yǎng)獲得的一群細胞。33原代細胞培養(yǎng)（原代細胞培養(yǎng)（PRIMARYCELLPRIMARYCELL）將動物或人的胎兒組織經剪碎、酶消化、稀釋計數、加營養(yǎng)液，37度培養(yǎng)12天后，形成單層細胞或懸浮細胞的方法。44傳代細胞培養(yǎng)（傳代細胞培養(yǎng)（CONTINUOUSCONTINUOUSCELLCELL）原代細胞培養(yǎng)過程中，在大多數細胞退化時，少數細胞又能長期傳下去，這種能在培養(yǎng)容器內連續(xù)多次傳代的細胞。55細胞株（細胞株（CELLCELLSTRAINSTRAIN）從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得的遺傳、生化特性相同的細胞群。二、問答題二、問答題11簡答空斑形成單位法的原理。簡答空斑形成單位法的原理。答將不同稀釋度的病毒懸液接種于單層細胞上，使病毒吸附于細胞，然后覆蓋一層營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。由于瓊脂的限制，病毒只能感染周圍的細胞，出現蝕斑現象。加入中性紅染料，由于死細胞不能攝入中性紅染料，會出現不染色的空斑。一個空斑理論上可認為石油一個病毒粒子感染形成的，稱為一個空斑形成單位。可以定量測定病毒的感染力。250250終點法的原理和注意事項。終點法的原理和注意事項。答1原理將病毒液經系列稀釋后，接種單層細胞，觀察細胞病變，計算造成50細胞發(fā)生最終病變的病毒液濃度。2注意事項88單層細胞培養(yǎng)上病毒增殖如何檢測單層細胞培養(yǎng)上病毒增殖如何檢測答答99病毒滴度測定有哪些方法病毒滴度測定有哪些方法答答

簡介：犬瘟熱防控研究成就與進展犬瘟熱防控研究成就與進展2011級生物科學20114083049張岳摘要犬瘟熱CANINEDISTEMPER,CD是由犬瘟熱病毒CANINEDISTEMPERVIRUS,CDV引起的一種急性、高度接觸性傳染病，流行范圍廣，發(fā)病率、致死率高，臨床癥狀多樣。CDV感染宿主廣泛，所有日齡的犬都有可能感染。CDV屬于副粘病毒科麻疹病毒屬，有囊膜包裹的單股負鏈線性RNA病毒。CDV基因組編碼6種蛋白，核衣殼（N）蛋白、磷（P）蛋白、基質膜（M）蛋白、融合（F）蛋白、血凝素（H）蛋白和大L蛋白。N、P和L蛋白與病毒復制有關；M蛋白與病毒的裝配和出芽有關；F、H蛋白在病毒的侵染過程中起到關鍵作用。近年來，隨著我國寵物業(yè)、毛皮經濟養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展，CD在我國的發(fā)病率有升高的趨勢。論文對CDV分子生物學研究進展進行歸納總結。關鍵詞關鍵詞犬瘟熱病毒，致病機理，分子生物學，致病機理，診斷檢測，防御治療犬瘟熱CANINEDISTEMPER,CD）是由犬瘟熱病毒CANINEDISTEMPERVIRUS,CDV引起的一種急性、高度接觸性傳染病，流行范圍廣，發(fā)病率及致死率高。臨床癥狀多表現為“雙相熱”，眼鼻有黏液樣分泌物，伴有腹瀉，嚴重時出現血便，四趾肉墊增厚、角質化明顯，神經癥狀多表現為抽搐。CDV感染宿主廣泛，主要為食肉目動物，如犬科、鼬科、浣熊科、貓科和靈貓科等，但主要宿主為犬科動物，所有日齡的犬都有可能感染［1］。本文將近期CDV分子生物學研究進行歸納總結，為深入研究提供參考。犬瘟熱病毒的分子生物學犬瘟熱病毒的分子生物學CDV屬于副黏病毒科麻疹病毒屬，為有囊膜包裹的單股負鏈線性RNA病毒。呈圓形或橢圓形，有時呈長絲狀。直徑約為150NM，核衣殼呈螺旋對稱。CDV只有１種血清型，根據血凝素H基因的多樣性和病毒的毒力，分6種基因型ASIA1、ASIA2、EUROPE、USA、ARCTIC和VACCINE）。由于具有囊膜，CDV對有機溶劑敏感，對酸堿抵抗力弱，所以臨床上常用消毒方法即可殺滅；CDV對熱和干燥敏感，故該病多流行于冬春寒冷季節(jié)。CDV侵染不同類型的細胞，如上皮、間質、神經內分泌和造血干細胞，在不同組織和器官內造成持續(xù)感染，例如中樞神經系統(tǒng)CNS和淋巴組織［2］。感染犬通常表現為呼吸道、胃腸道以及其他組織和器官的多種臨床癥狀，其中急性感染導致中樞神經系統(tǒng)脫髓鞘性腦脊髓炎（DEMYELINATINGLEUKOENCEPHALOMYELITIS,DL）,并引起嚴重的全身免疫抑制和淋巴組織損耗［24］?；蚪M位于病毒粒子內部，被核衣殼蛋白包裹，基因組全長約16KB，基因組呈線性排列。從3’端至5’端的基因順序依次為前導序列、N、P、M、F、H、L、前導（尾隨）序列。3’端前導序列由55個核苷酸組成，5’端前導（尾隨）序列由38個核苷酸組成。3’端前導序列和5’端前導（尾隨）序列，被認為是啟動、調節(jié)序列，指導基因的轉錄復制過程，同時又是CDV基因的轉錄終止、重起始序列。兩序列之間包括6個非重疊基因區(qū)，編碼六種基因蛋白核衣殼蛋白N、磷蛋白P、基質膜蛋白M、融合蛋白F、血凝素蛋白H、大蛋白L。N、P和L蛋白形成核糖核蛋白復合體RNP包裹病毒RNA，三種蛋白與病毒復制過程相關；兩種表面糖蛋白F和H蛋白黏附在囊膜表面，形成纖突在病毒感染侵入過程中發(fā)揮重要作用；M蛋白則嵌合到囊膜內，在糖蛋白與核衣殼連接中起橋連作用，同時與病毒的裝配和出芽有關。1、核衣殼、核衣殼NN蛋白及其基因蛋白及其基因核衣殼N蛋白基因由1683個核苷酸組成，有一個開放閱讀框起始于53位～55位的AUG起始密碼子，共編碼523個氨基酸，分子質量為58KU。N蛋白基因由中間保守區(qū)和N末端、C末端的可變區(qū)組成［5］。N蛋白具有較高的保守性，能誘導體液免疫和細胞免疫。N蛋白的C末端1AA～80AA、337AA～358AA為抗原識別不可或缺的抗原表位，能誘導體液免疫產生抗體［6］；N蛋白的9氨基酸寡肽281AA～289AA，TYRPROALALEUHISGLUPHE介導CTL反應，可能是CTL活性細胞作用靶細胞的抗原表位之一，對CDV引起的細胞免疫具有重要作用［78］。N蛋白和P、L蛋白與復制過程相關，P和L蛋白具有RNA聚合酶活性，隨后N蛋白包裹病毒RNA，避免RNA降解［910］，三者能夠構成一個復制單位－核糖核蛋白復合體RNP。N蛋白上有特定的細胞核定位信號NLS和細胞核轉出信號NES，NLS和NES為N蛋白核轉運過程中所必需的［11］。YOSHIDAE等［6］通過間接免疫熒光實驗IFA測得，缺失了N末端的1AA～80AA的N蛋白只4、融合、融合FF蛋白及其基因蛋白及其基因融合F蛋白基因長為2205個核苷酸，F蛋白分子質量為62KU，由F1和F2由兩個亞單位蛋白組成，翻譯時起始于461～463位的AUG到757位核苷酸，編碼99個氨基酸為F2蛋白，分子質量為23KU，從758至2071位核苷酸，編碼438個核苷酸為F1蛋白。F1蛋白嵌入囊膜，而F2蛋白位于囊膜外側，F1蛋白和F2蛋白通過二硫鍵連接。F蛋白經蛋白酶裂解分為三個部分，縮氨酸信號肽、F2蛋白和F1蛋白［20］。裂解位點AQIHW在縮氨酸信號肽的C端，而RRQRR在F1蛋白的N端［2123］，這兩個裂解位點是高度保守的。縮氨酸信號區(qū)在前體蛋白F0被裂解成F1蛋白和F2蛋白的過程中起到至關重要的作用［24］。將ASIA1型和ASIA2型CDV的縮氨酸信號區(qū)分別與ONDERSTEPOORT株進行比對，氨基酸差異性分別為30％～32％和34％～35％，核苷酸序列差異性分別為15％～16％和18％～19％，說明該信號肽序列的多樣性。F1蛋白具有融合功能，它包括N端的縮氨酸融合區(qū)FP、穿膜區(qū)TM和C端的CYTOPLASMICTAI區(qū)CT；F2蛋白具有附著功能。ASIA型CDV的F蛋白上有7個潛在的糖基化位點，其中4個分別在F2蛋白區(qū)的141位～143、173位～175和179位～181位和F1蛋白區(qū)的517位～519位［25］。另外3個潛在糖基化位點具有一致的氨基酸序列NXS/T，而且只在ASIA1型CDV中被發(fā)現。其中2個在縮氨酸信號區(qū)的62位～64位和108位～110位，最后一個則在個別ASIA1型CDVF1蛋白區(qū)的605位～607位［26］。F蛋白是位于CDV囊膜上的I型糖蛋白，以非共價鍵連接的同源三聚體形式存在，介導囊膜和細胞膜融合，使病毒具有在宿主體內擴散的能力，是感染性病毒粒子進入宿主細胞所必需的。VONMESSLING等［15］構建了3種重組質粒58UTRMFNP、58△F106和58UTRMFNP△F106。研究表明只缺失F蛋白縮氨酸信號FSP區(qū)不影響病毒感染的進程和結果；將MFUTR替換成NPUTR能夠延長病毒在中樞神經系統(tǒng)中的感染進程；縮短MFUTR能夠提高F蛋白轉錄水平，進而促進F蛋白的翻譯和成熟病毒的產生。結果證明，麻疹病毒屬病毒MF基因區(qū)通過控制Ｆ基因表達的轉錄過程來調節(jié)病毒的抗原性［27］。5、血凝素、血凝素HH蛋白及其基因蛋白及其基因血凝素H蛋白基因長為1946個核苷酸，有一個開放閱讀框，起始于21位～23位ATG，終止于1833位～1835位的TAA，編碼604個氨基酸，分子質量為76KU。在麻疹病毒屬所有的結構蛋白基因中，H蛋白基因變異性最大。H蛋白是CDV囊膜表面主要的糖蛋白之一，為Ⅱ型糖蛋白，是構成囊膜纖突的主成分，決定了CDV的宿主特異性，并協(xié)助F蛋白使病毒囊膜與宿主細胞發(fā)生膜融合侵入宿主細胞。CDV的H蛋白首先吸附于宿主細胞SLAM受體上，隨后H蛋白的構象發(fā)生改變，產生信號給F蛋白使病毒囊膜和宿主細胞發(fā)生膜融合，進而入侵宿主細胞。而且膜融合的程度和效率也依賴于H蛋白［2830］。H蛋白還決定CDV的生長特性和趨向性［29］。也是誘導機體產生中和抗體的主要蛋白之一，而且抗CDVH蛋白單克隆抗體MCAB保護力強于抗F蛋白MCAB［31］。CDVH蛋白有廣泛的糖基化位點，但是野毒株與疫苗株H蛋白的潛在糖基化位點不同，野毒株為8個～9個，而ONDERSTEPOORT株為4個［3233］。形成大蝕斑的ONDERSTEPOORTOL株的H蛋白在60位氨基酸殘基處與野毒株5804P的H蛋白存在差別，可能是5804P株多了幾個潛在N糖基化位點，而且疫苗株H蛋白的分子量小于野毒株的H蛋白。由此可以推測減少的N糖基化位點可能對病毒感染性減弱起到關鍵作用，如果增加N糖基化位點可能最終導致疫苗免疫失?。?5，3334］。OL疫苗株的H蛋白較5804P強毒株的H蛋白少了3個潛在連接N糖基化位點，導致了在309N～S、393T～A和456N～D氨基酸序列的改變。VONMESSLINGV等［29］，研究證明了野毒株5804P的H蛋白上的7個標準的膜外N糖基化位點和一個非標準的N糖基化位點，其中5個可能被利用。將5804PH蛋白N糖基化位點突變，保留與OL株相同的3個糖基化位點，構建P5804PHOLLIKE重組質粒，經轉染細胞表達，發(fā)現重組病毒致病性減弱，證明H蛋白的糖基化影響病毒的毒力；再使其H蛋白上的N糖基化位點全部缺失，構建P5804PH5KO和P5804PH6KO重組質粒，發(fā)現重組病毒不再引起發(fā)病，但是仍然具有引起免疫抑制的能力，這就證明了H蛋白N糖基化位點的減少，能夠引起病毒感染性減弱而不影響免疫抑制反應。所以H蛋白的N糖基化位點對于病毒感染進程是必不可少的，并且影響病毒的感染性。6、大、大LL蛋白及其基因蛋白及其基因大L蛋白基因長為6573個核苷酸，有一個開放閱讀框起始于23位的AUG，編碼2161個氨基酸，5’端有22個核苷酸的非編碼區(qū)序列

簡介：【書名版次】普通病毒學第一版開本16開【作者】謝天恩,胡志紅【出版社】科學出版社【簡介】本書系統(tǒng)論述各類病毒的本質、結構與功能的相似形和特點，概括各方面共同的理論和概念，從分子水平、細胞水平、機體水平及群體水平闡明病毒與宿主相互關系的規(guī)律。內容包括病毒的分類與命名、形態(tài)結構、理化性質、復制、遺傳與變異、進化、基因工程、朊病毒、病毒與腫瘤、病毒與細胞凋亡，人類致病性病毒、昆蟲病毒、植物病毒等與宿主之間的相互關系。書后附有病毒專業(yè)術語匯編。全書內容翔實，豐富而新穎，既介紹各類病毒的基礎知識、又反映病毒研究的最新發(fā)展動態(tài)和方向。本書適用于病毒學、微生物學專業(yè)碩士、博士研究生的專業(yè)教材，也可供從事病毒學、微生物學、醫(yī)學、獸醫(yī)、農業(yè)科技的人員參考。第三節(jié)病毒顆粒形態(tài)結構的對稱性提要第四章病毒的復制前言第一節(jié)用于病毒復制研究的實驗系統(tǒng)第二節(jié)病毒的復制周期第三節(jié)病毒的異常復制提要第五章病毒的遺傳與變異前言第一節(jié)病毒的突變第二節(jié)病毒的重組第三節(jié)影響病毒表型的病毒間相互作用第四節(jié)病毒基因圖的構建方法第五節(jié)病毒基因功能的研究方法第六節(jié)哺乳動物病毒表達載體提要第六章病毒的進化前言第一節(jié)有關病毒起源的學說第二節(jié)研究病毒分子進化的有關方法第三節(jié)DNA病毒的進化第四節(jié)RNA病毒的進化提要第七章病毒與腫瘤第一節(jié)腫瘤病毒概述第二節(jié)DNA腫瘤病毒第三節(jié)RNA腫瘤病毒第四節(jié)原癌基因與抑癌基因第五節(jié)細胞轉化與腫瘤提要第八章病毒的持續(xù)性感染前言第一節(jié)病毒感染的類型第二節(jié)病毒持續(xù)性感染的機制第三節(jié)病毒持續(xù)性感染的實例

簡介：1呼吸道病毒呼吸道病毒流感病毒流感病毒麻疹病毒麻疹病毒腮腺炎病毒腮腺炎病毒呼吸道合胞病毒呼吸道合胞病毒科正粘病毒科分節(jié)段，對RNA酶敏感。副粘病毒科不分節(jié)段，對RNA酶穩(wěn)定。共同點有包膜，單負鏈RNA血清型見正文一種一種一種生物學特性■核衣殼①由病毒分節(jié)段的單負鏈RNA與核蛋白NP組成。其上還附著有RNA依賴的RNA復合酶復合體蛋白。②分節(jié)段分節(jié)段。甲乙型流感病毒有8個節(jié)段。③流感病毒的核酸無感染性。④NP是主要的結構蛋白，抗原結構穩(wěn)定，與M蛋白一起決定病毒的型特異性，很少發(fā)生變異，其抗體中無中和病毒的能力。⑤根據根據NP和MP的抗原性不同，可將流感病的抗原性不同，可將流感病毒分為甲、乙、丙三型。毒分為甲、乙、丙三型?！霭葘踊|蛋白基質蛋白（MATRIXPROTEIN,MP）外層脂蛋脂蛋白（LIPOPROTEIN,LP）作用維持病毒外形和完整性?！鶰P蛋白抗原蛋白抗原結構較穩(wěn)定，呈型特異性，其抗體中無中和病毒的能力。→刺突血凝素血凝素（HA）和神經氨酸酶神經氨酸酶（NA）。HANA4151HA和NA的抗原結構很不穩(wěn)定，易發(fā)生變異，是劃分甲型流感病毒甲型流感病毒亞型的主要依據。HA蛋白HN蛋白無HA蛋白無NA蛋白致病性流感①麻疹麻疹→KOPLIK斑病毒在真皮層內增殖，在口腔兩頰內側黏膜表面形成特征性的中心灰白、周圍紅色的KOPLIK斑。②亞急性硬化性全亞急性硬化性全腦炎（腦炎（SSPE）終生免疫力。細胞免疫有很強的保護作用，在麻疹恢復期起主導作用。主要引起腮腺腫脹、疼痛為主要癥狀的流行性腮流行性腮腺炎。腺炎。睪丸炎、卵巢炎病變特點是形成多個細胞融合組成的多核巨細胞。26月的嬰幼兒引起細支氣管炎和肺炎（下），大兒童和成人引起鼻炎、感冒（上）傳播①唯一自然宿主是人②飛沫傳播③傳染性極強，易感者接觸幾乎全部發(fā)?、傥ㄒ蛔匀凰拗魇侨刷陲w沫傳播。3屬肝病毒屬正嗜肝DNA病毒屬形態(tài)特點球形，單正鏈RNA，20面體，無包膜。電鏡下兩種顆粒同時存在實心有感染性，有抗原性?？招臒o感染性，有抗原性。缺乏核酸的空心衣殼?！龃笄蛐晤w粒（大球形顆粒（DANE顆粒）顆粒）雙層。具有感染性的完整的HBV顆粒外層包膜脂質雙層包膜蛋白（HBV表面抗原（HBSAG）、前S1抗原、前S2抗原）內層核衣殼20面體。→表面衣殼蛋白為HBV核心抗原（核心抗原（HBCAG）；→核心含DSDNA、DNA多聚酶多聚酶■小球形顆粒小球形顆粒中空。成分為HBSAG。復制時產生過剩的HBSAG裝配而成。不含DNA及DNA多聚酶，無感染性?！龉苄晤w粒管形顆粒小球形顆粒聚合而成。后兩者只有表面抗原，是復制過剩的外衣殼，不具有傳染性傳染源病人潛伏后期、急性早期傳染性最強病人不論什么時期，病人血清都有傳染性。攜帶者不易被察覺，更危險傳播途徑糞口傳播口傳播，污染水源、食物（海產品），可造成爆發(fā)流行血液和血制品傳播垂直傳播胎兒期、圍生期（分娩時經產道）性傳播及密切接觸傳播致病機制主要與免疫病理損傷有關，免疫系統(tǒng)在清除病毒的過程中損傷了肝細胞。自限性疾病自限性疾病，預后良好，不轉為慢性。病后可獲得牢固免疫力。（一）HBV對肝細胞無直接損傷作用，肝細胞損傷是由于免疫病理損傷所致，程度與免疫應答強度有關，故乙肝的臨床表現多樣化。①病毒感染波及肝細胞數少，免疫功能正常（急性肝炎）②病毒感染波及肝細胞數多，細胞免疫過程（重癥肝炎）③免疫功能低下（慢性肝炎、肝硬化）④對HBV形成免疫耐受（攜帶者）（二）HBV與原發(fā)性肝癌有密切關系。X基因整合抗原性主動乙肝疫苗被動抗HBSIGG■表面抗原（表面抗原（HBSAG）①三種顆粒上均有②大量存在于患者血中，是HBV感染的主要標志③具有抗原性（弱），刺激機體產生保護性抗體（抗HBS）。中和抗體，建立免疫標志④是制備疫苗的最主要成分⑤HBV感染性與HBSAG陽性并非一致，消毒手段僅能使HBV失去傳染性，但HBSAG抗原性仍存在■核心抗原（核心抗原（HBCAG）①存在于DANE顆粒上②血中不能檢出（僅存在于肝細胞內）③抗原性強，其抗體無中和作用IGM提示HBV正在復制IGG持續(xù)時間長■E抗原（抗原（HBEAG）PREC蛋白翻譯加工后的產物，存在于內衣殼，為可溶性蛋白，游離存在于血中。與DANE顆粒及DNA多聚酶的消長基本一致，可作為HBV復制及具有強傳染性的指標之一。■抗體抗體抗HBS（有免疫力）、抗HBE（傳染性↓、復制

簡介：揚州大學博士學位論文重組減毒細菌運送CD8T細胞表位的機理及攜帶新城疫病毒DNA疫苗鼠傷寒沙門氏菌的免疫生物學特性研究姓名潘志明申請學位級別博士專業(yè)預防獸醫(yī)學指導教師焦新安CLAUDELECLERC20040501基因在細胞中獲得了表達?？乖岢式Y果顯示，OVA257264和LCMVLL8．132CD8T細胞表位基因在抗原提呈細胞APC中表達后，可被APC直接加工、提呈給特異性T細胞雜交瘤B3Z和NVLH7，并刺激T細胞雜交瘤分泌產生了IL一2。而且，隨著外源基因表達量的增多，其后所獲得的抗原提呈效應也相應增強。此結果說明，重組質粒PG2F、PDG2F和PGIB構建正確，即抗原表位基因無論是連接在GFP基因的N末端還是C末端，都能獲得成功表達。感染試驗證實，減毒大腸桿菌13A和25A以及減毒沙門氏菌SL7207對LK6細胞或LLD細胞均具有良好的侵襲能力；而且骨髓源樹突狀細胞BMDC對重組大腸桿菌具有很好的攝取功能。三種細菌載體均能向LK6或LLD細胞運送真核表達質粒PG2F，并且外源GFP基因獲得表達，但是對于不同的細胞類型，細菌的運送效率存在差異。LK6和LLD細胞對原核表達的CD8T細胞表位的抗原提呈結果顯示，LK6細胞經重組大腸桿菌13APTG2F和重組沙門氏菌SL7207PTG2F、SL7207PDG2F感染作用，在感染早期2H，LK6細胞可提呈13A和SL7207表達的OVA257．264CD8T細胞表位，在感染晚期48H，這一提呈效應降低；LLD經重組大腸桿菌13APTG2F感染，在感染早期2H，LLO細胞能提呈13A表達的LCMVLL8132CD8T細胞表位，且隨著感染時間的推移，提呈效應隨之增強。鑒于25APTG2F感染的LKB和LLD細胞均未能有效地刺激相應的T細胞雜交瘤，說明25A沒有成功地運送兩個T細胞表位。在LK6和LLD細胞對細菌運送的真核表達質粒的抗原提呈試驗中發(fā)現，重組大腸桿菌13APG2F和25APG2F感染LK6細胞2H，LKB細胞就可將其表達的OVACD8T細胞表位提呈給B3ZT細胞雜交瘤，在感染48H時，提呈效應獲得溫和的增強；經重組沙門氏菌SL7207PG2F處理的LK6細胞，在早期2H缺乏刺激相應T細胞雜交瘤的能力，但在晚期48H則表現出提呈OVACD8T細胞表位的活性。這說明，13A和25A所攜帶的HLY基因有助于真核表達質粒在細胞中的釋放和表達。BMDC對減毒大腸桿菌運送的T細胞表位的抗原提呈結果表明，BMDC經13APTG2F和13APG2F作用后，均能有效提呈OVA257264和LCMV118132CD8T細胞表位給相應的T細胞雜交瘤，而且在同樣的作用條件下，BMDC對13A運送的抗原表位的提呈效應要強于LKO和LLD細胞；由于25APTG2F和J1

簡介：中國醫(yī)科大學碩士學位論文腺病毒載體介導共刺激分子B71基因對兒童肝母細胞瘤體外生物學特性的影響姓名王斌申請學位級別碩士專業(yè)小兒外科指導教師劉磊20070401中文論著摘要腺病毒載體介導共刺激分子B7．1基因對兒童肝母細胞瘤體外生物學特性的影響實驗背景和目的人體的抗腫瘤免疫以T細胞介導的細胞免疫為主，T細胞的活化需雙信號刺激第一信號由T細胞抗原受體TCR與抗原提呈細胞APC上的抗原肽MHC分子復合物結合提供，第二信號由APC上的共刺激分子與T細胞上的相應配體結合提供。只有雙信號共同刺激才能有效激活特異性的T細胞，缺乏第二信號造成T細胞克隆凋亡，使腫瘤細胞產生免疫逃避。APC上的共刺激分子主要是一些粘附分子，其中B7．1分子是重要的粘附分子。肝母細胞瘤被認為是一種弱免疫原性的惡性腫瘤，腫瘤細胞表面缺乏足夠的可以與淋巴細胞表面結合的配體，主要是指B7一ICD80和B72CD86，其中缺乏B7．1分子的表達是其無法提供第二信號的重要原因。我們希望通過基因轉染的技術手段達到提高肝母細胞瘤細胞表面的B7．1分子抗體表達水平，恢復其傳導第二信號刺激的能力，從而誘導特異性抗腫瘤免疫反應的目的。為此，我們進行了以下的實驗研究。1．檢測肝母細胞瘤細胞中B7．1分子的表達水平。2通過含HB7．1基因的重組腺病毒載體轉染肝母細胞瘤細胞株，建立B7．1分子高表達的陽性克隆。3．觀察轉染后腫瘤細胞B7．1分子的表達水平及細胞生物學特性的變化4．觀察轉染含HB7．1基因的瘤苗對T淋巴細胞增殖的影響。實驗方法通過含HB7．1基因的重組腺病毒載體轉入HEPG2細胞，流式細胞儀FCM檢測HEPG2和HEPG2／HB7．1細胞表面BT1分子的表達水平。觀察HEPG2和HEPG2／B_B7．1細胞的生長曲線。用混合淋巴細胞培養(yǎng)法檢測瘤苗對T淋巴細胞增

簡介：分類號華中農業(yè)大學碩士學位論文密級牛皰疹病毒1型特異編碼的ULO．5基因生物學特性研究STUDYONTHEBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFTHESPECIFICUL0．5GENEENCODEDBYBOVINEHERPESVIRUSTYPE1研究生張煒指導教師劉正飛教授指導小組陳煥春院士專業(yè)預防獸醫(yī)學獲得學位名稱農學碩士金梅林教授何啟蓋教授研究方向動物病原分子生物學獲得學位時間2012年6月華中農業(yè)大學動物醫(yī)學院二。一二年六月㈣㈣㈣㈣華中農業(yè)大學學位論文獨創(chuàng)性聲明及使局Y仗2儀1巾61926學位論文是否保密否如需保密，解密時間年月日獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得華中農業(yè)大學或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料，指導教師對此進行了審定。與我一同Z作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中做了明確的說明，并表示了謝意。研究生簽名耀韋晰】艫年易月7日學位論文使用授權書本人完全了解華中農業(yè)大學關于保存、使用學位論文的規(guī)定，即學生必須按照學校要求提交學位論文的印刷本和電子版本；學校有權保存提交論文的印刷版和電子版，并提供目錄檢索和閱覽服務，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。本人同意華中農業(yè)大學可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學位論文的全部或部分內容．為存在館際合作關系的兄弟高校用戶提供文獻傳遞和交換服務，同時本人保留在其他媒體發(fā)表論文的權力。注保密學位論文即涉及技術秘密、商業(yè)秘密或申請專利等潛在需要提交保密的論文在解密后適用于本授權書。糊黼搟彬必P鋤張別87F簽名日期加億年彥月羅日簽名日期1／O仁年?！隆Ｏθ兆⒄垖⒈颈碇苯友b訂在學位論文的扉頁和目錄之間

簡介：分類號密級國際十進分類號（UDC）第四軍醫(yī)大學學位論文漢坦病毒嵌合基因G1S07、G2S07重組腺病毒的改建、表達及其免疫學特性的比較研究（題名和副題名）李璞媛（作者姓名）指導教師姓名徐志凱教授指導教師單位第四軍醫(yī)大學基礎部微生物學教研室申請學位級別博士專業(yè)名稱微生物學論文提交日期201004答辯日期201005論文起止時間2007年8月至2010年8月學位授予單位第四軍醫(yī)大學漢坦病毒嵌合基因漢坦病毒嵌合基因G1S07、G2S07重組腺病毒的重組腺病毒的改建、表達及其免疫學特性的比較研究改建、表達及其免疫學特性的比較研究研究生李璞媛學科專業(yè)微生物學所在單位第四軍醫(yī)大學基礎部微生物學教研室導師徐志凱教授輔導教師張芳琳副教授白文濤講師資助基金項目國家863項目課題資助（2006AA02A225）軍隊重大科技攻關項目資助（08G112）關鍵詞漢坦病毒；嵌合基因；載體改建；腺病毒表達系統(tǒng)；免疫學特性中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學2010年4月

簡介：第四軍醫(yī)大學博士學位論文漢灘病毒76118株G1S07和G2S07不同嵌合基因的表達及免疫學特性研究姓名劉勇申請學位級別博士專業(yè)微生物學指導教師徐志凱200351第四軍醫(yī)大學博士學位論文英文縮略詞表英文縮寫英文全名中文譯名AAAMINOACID氨基酸ACMNPVAUTOGRAPHCALIFORNICAMULTICAPSID苜稽銀紋夜蛾核多角體病NUCLEOPOLYHEDROVIRUS毒AMPAMPICILIN氨芐青霉素BACMIDBACULOVIRUSPLASMID桿狀病毒質粒BPBASEPAIR堿基對BSABOVINESERUMALBUMIN牛血清白蛋白CARCOXSACKIEVIRUSANDADENOVIRUSRECEPTOR柯薩奇病毒和腺病毒受體CPECYTOPATHICEFFECT細胞病變效應IMSODIMETHYLSULPHOXIDE二甲基亞砜DNTPDEOXYRIBONUCLEOTIDETRIPHOSPHATE脫氧核糖核苷三磷酸ELISAENZYME．1INKEDIMMUNOSORBENTASSAY酶聯(lián)免疫吸附試驗FBSFETUSBOVINESERUM胎牛血清FITCFLUORESCEINISOTHIOCYANATE異硫氰酸熒光素GPGLYCOPROTEIN糖蛋白HBCAGHEPATITISBVIRUSCOREANTIGEN乙肝病毒核心抗原|FRSHEMORRHAGICFEVERWITHRENALSYNDROME腎綜合征出血熱I，IL’SHANTAVIRUSPULMONARYSYNDROME漢坦病毒肺綜合征HRPHORSERADISHPEROXIDASE辣根過氧化物酶1FAMMUNOFLUORESCENCEASSAY免疫熒光分析IL’TGISOPROPYLTHIODDGALATOSIDE異岡基硫代半乳糖營KANKANAMYCIN旨那霉素KBKILOBASE千堿基F。I50MEDIANLETHALDOSE半數致死螨LML’LOWMELTINGPOINTAGAROSE低熔點瓊脂榭F

簡介：分類號密級國際十進分類號（UDC）第四軍醫(yī)大學學位論文漢坦病毒漢坦病毒嵌合基因嵌合基因G1/G2S07HSP70C、UBG1/G2S07重組腺病毒免疫學特性腺病毒免疫學特性的研究研究（題名和副題名）程林峰（作者姓名）指導教師姓名徐志凱教授指導教師單位第四軍醫(yī)大學基礎部微生物學教研室申請學位級別碩士專業(yè)名稱病原生物學論文提交日期201104答辯日期201105論文起止時間2009年6月至2011年4月學位授予單位第四軍醫(yī)大學漢坦病毒漢坦病毒嵌合基因嵌合基因G1/G2S07HSP70C、UBG1/G2S07重組腺病毒免疫學特性腺病毒免疫學特性的研究研究研究生程林峰學科專業(yè)病原生物學所在單位第四軍醫(yī)大學基礎部微生物學教研室導師徐志凱教授輔導教師張芳琳副教授資助基金項目國家“863”項目課題資助（2006AA02A225）關鍵詞漢坦病毒；疫苗；免疫學特性；動物保護試驗中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學二O一一年四月

簡介：四川大學碩士學位論文漢坦病毒分子流行病學研究及LPOMPM基因的克隆表達姓名蘆殿香申請學位級別碩士專業(yè)病原生物學指導教師陳建平20050501四川大學碩士學位論文漢坦病毒分子流行病學研究及LP．OMPM基因的克隆表達嗜肺軍團菌是一種革蘭染色陰性，選擇}生胞內寄生的細菌。人類感染嗜肺軍團菌可引起肺部疾病，以PONTIAC熱和非典型肺炎癥狀為主。軍團菌可在多種細胞內復制，但在人類以寄生于肺泡巨噬細胞為主。已有關于軍團菌外膜蛋白成分是否作為細菌胞內寄生及致病的關鍵性因素的研究，并且已發(fā)現了部分對軍團菌胞內寄生逃避宿主抗原遞呈途徑及殺滅宿主細胞起重要作用的軍團菌的基因2州。雖然關于嗜肺軍團菌及其它軍團菌屬的外膜蛋白是否存在共性的報道觀點不一，但一些血清型別的嗜肺軍團菌確實含有分子量在25KDA29KDA的外膜蛋白成份。據KRIONS報道，把編碼嗜肺軍團菌25KDA主要外膜蛋白的基因轉入大腸桿菌JM83，表達的蛋白可使非調理素依賴的對U．937細胞的粘附作用較對比組增加5倍以上，應用主要外膜蛋白特異的單克隆抗體可阻斷此粘附作用，故認為軍團菌25KDA的主要外膜蛋白MOMP作為一種粘附因子可介導軍團菌粘附到宿主細胞，與軍團菌的毒力緊密相關。因此，我們選擇編碼主要外膜蛋白的基因作為研究對象，希望能為研究主要外膜蛋白基因的結構，功能及研制軍團菌基因工程疫苗奠定理論基礎。本研究分為兩部分進行第一部分以588份捕獲于吉林省不同地區(qū)的褐家鼠鼠肺材料作為研究對象，利用贏接免疫熒光法篩選其中的陽性鼠肺，分析吉林省褐家鼠的漢坦病毒帶毒率；并用逆轉錄多聚酶鏈反應RTMR擴增8份吉林省褐家鼠中具有地域代表性的陽性鼠肺漢坦病毒的M和S基因片段，將其與我國及其他國家具有代表性毒株相應的基因片段進行序列對比構建吉林省褐家鼠的分子進化樹。第二部分用PCR技術擴增嗜肺軍團菌的主要外膜蛋白抗原基因OMPM并克隆入載體PUCL8，利用JML09表達此重組質粒后通過SDSPAGE鑒定所表達的蛋白質。本研究結果表明在588份吉林省褐家鼠鼠肺中有陽性鼠肺55例，即吉林省褐家鼠漢坦病毒帶毒率為9．35％。所構建的吉林省褐家鼠分子進化樹的結