簡(jiǎn)介：復(fù)旦大學(xué)碩士畢業(yè)論文上海地區(qū)諾如病毒分子流行病學(xué)調(diào)查及GII．4流行株進(jìn)化規(guī)律的初步研究MOLECULAREPIDEMIOLOGYOFNOROVIRUSASSOCIATEDWITHACUTEGASTROENTERITISINSHANGHAIANDTHEPRELIMINARYINVESTIGATIONOFEVOLUTIONARYMECHANISMSOFTHEGII．4EPIDEMICSTRAINS院系專業(yè)姓名指導(dǎo)教師導(dǎo)師組成員公共衛(wèi)生臨床中心臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)沈震張軍副研究員朱召芹副研究員張萬(wàn)菊助理研究員完成日期2014年4月10日GII．4流行株的進(jìn)化規(guī)律。結(jié)果I．上海地區(qū)成人諾如病毒的分子流行病學(xué)調(diào)查2012年1月至2013年12月，共采集846份成人≥16歲急性腹瀉患者糞便樣本，其中2012年度387份，2013年度459份，全部樣本均完成常規(guī)分子檢測(cè)。GI群檢出22例，檢出率為2．60％；GII群檢出117例，檢出率13．83％。GI群呈現(xiàn)低位流行、全年散發(fā)的狀態(tài)，無(wú)明顯的季節(jié)分布GII群在2012年10月．12月出現(xiàn)高位流行，檢出率均在30％以上，11月份的檢出率高達(dá)60％。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，GII群諾如病毒相關(guān)的急性腹瀉好發(fā)于中老年人，特別是46．55歲個(gè)體，檢出率達(dá)20．30％，相比于35歲以下個(gè)體，46歲以上人群GII群檢出率明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0．05。GI群在成人中的流行無(wú)明顯年齡分布特征。對(duì)諾如病毒陽(yáng)性樣本進(jìn)行基因分型發(fā)現(xiàn)，近兩年來(lái)上海地區(qū)GI群主要的流行株為GI．3和GI．4。GII群中絕大部分為GII．4型，占93．40％，除既往DENHAAG_2006B及NEWORLEANS一2009流行株外，首次檢測(cè)到新型變異株SYDNEY_2012。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，2012年10．12月在上海地區(qū)高位流行的GII群均是該新型GII．4變異株，表明其已成為上海地區(qū)的優(yōu)勢(shì)株?；仡櫡治霭l(fā)現(xiàn)，SYDNEY_2012新型變異株在2012年9月份已經(jīng)在上海地區(qū)出現(xiàn)。進(jìn)一步分析證實(shí)SYDNEY2012變異株為GII．E型ORFL與GII．4型ORF2的重組體，重組位點(diǎn)處于基因組5037BP．5062BP。2．GII．4流行株體外分子進(jìn)化模擬的研究通過(guò)對(duì)188條VPL全長(zhǎng)序列的比對(duì)分析，共檢出57處變異頻繁的氨基酸位點(diǎn)，其中40個(gè)突變位點(diǎn)集中在P2區(qū)，不同時(shí)期的流行株也出現(xiàn)重復(fù)使用相同氨基酸殘基的現(xiàn)象。對(duì)VPL全長(zhǎng)序列的系統(tǒng)進(jìn)化分析顯示，不同時(shí)期的流行株存在一定的進(jìn)化距離，在進(jìn)化樹中以單一的簇存在。對(duì)VPL不同區(qū)域分別進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析發(fā)現(xiàn)，僅P2區(qū)的進(jìn)化趨勢(shì)與VPL全長(zhǎng)基因高度一致，而S區(qū)和P1區(qū)的進(jìn)化分析顯示各個(gè)時(shí)期流行株交錯(cuò)分布，無(wú)法表征不同時(shí)期流行株間的分子進(jìn)化距離。正向選擇分析共檢出13處關(guān)鍵信息位點(diǎn)，其中9處集中于P2區(qū)。3．GII．4流行株進(jìn)化規(guī)律的初步研究通過(guò)體外蛋白表達(dá)對(duì)近期DENHAAG2006B、NEWORLEANS2009及SYDNEY_2012三種流行株的受體識(shí)別模式鑒定發(fā)現(xiàn)，三種流行株對(duì)不同型別的

簡(jiǎn)介：華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文WEB20時(shí)代的病毒式營(yíng)銷的傳播學(xué)解讀姓名甘藝娜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)傳播學(xué)指導(dǎo)教師陳少華20090529華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文IIABSTRACTINRECENTYEARS,THENEWAPPLICATIONSTYLESUCHASTHEBLOG,RSS,HASQUICKLYCHANGEDTHEINTERNET,INDICADINGTHECOMINGOFWEB20THEINTERNETHASCOMEINTOAPERIODWHENCUSTOMERSPARTICIPATEANDSHAREBROADLYWITHTHEDEVELOPMENTOFWEB20ANDTHEGROWTHINTHENUMBEROFINTERNETUSERS,VIRALMARKETINGHASBECOMEAHOTTOPICINPRACTICEVIRALMARKETINGONTHEINTERNETHASGOTTHEMOSTPERFECTEMBODIMENTTHISARTICLEEXPOUNDSTHEVIRALMARKETINGISAKINDOFNETWORKMARKETINGMETHODS,ITUSESWORDOFMOUTHCOMMUNICATIONPRINCIPLE,USERSTRANSMITINFORMATIONSPONTANEOUSLYTHISKINDOFINFORMATIONTRANSFERMODEJUSTLIKETHEVIRUSREPLICATION,ITTRANSMITTOTHOUSANDSANDMILLIONSOFAUDIENCESFAST,WITHLOWCOSTANDHIGHEFFICIENCYBECAUSEOFWEB20,VIRALMARKETINGBECOMESMOREANDMOREVALUEDATNUMEROUSBUSINESSMANMARKETINGMETHODSALTHOUGHSINCE2005,WEB20BECOMESONEOFTHEHOTTOPICINTHEINTERNETRESEARCHHOWEVER,FEWPEOPLEWILLCOMBINEWEB20ANDVIRALMARKETINGTORESEARCH,EVENNOMORESYSTEMATICRESEARCHEVENINPRACTICEVIRALMARKETINGHASPRESENTEDA“THRIVEINWEB20STATE“,BUTTHEYARENOTTHEORETICALLYMENTIONEDANDSUMMARIZEDTHISARTICLEBASEDONPROFESSIONALCOMMUNICATION,INVOLVESWEB20ANDVIRALMARKETINGARTICLESANDNUMEROUSCASESTUDYING,ANDAPPLYCOMMUNICATIONTHEORYTOINTERPRETVIRALMARKETINGINWEB20ERAITUSESTHECLASSICALCASESANALYSISINTHETHEORETICALSTUDY,INCLUDINGTHELATESTCASEOFTHE2008OLYMPICSVIRUSCOMMUNICATION,ANDAPPLIESTHEVIRALMARKETINGCOMMUNICATIONSKILLSINWEB20INEACHANGLEHOPETHATITCANGIVEMORETHEORETICALGUIDANCEFORVIRALMARKETINGCOMMUNICATIONSINTHEPRACTICALWORLD,ANDDEVOTEMYOWNSTRENGTHINTHISASPECTOFTHEORETICALRESEARCHKEYWORDSWEB20VIRALMARKETINGCOMMUNICATION

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多partⅰ.人巨細(xì)胞病毒重組蛋白的表達(dá)純化和免疫學(xué)性質(zhì)研究partⅱ.風(fēng)疹病毒igg抗體檢測(cè)方法的研究精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩士學(xué)位論文1重組腺病毒載體乙肝疫苗的免疫學(xué)研究2人巨細(xì)胞病毒PP150蛋白基因的原核表達(dá)姓名李妍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)病原微生物學(xué)指導(dǎo)教師孟紅20040401學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學(xué)位論文系在導(dǎo)師指導(dǎo)下本人獨(dú)立完成的研究成果。文中引用他人的成果，均已做出明確標(biāo)注或得到許可。論文內(nèi)容未包含法律意義上已屬于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其他學(xué)位申請(qǐng)的論文或成果。學(xué)位論文知識(shí)產(chǎn)權(quán)權(quán)屬聲明本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下所完成的論文及相關(guān)的職務(wù)作品，知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院。山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院享有以任何方式發(fā)表、復(fù)制、公開閱覽、借閱以及申請(qǐng)專利等權(quán)利。本人離校后發(fā)表或使用學(xué)位論文或與該論文直接相關(guān)的學(xué)術(shù)論文或成果時(shí)，署名單位仍然為山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院。論文作者簽名盔逝導(dǎo)師簽名玉蘭日期Ⅻ生年直月3生一日

簡(jiǎn)介：分類號(hào)分類號(hào)學(xué)號(hào)學(xué)號(hào)D200778043D200778043D200778043D200778043學(xué)校代碼學(xué)校代碼10487104871048710487密級(jí)密級(jí)博士學(xué)位論文博士學(xué)位論文表達(dá)顆粒溶素的重組腺病毒基因治療結(jié)核病小表達(dá)顆粒溶素的重組腺病毒基因治療結(jié)核病小鼠模型鼠模型內(nèi)皮內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞特異性分子特異性分子2222（ECSM2ECSM2ECSM2ECSM2）的細(xì)胞定位的細(xì)胞定位及功能學(xué)研究及功能學(xué)研究學(xué)位申請(qǐng)學(xué)位申請(qǐng)人盧佳盧佳學(xué)科專業(yè)學(xué)科專業(yè)病原生物學(xué)病原生物學(xué)指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師黃漢菊黃漢菊教授教授范雄林范雄林教授教授黃瑤黃瑤博士博士答辯日期答辯日期2012012012012222年5555月√獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除文中已標(biāo)明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果。對(duì)本文的研究做出貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名日期年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)華中科技大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□，在______年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密□（請(qǐng)?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“√”）學(xué)位論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名日期年月日日期年月日

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多1.丙型肝炎病毒核心蛋白通過(guò)自誘導(dǎo)方式可溶性表達(dá)及其生物學(xué)功能鑒定2.深度測(cè)序分析hbv感染中多基因型混合感染精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：分類號(hào)R733密級(jí)非密。學(xué)校代碼學(xué)號(hào)1006220041087天滓醬斜太垮節(jié)LANJL掛豫EOLEALUKLVERSLTY博士學(xué)位論文DOCTORALDISSERTATION實(shí)驗(yàn)部分SURVIVINRNAI重組慢病毒的構(gòu)建CONSTRUCTIONOFLENFIVIRALVECTOROFRNAINTERFERENCEOFSURVIVINGENE臨床部分鼻咽癌調(diào)強(qiáng)放療的劑量學(xué)研究DOSIMETRICSTUDYOFINTENSITYMODULATEDRADITIONTHERAPYINNASOPHARYNGEALCARCINOMA一級(jí)學(xué)科臨床醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科腫瘤學(xué)論文作者姜海平指導(dǎo)教師于金明天津醫(yī)科大學(xué)研究生院2007年5月入門克隆質(zhì)粒。2．成功構(gòu)建PLENTI．SURVIVINA、PLENTI．SURVIVINB和PLENTISURVIVINC慢病毒表達(dá)載體。3．包裝生產(chǎn)了重組慢病毒LENTISURVIVINA，LENTISURVIVINB，LENTISURVIVINC。重組慢病毒LENTI．SURVIVINA、LENTI．SURVIVINB和LENTISURVIVINC的RNA分子拷貝數(shù)分剮為6．11017『MI，5．6X1017，MF和1．6X1010，MI。結(jié)論成功構(gòu)建了表達(dá)SURVIVINSHRNA的3種重組慢病毒載體。關(guān)鍵詞RNA干擾SURVIVIN；慢病毒載體基因治療臨床部分鼻咽癌調(diào)強(qiáng)放療的劑量學(xué)研究鼻咽癌是頭頸部常見(jiàn)惡性腫瘤，放療是其主要治療手段。調(diào)強(qiáng)放療提高了鼻咽癌的治療效果，減少了正常組織放射性損傷。目的研究鼻咽癌調(diào)強(qiáng)放療計(jì)劃中靶區(qū)和正常組織劑量分布，比較調(diào)強(qiáng)放療和常規(guī)放療計(jì)劃中腮腺劑量的差別。方法在10例鼻咽癌患者的定位CT圖像上制定調(diào)強(qiáng)放療和常規(guī)放療計(jì)劃。計(jì)算靶區(qū)的平均劑量、靶區(qū)覆蓋率V95。、不均勻指數(shù)以及正常組織的劑量分布。比較調(diào)強(qiáng)放療計(jì)劃和常規(guī)放療計(jì)劃中的腮腺劑量。結(jié)果1．PTVINX、PTVLND、PTV2和PTV3的平均劑量分別是66．80士0．93、66．2141．43、59．65士2．84和54．21士3．90。2．PTVLNX、PTVLND、PTV2和PTV3的劑量不均勻指數(shù)分別是1．06士0．02、1．08士0．03、1．16士O．05和1．28士0．08。3．PTVLNX、PT、，1RID、PTV2和PTV3的靶區(qū)覆蓋率V95％均大于99％。4．調(diào)強(qiáng)放療計(jì)劃和常規(guī)放療計(jì)劃中腮腺的劑量分別是32．67士5．71和61．44I3．52T13．27，P3．25X10‘7。結(jié)論調(diào)強(qiáng)放療能夠形成比較理想的劑量分布。與常規(guī)放療相比，調(diào)強(qiáng)放療顯著降低了腮腺受量。關(guān)鍵詞調(diào)強(qiáng)放射治療劑量分布腮腺Ⅱ

簡(jiǎn)介：2007年12月下半月電影文學(xué)88影視傳播摘要“病毒性”營(yíng)銷是與傳統(tǒng)營(yíng)銷截然不同的營(yíng)銷理念和營(yíng)銷方式?！安《拘浴睜I(yíng)銷理念是建立在“以允許為基礎(chǔ)”上的推銷方式?！安《拘浴睜I(yíng)銷廣告作為影響消費(fèi)者態(tài)度和行為的主要來(lái)源之一對(duì)提高組織信息傳播能力和效能起著重要的作用并引起傳播學(xué)、心理學(xué)和營(yíng)銷學(xué)者們的關(guān)注。本文是在傳播學(xué)的基礎(chǔ)上對(duì)“病毒性”營(yíng)銷廣告進(jìn)行一系列的研究與應(yīng)用關(guān)鍵詞傳播學(xué)；病毒性；營(yíng)銷；廣告◆楊君順曹?。兾骺萍即髮W(xué)設(shè)計(jì)學(xué)院，陜西西安710021）一、提出背景1網(wǎng)絡(luò)的發(fā)展促使廣告的傳播方式出現(xiàn)了轉(zhuǎn)變。國(guó)際互聯(lián)網(wǎng)絡(luò)INTERNET是當(dāng)今世界上最為熱門的話題之一。隨著互聯(lián)網(wǎng)的用途由學(xué)術(shù)研究向商業(yè)應(yīng)用的逐步轉(zhuǎn)變，世界各地企業(yè)紛紛上網(wǎng)為消費(fèi)者提供各種類型的信息服務(wù)，并把搶占這一科技制高點(diǎn)視為獲取未來(lái)競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)的重要途徑?！盎ヂ?lián)網(wǎng)正在持續(xù)性地重構(gòu)媒體版圖，更多地廣告費(fèi)投入到了在線廣告?！逼杖A永道的PETERPETRUSKY說(shuō)，“網(wǎng)絡(luò)廣告正在驅(qū)動(dòng)品牌和銷售結(jié)果的雙豐收?！?受眾心理和行為方式的變化。在網(wǎng)絡(luò)世界每時(shí)每刻都在發(fā)生著難以意料的變化。21世紀(jì)“新新人類”的出現(xiàn)，網(wǎng)絡(luò)傳播中受眾各種心理的出現(xiàn)喜歡獵奇的心理、參與的心理、信息尋求的心理、要求被認(rèn)同的心理、渴望交流的心理、代入的心理、逃避的心理等。這些受眾心理和行為方式的轉(zhuǎn)變促使廣告形式也發(fā)生了變化。3“PLAY”的思維。“PLAY”在英語(yǔ)中有“戲劇”和“角色”的意思。在傳播的世界里，沒(méi)有“人”，只有“角色”。傳播在人類社會(huì)中一直是“角色”的工具。在現(xiàn)代社會(huì)中廣告的作用是把人們代入到廣告所扮演的角色中去，實(shí)現(xiàn)人們的角色欲望，進(jìn)而達(dá)到廣告的目的。4由“PUSH”到“PULL”。傳統(tǒng)廣告是通過(guò)強(qiáng)制性的方式把信息強(qiáng)制性地傳播到消費(fèi)者的耳朵中，這就是“PUSH”，也可以稱之為“暴力廣告”。然而現(xiàn)在的消費(fèi)者既是產(chǎn)品消費(fèi)者，也是資訊消費(fèi)者。他們不喜歡廣告，也不喜歡像廣告一樣的文章，除非這些東西對(duì)他們有用，或者讓他們感興趣。這就是“PULL”，也是“誘惑性廣告”，這是一種自發(fā)性的行為?！安《拘浴睜I(yíng)銷廣告與傳統(tǒng)廣告有著截然不同的廣告理念和廣告方式。它以類似病毒的形式深入肌體、繁殖快捷、傳播廣泛和發(fā)展迅速為特征來(lái)借以網(wǎng)上一種全新的營(yíng)銷廣告活動(dòng)。它像病毒一樣在不知不覺(jué)中侵入你的肌體讓你對(duì)它產(chǎn)生好感。這時(shí)你的購(gòu)物潛意識(shí)被激活產(chǎn)生要購(gòu)買這種產(chǎn)品的欲望。隨著這種營(yíng)銷理念誕生，廣告形式也應(yīng)運(yùn)而生。在這么一系列的背景下，本文將對(duì)“病毒性”營(yíng)銷廣告的研究與應(yīng)用進(jìn)行一系列的闡述。二、“病毒性”營(yíng)銷廣告的研究?jī)?nèi)容與應(yīng)用1“病毒性”營(yíng)銷廣告的含義。“病毒性”營(yíng)銷廣告VIRALMARKETING也可稱為病毒式營(yíng)銷是一種常用的網(wǎng)絡(luò)營(yíng)銷方法，常用于進(jìn)行網(wǎng)站推廣、品牌推廣等?！安《拘浴睜I(yíng)銷廣告利用的是用戶口碑傳播的原理，在互聯(lián)網(wǎng)上，這種“口碑傳播”更為方便，可以像病毒一樣迅速蔓延，因此“病毒性”營(yíng)銷廣告病毒式營(yíng)銷成為一種高效的信息傳播方式，而且，由于這種傳播是用戶之間自發(fā)進(jìn)行的，因此幾乎是不需要費(fèi)用的網(wǎng)絡(luò)營(yíng)銷手段。2“病毒性”營(yíng)銷廣告的特點(diǎn)。“病毒性”營(yíng)銷是一靠口碑傳播價(jià)值信息的營(yíng)銷方式，特別在互聯(lián)網(wǎng)營(yíng)銷上有重點(diǎn)應(yīng)用。其一般特點(diǎn)包括免費(fèi)的產(chǎn)品、服務(wù)、利益點(diǎn)可輕松快捷地傳遞給朋友受眾規(guī)?？蔁o(wú)限大利用受眾的關(guān)系渠道作為傳播媒介。3“病毒性”營(yíng)銷廣告的基本要素。（1）創(chuàng)建有感染力的“病源體”，使其成為爆炸性的傳播話題，通過(guò)心靈的溝通感染消費(fèi)者，進(jìn)而不斷蔓延開來(lái)。（2）針對(duì)性的選擇傳播目標(biāo)群體（意見(jiàn)領(lǐng)袖），使其成為“病毒”的最初“感染”者和傳播者。（3）創(chuàng)建“病毒”感染途徑傳遞渠道，在消費(fèi)者日常生活中頻繁出現(xiàn)，潛移默化地影響消費(fèi)者。（4）通過(guò)有效的載體為病毒預(yù)埋管線，利用公眾的積極性參與行為，讓“病毒”很容易從小到大規(guī)模擴(kuò)散?！耙磺袨榱虽N售”是營(yíng)銷的最終目標(biāo)，病毒營(yíng)銷的殺傷力就在于讓消費(fèi)者感染病毒后主動(dòng)對(duì)企業(yè)的產(chǎn)品產(chǎn)生購(gòu)買興趣。4網(wǎng)絡(luò)媒介基礎(chǔ)上的“病毒性”營(yíng)銷廣告雙向傳播模式?！安《拘浴睜I(yíng)銷廣告并非真的以傳播病毒的方式開展?fàn)I銷，而是通過(guò)用戶的口碑宣傳網(wǎng)絡(luò)，信息像病毒一樣傳播和擴(kuò)散，利用快速?gòu)?fù)制的方式傳向數(shù)以千計(jì)、數(shù)以百萬(wàn)計(jì)的受眾。在網(wǎng)絡(luò)媒介發(fā)展的基礎(chǔ)上，作為病毒源的傳播者通過(guò)網(wǎng)絡(luò)媒介來(lái)感染受眾，在受眾被感染的同時(shí)，自己成為傳播者。這樣在網(wǎng)絡(luò)媒介的基礎(chǔ)上，傳播者與受眾互相感染，形成一個(gè)圍繞網(wǎng)絡(luò)的雙向傳播模式。三、“病毒性”營(yíng)銷廣告的研究模型“病毒性”營(yíng)銷廣告研究模型由前因、內(nèi)容、結(jié)果和影響因素四個(gè)方面組成。在強(qiáng)調(diào)“病毒性”傳播結(jié)果的同時(shí)也要注重對(duì)“病毒性”營(yíng)銷廣告的前因和“病毒性”營(yíng)銷廣告的影響因素的研究從而把“病毒性”營(yíng)銷廣告的傳者和接收者都視為“病毒性”營(yíng)銷廣告的研究對(duì)象兼顧“病毒性”營(yíng)銷廣告的正面和負(fù)面效應(yīng)。1“病毒性”營(yíng)銷廣告發(fā)生的前因。發(fā)生在網(wǎng)絡(luò)營(yíng)銷背景下的“病毒性”營(yíng)銷廣告行為有三大前因新奇的方式，免費(fèi)的產(chǎn)品、服務(wù)、利益點(diǎn)，輕松快捷地傳遞。2“病毒性”營(yíng)銷廣告的內(nèi)容層次。“病毒性”營(yíng)銷廣告的層次性主要是從“病毒性”營(yíng)銷廣告的內(nèi)涵出發(fā)的一種分層?！安《拘浴睜I(yíng)銷廣告的內(nèi)涵包括“病毒性”營(yíng)銷廣告活動(dòng)和“病毒性”營(yíng)銷廣告效應(yīng)兩個(gè)層面。從廣告角度出發(fā)傳者的行為更為重要即“病毒性”營(yíng)銷廣告的活動(dòng)本身的研究更重要。本研究模型把“病毒性”營(yíng)銷廣告的內(nèi)涵分為“病毒性”營(yíng)銷廣告活動(dòng)、“病毒性”營(yíng)銷廣告表?yè)P(yáng)效應(yīng)和“病毒性”營(yíng)銷廣告負(fù)面效應(yīng)三個(gè)層次。3“病毒性”營(yíng)銷廣告的影響因素?！安《拘浴睜I(yíng)銷廣告的影響因素主要有病毒的主動(dòng)搜尋，硬件設(shè)施的缺陷，感知風(fēng)險(xiǎn)，傳播者的角色制造，接受者的角色代入。4“病毒性”營(yíng)銷廣告的結(jié)果?！安《拘浴睜I(yíng)銷廣告結(jié)果主要體現(xiàn)在消費(fèi)者購(gòu)買前和購(gòu)買后兩個(gè)階段。處于購(gòu)買前決策階段的消費(fèi)者會(huì)受“病毒性”營(yíng)銷廣告信息的影響從而產(chǎn)生一定的購(gòu)買行為；同樣處于購(gòu)買后評(píng)價(jià)階段的消費(fèi)者也會(huì)受“病毒性”傳播信息的影響并做出正面或負(fù)面的評(píng)價(jià)。四、結(jié)語(yǔ)病毒營(yíng)銷實(shí)質(zhì)就是制造出獨(dú)特的利益點(diǎn)，通過(guò)口碑傳播以迅速達(dá)到極高的知名度。病毒式營(yíng)銷是一種“以默許為基礎(chǔ)”的營(yíng)銷方式，讓所營(yíng)銷的產(chǎn)品如病毒一樣在不知不覺(jué)中侵入人的大腦，讓人對(duì)它產(chǎn)生認(rèn)同甚至是依賴，到這時(shí)，人的購(gòu)物潛意識(shí)已形成，產(chǎn)生要購(gòu)買這種品牌的欲望。但這種購(gòu)物欲望只是一種潛意識(shí)，必須通過(guò)后期營(yíng)銷活動(dòng)來(lái)激活，這也就是傳統(tǒng)營(yíng)銷活動(dòng)中的臨門一腳。實(shí)現(xiàn)從“購(gòu)買潛意識(shí)”到“購(gòu)買行動(dòng)”這一過(guò)程的跳躍。作者簡(jiǎn)介楊君順，（1947），男，福建龍海人，教授、碩士生導(dǎo)師；曹?。?982），男，漢，山東臨沂人，陜西科技大學(xué)設(shè)計(jì)藝術(shù)學(xué)在讀研究生?；趥鞑W(xué)的“病毒性”營(yíng)銷廣告的研究與應(yīng)用探討2007年12月下半月電影文學(xué)88影視傳播摘要“病毒性”營(yíng)銷是與傳統(tǒng)營(yíng)銷截然不同的營(yíng)銷理念和營(yíng)銷方式。“病毒性”營(yíng)銷理念是建立在“以允許為基礎(chǔ)”上的推銷方式?！安《拘浴睜I(yíng)銷廣告作為影響消費(fèi)者態(tài)度和行為的主要來(lái)源之一對(duì)提高組織信息傳播能力和效能起著重要的作用并引起傳播學(xué)、心理學(xué)和營(yíng)銷學(xué)者們的關(guān)注。本文是在傳播學(xué)的基礎(chǔ)上對(duì)“病毒性”營(yíng)銷廣告進(jìn)行一系列的研究與應(yīng)用關(guān)鍵詞傳播學(xué)；病毒性；營(yíng)銷；廣告◆楊君順曹?。兾骺萍即髮W(xué)設(shè)計(jì)學(xué)院，陜西西安710021）一、提出背景1網(wǎng)絡(luò)的發(fā)展促使廣告的傳播方式出現(xiàn)了轉(zhuǎn)變。國(guó)際互聯(lián)網(wǎng)絡(luò)INTERNET是當(dāng)今世界上最為熱門的話題之一。隨著互聯(lián)網(wǎng)的用途由學(xué)術(shù)研究向商業(yè)應(yīng)用的逐步轉(zhuǎn)變，世界各地企業(yè)紛紛上網(wǎng)為消費(fèi)者提供各種類型的信息服務(wù)，并把搶占這一科技制高點(diǎn)視為獲取未來(lái)競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)的重要途徑?！盎ヂ?lián)網(wǎng)正在持續(xù)性地重構(gòu)媒體版圖，更多地廣告費(fèi)投入到了在線廣告?！逼杖A永道的PETERPETRUSKY說(shuō)，“網(wǎng)絡(luò)廣告正在驅(qū)動(dòng)品牌和銷售結(jié)果的雙豐收?！?受眾心理和行為方式的變化。在網(wǎng)絡(luò)世界每時(shí)每刻都在發(fā)生著難以意料的變化。21世紀(jì)“新新人類”的出現(xiàn)，網(wǎng)絡(luò)傳播中受眾各種心理的出現(xiàn)喜歡獵奇的心理、參與的心理、信息尋求的心理、要求被認(rèn)同的心理、渴望交流的心理、代入的心理、逃避的心理等。這些受眾心理和行為方式的轉(zhuǎn)變促使廣告形式也發(fā)生了變化。3“PLAY”的思維?！癙LAY”在英語(yǔ)中有“戲劇”和“角色”的意思。在傳播的世界里，沒(méi)有“人”，只有“角色”。傳播在人類社會(huì)中一直是“角色”的工具。在現(xiàn)代社會(huì)中廣告的作用是把人們代入到廣告所扮演的角色中去，實(shí)現(xiàn)人們的角色欲望，進(jìn)而達(dá)到廣告的目的。4由“PUSH”到“PULL”。傳統(tǒng)廣告是通過(guò)強(qiáng)制性的方式把信息強(qiáng)制性地傳播到消費(fèi)者的耳朵中，這就是“PUSH”，也可以稱之為“暴力廣告”。然而現(xiàn)在的消費(fèi)者既是產(chǎn)品消費(fèi)者，也是資訊消費(fèi)者。他們不喜歡廣告，也不喜歡像廣告一樣的文章，除非這些東西對(duì)他們有用，或者讓他們感興趣。這就是“PULL”，也是“誘惑性廣告”，這是一種自發(fā)性的行為?！安《拘浴睜I(yíng)銷廣告與傳統(tǒng)廣告有著截然不同的廣告理念和廣告方式。它以類似病毒的形式深入肌體、繁殖快捷、傳播廣泛和發(fā)展迅速為特征來(lái)借以網(wǎng)上一種全新的營(yíng)銷廣告活動(dòng)。它像病毒一樣在不知不覺(jué)中侵入你的肌體讓你對(duì)它產(chǎn)生好感。這時(shí)你的購(gòu)物潛意識(shí)被激活產(chǎn)生要購(gòu)買這種產(chǎn)品的欲望。隨著這種營(yíng)銷理念誕生，廣告形式也應(yīng)運(yùn)而生。在這么一系列的背景下，本文將對(duì)“病毒性”營(yíng)銷廣告的研究與應(yīng)用進(jìn)行一系列的闡述。二、“病毒性”營(yíng)銷廣告的研究?jī)?nèi)容與應(yīng)用1“病毒性”營(yíng)銷廣告的含義。“病毒性”營(yíng)銷廣告VIRALMARKETING也可稱為病毒式營(yíng)銷是一種常用的網(wǎng)絡(luò)營(yíng)銷方法，常用于進(jìn)行網(wǎng)站推廣、品牌推廣等?！安《拘浴睜I(yíng)銷廣告利用的是用戶口碑傳播的原理，在互聯(lián)網(wǎng)上，這種“口碑傳播”更為方便，可以像病毒一樣迅速蔓延，因此“病毒性”營(yíng)銷廣告病毒式營(yíng)銷成為一種高效的信息傳播方式，而且，由于這種傳播是用戶之間自發(fā)進(jìn)行的，因此幾乎是不需要費(fèi)用的網(wǎng)絡(luò)營(yíng)銷手段。2“病毒性”營(yíng)銷廣告的特點(diǎn)。“病毒性”營(yíng)銷是一靠口碑傳播價(jià)值信息的營(yíng)銷方式，特別在互聯(lián)網(wǎng)營(yíng)銷上有重點(diǎn)應(yīng)用。其一般特點(diǎn)包括免費(fèi)的產(chǎn)品、服務(wù)、利益點(diǎn)可輕松快捷地傳遞給朋友受眾規(guī)?？蔁o(wú)限大利用受眾的關(guān)系渠道作為傳播媒介。3“病毒性”營(yíng)銷廣告的基本要素。（1）創(chuàng)建有感染力的“病源體”，使其成為爆炸性的傳播話題，通過(guò)心靈的溝通感染消費(fèi)者，進(jìn)而不斷蔓延開來(lái)。（2）針對(duì)性的選擇傳播目標(biāo)群體（意見(jiàn)領(lǐng)袖），使其成為“病毒”的最初“感染”者和傳播者。（3）創(chuàng)建“病毒”感染途徑傳遞渠道，在消費(fèi)者日常生活中頻繁出現(xiàn)，潛移默化地影響消費(fèi)者。（4）通過(guò)有效的載體為病毒預(yù)埋管線，利用公眾的積極性參與行為，讓“病毒”很容易從小到大規(guī)模擴(kuò)散。“一切為了銷售”是營(yíng)銷的最終目標(biāo)，病毒營(yíng)銷的殺傷力就在于讓消費(fèi)者感染病毒后主動(dòng)對(duì)企業(yè)的產(chǎn)品產(chǎn)生購(gòu)買興趣。4網(wǎng)絡(luò)媒介基礎(chǔ)上的“病毒性”營(yíng)銷廣告雙向傳播模式?！安《拘浴睜I(yíng)銷廣告并非真的以傳播病毒的方式開展?fàn)I銷，而是通過(guò)用戶的口碑宣傳網(wǎng)絡(luò)，信息像病毒一樣傳播和擴(kuò)散，利用快速?gòu)?fù)制的方式傳向數(shù)以千計(jì)、數(shù)以百萬(wàn)計(jì)的受眾。在網(wǎng)絡(luò)媒介發(fā)展的基礎(chǔ)上，作為病毒源的傳播者通過(guò)網(wǎng)絡(luò)媒介來(lái)感染受眾，在受眾被感染的同時(shí)，自己成為傳播者。這樣在網(wǎng)絡(luò)媒介的基礎(chǔ)上，傳播者與受眾互相感染，形成一個(gè)圍繞網(wǎng)絡(luò)的雙向傳播模式。三、“病毒性”營(yíng)銷廣告的研究模型“病毒性”營(yíng)銷廣告研究模型由前因、內(nèi)容、結(jié)果和影響因素四個(gè)方面組成。在強(qiáng)調(diào)“病毒性”傳播結(jié)果的同時(shí)也要注重對(duì)“病毒性”營(yíng)銷廣告的前因和“病毒性”營(yíng)銷廣告的影響因素的研究從而把“病毒性”營(yíng)銷廣告的傳者和接收者都視為“病毒性”營(yíng)銷廣告的研究對(duì)象兼顧“病毒性”營(yíng)銷廣告的正面和負(fù)面效應(yīng)。1“病毒性”營(yíng)銷廣告發(fā)生的前因。發(fā)生在網(wǎng)絡(luò)營(yíng)銷背景下的“病毒性”營(yíng)銷廣告行為有三大前因新奇的方式，免費(fèi)的產(chǎn)品、服務(wù)、利益點(diǎn)，輕松快捷地傳遞。2“病毒性”營(yíng)銷廣告的內(nèi)容層次?！安《拘浴睜I(yíng)銷廣告的層次性主要是從“病毒性”營(yíng)銷廣告的內(nèi)涵出發(fā)的一種分層?！安《拘浴睜I(yíng)銷廣告的內(nèi)涵包括“病毒性”營(yíng)銷廣告活動(dòng)和“病毒性”營(yíng)銷廣告效應(yīng)兩個(gè)層面。從廣告角度出發(fā)傳者的行為更為重要即“病毒性”營(yíng)銷廣告的活動(dòng)本身的研究更重要。本研究模型把“病毒性”營(yíng)銷廣告的內(nèi)涵分為“病毒性”營(yíng)銷廣告活動(dòng)、“病毒性”營(yíng)銷廣告表?yè)P(yáng)效應(yīng)和“病毒性”營(yíng)銷廣告負(fù)面效應(yīng)三個(gè)層次。3“病毒性”營(yíng)銷廣告的影響因素?！安《拘浴睜I(yíng)銷廣告的影響因素主要有病毒的主動(dòng)搜尋，硬件設(shè)施的缺陷，感知風(fēng)險(xiǎn)，傳播者的角色制造，接受者的角色代入。4“病毒性”營(yíng)銷廣告的結(jié)果?！安《拘浴睜I(yíng)銷廣告結(jié)果主要體現(xiàn)在消費(fèi)者購(gòu)買前和購(gòu)買后兩個(gè)階段。處于購(gòu)買前決策階段的消費(fèi)者會(huì)受“病毒性”營(yíng)銷廣告信息的影響從而產(chǎn)生一定的購(gòu)買行為；同樣處于購(gòu)買后評(píng)價(jià)階段的消費(fèi)者也會(huì)受“病毒性”傳播信息的影響并做出正面或負(fù)面的評(píng)價(jià)。四、結(jié)語(yǔ)病毒營(yíng)銷實(shí)質(zhì)就是制造出獨(dú)特的利益點(diǎn)，通過(guò)口碑傳播以迅速達(dá)到極高的知名度。病毒式營(yíng)銷是一種“以默許為基礎(chǔ)”的營(yíng)銷方式，讓所營(yíng)銷的產(chǎn)品如病毒一樣在不知不覺(jué)中侵入人的大腦，讓人對(duì)它產(chǎn)生認(rèn)同甚至是依賴，到這時(shí)，人的購(gòu)物潛意識(shí)已形成，產(chǎn)生要購(gòu)買這種品牌的欲望。但這種購(gòu)物欲望只是一種潛意識(shí)，必須通過(guò)后期營(yíng)銷活動(dòng)來(lái)激活，這也就是傳統(tǒng)營(yíng)銷活動(dòng)中的臨門一腳。實(shí)現(xiàn)從“購(gòu)買潛意識(shí)”到“購(gòu)買行動(dòng)”這一過(guò)程的跳躍。作者簡(jiǎn)介楊君順，（1947），男，福建龍海人，教授、碩士生導(dǎo)師；曹健（1982），男，漢，山東臨沂人，陜西科技大學(xué)設(shè)計(jì)藝術(shù)學(xué)在讀研究生。基于傳播學(xué)的“病毒性”營(yíng)銷廣告的研究與應(yīng)用探討

簡(jiǎn)介：腸道感染病毒,經(jīng)腸道感染的病毒,,,,,,,,,,,,,,,,,26,腸道病毒,第,章,小RNA病毒科,1、脊髓灰質(zhì)炎病毒POLIOVIRUS1、2、3三型脊髓灰質(zhì)炎（小兒麻痹癥）2、柯薩奇病毒COXSACKIEVIRUS分A、B兩組A組包括A1～A22、A24型皰疹性咽峽炎等B組包括B1～B6型心肌炎等3、埃可病毒ECHOV1～9、11～27、29～33型無(wú)菌性腦膜炎等4、新型腸道病毒（NEWENTEROVIRUSES）68、69、70、71型手足口并病等,小RNA病毒科,生物學(xué)特性,小球形病毒（24～30NM），無(wú)包膜核酸為SSRNA，有感染性衣殼有VP1VP4四種蛋白，VP1VP3分布在表面，VP4與內(nèi)部RNA結(jié)合在胞漿增殖，破胞釋放,迅速產(chǎn)生CPE抵抗力強(qiáng)，耐酸耐乙醚，但鼻病毒除外,小RNA病毒科,致病特點(diǎn),糞口傳播，隱性感染為主。胃腸道感染，卻引起胃腸道外感染性疾病。一種病毒血清型可引起幾種不同的疾病綜合征，而幾種不同的血清型又可引起同一種疾病（見(jiàn)P253）。,一、脊髓灰質(zhì)炎病毒POLIOMYELITIS,脊髓灰質(zhì)炎，即小兒麻痹癥，是一種多發(fā)生于夏秋季由脊髓灰質(zhì)炎病毒引起的急性消化道傳染病?；颊咴诙嗪拱l(fā)熱、周身疼痛數(shù)日后常會(huì)手足軟綿、不會(huì)動(dòng)彈，稱為“弛緩性麻痹”，嚴(yán)重者病毒可侵入腦神經(jīng)，出現(xiàn)面癱，吞咽和呼吸困難，乃至危機(jī)生命。,1938年，羅斯福簽署文件成立脊髓灰質(zhì)炎研究基金會(huì),在脊髓灰質(zhì)炎患者中，部分病人留有永久的肢體癱瘓后遺癥，是致殘的主要疾病之一。,1954年，SALK研制出疫苗，美國(guó)發(fā)行紀(jì)念郵票,形態(tài),球形，28NM，無(wú)包膜,核衣殼二十面體立體對(duì)稱,基因組單正鏈RNA，長(zhǎng)約74KB,結(jié)構(gòu),基因組和編碼蛋白,5’端共價(jià)結(jié)合一小分子蛋白VPG與病毒RNA合成與基因組裝配有關(guān),3’端帶有POLY（A）尾加強(qiáng)病毒的感染性,,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型,病毒蛋白質(zhì)合成以病毒基因組為模板翻譯前體蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)蛋白酶蛋白VP1VP3VP0VP2VP4,,,,,病毒RNA復(fù)制基因組RNA（）復(fù)制互補(bǔ)RNA（）復(fù)制子病毒RNA（）,,,受體免疫球蛋白超家族的細(xì)胞粘附分子脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元,,不耐熱，56℃30MIN可使之滅活煮沸和紫外線照射可迅速將其殺死對(duì)高錳酸鉀、過(guò)氧化氫、漂白粉等敏感，可將其殺死,抵抗力,耐化學(xué)消毒劑,耐酸、蛋白酶和膽汁,耐乙醚等脂溶劑,耐潮濕和寒冷,強(qiáng),致病性,人是脊灰病毒唯一的自然宿主，且普遍易感,夏秋季高發(fā)，15歲兒童是主要易感者。,脊髓灰質(zhì)炎的致病機(jī)理,脊髓灰質(zhì)炎的臨床表現(xiàn),免疫性,根據(jù)抗原可以分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型抗原性相對(duì)穩(wěn)定型與型之間有廣泛的共同抗原中和試驗(yàn)無(wú)型間無(wú)交叉反應(yīng),同型免疫牢固,免疫性,腸道局部SIGA血液中和性IGG、IGM抗體中和抗體可長(zhǎng)時(shí)間維持（終生）,體液免疫為主,脊灰病毒分離,發(fā)病2周內(nèi)采集的標(biāo)本進(jìn)行病毒分離陽(yáng)性率高約70患兒糞便中帶有病毒12周，少數(shù)患兒帶病毒38周,自潛伏期開始到癱瘓后12周排毒率最高69100,糞便、咽分泌物、腦脊液、腦或脊髓,,,,微生物學(xué)檢查,微生物學(xué)檢查,病毒分離糞便抗生素猴腎細(xì)胞或人胚腎細(xì)胞37℃/710天細(xì)胞病變型別鑒定,微生物學(xué)檢查,正常的VERO細(xì)胞,感染脊灰病毒的VERO細(xì)胞,微生物學(xué)檢查,病毒抗體檢測(cè),不能區(qū)別疫苗株和野毒株,感染1015天內(nèi)應(yīng)用ELISA法，查IGM早期快速特異診斷方法,或恢復(fù)期血清中和抗體或特異性IGG抗體滴度比急性期≥4倍升高,,微生物學(xué)檢查,病毒基因檢測(cè)核酸雜交，PCR等,WHO規(guī)定與疫苗株（SABIN株）相比VP1區(qū)核苷酸變異率≥15的脊灰病毒定義為脊灰野病毒,防治原則,人工主動(dòng)免疫嬰兒（2月齡內(nèi)）,接種三價(jià)疫苗2月齡兒童,滅活疫苗IPV，SALK苗肌注減毒活疫苗OPV，SABIN苗口服三價(jià)口服減毒活疫苗（TOPV）三次連服TOPV（間隔一個(gè)月），抗體陽(yáng)性率可到100，4歲加強(qiáng)。,脊髓灰質(zhì)炎疫苗的種類,2000年7月11日，國(guó)家消滅脊髓灰質(zhì)炎證實(shí)委員會(huì)在衛(wèi)生部舉行“中國(guó)消滅脊髓灰質(zhì)炎證實(shí)報(bào)告簽字儀式”,脊髓灰質(zhì)炎死活苗的比較,疫苗相關(guān)麻痹性脊髓灰質(zhì)炎VDPV發(fā)生,2006年7月，來(lái)自不同省份的數(shù)位家長(zhǎng)帶著肢體異常的孩子到北京兒童醫(yī)院求醫(yī)。家長(zhǎng)驚訝地發(fā)現(xiàn)，他們的孩子有個(gè)共同點(diǎn)出生后均服用了脊髓灰質(zhì)炎疫苗。,新的免疫程序增效疫苗IPVOPV聯(lián)合應(yīng)用,第一、二兩次IPV，第三次用OPV,免疫效果穩(wěn)定良好,脊灰的處理原則,傳染病報(bào)告各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)和人員發(fā)現(xiàn)病例后，城市在12小時(shí)，農(nóng)村在24小時(shí)內(nèi)以最快方式報(bào)告到當(dāng)?shù)剌爡^(qū)疾控機(jī)構(gòu),隔離進(jìn)行消化道隔離，隔離期限40天，糞便進(jìn)行消毒后排放,治療急性期治療支持治療、對(duì)癥治療和治療并發(fā)癥恢復(fù)期治療一旦麻痹不再進(jìn)展，立即康復(fù)治療,脊髓灰質(zhì)炎雖無(wú)特效治療，但可防可控，疫苗可有效預(yù)防,,27,急性胃腸炎病毒,第,章,主要包括輪狀病毒杯狀病毒腸道腺病毒星狀病毒,胃腸炎病毒引起的急性胃腸炎病毒性腹瀉,特點(diǎn)1無(wú)細(xì)菌病原2突發(fā)，恢復(fù)快3相似的中度腹瀉與嘔吐4無(wú)年齡與地域限制,二、輪狀病毒（ROTAVIRUS）,輪狀病毒輪狀病毒（ROTAVIRUS）屬于呼腸病毒科，是人類、哺乳動(dòng)物和鳥類腹瀉的重要病原體。根據(jù)VP6抗原性，分為A～G7組，A～C組引起人類、動(dòng)物腹瀉，D～G組引起動(dòng)物腹瀉，A組是引起嬰幼兒腹瀉的主要病原體。,形態(tài)1、大小不等的圓球形2、雙層衣殼，每層衣殼呈20面體對(duì)稱3、殼粒呈放射狀排列，形同車輪輻條,病毒內(nèi)衣殼,病毒外衣殼,電鏡下，病毒酷似“車輪狀”,病毒核心為DSRNA，由11個(gè)不連續(xù)的節(jié)段組成，分別編碼6個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白和6個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白。,基因組及其編碼的蛋白質(zhì),VP1VP3位于核心，分別為病毒RNA多聚酶，轉(zhuǎn)錄酶和與帽形成有關(guān)的蛋白VP6位于內(nèi)衣殼，有組和亞組特異性抗原VP7（表面糖蛋白）和VP4（血凝素）位于外衣殼，確定血清型，是中和抗原，與病毒吸附有關(guān)非結(jié)構(gòu)蛋白（NSP1NSP5）為病毒酶或調(diào)節(jié)蛋白，在病毒復(fù)制和毒力產(chǎn)生中起主要作用。如NSP4有腸毒素樣的作用，與致病有關(guān),VP5VP8，增強(qiáng)病毒的感染,,QUESTION,,QUESTION,復(fù)制,腸道蛋白酶,躲在殼里的秘密復(fù)制,分型與分組,VP6抗原性AG七個(gè)組,VP6蛋白差異A組內(nèi)分4個(gè)亞組,A組引起嬰幼兒急性胃腸炎B組主要引起成人腹瀉C組主要感染豬，但近年來(lái)也在人群檢出該病毒D～G組僅引起動(dòng)物腹瀉,G和P雙命名系統(tǒng)可用于確定毒株類型，占人類輪狀病毒感染90左右的5種GP組合血清型G1P8、G2P4、G3P8、G4P8和G9P8，其中以G1P8最常見(jiàn)。,VP7抗原性A組分為14個(gè)G血清型,VP4抗原性A組分為19個(gè)P血清型,抵抗力,耐酸、耐堿、耐乙醚、耐反復(fù)凍融,,強(qiáng),55℃，30MIN滅活,室溫中傳染性可保持7個(gè)月,致病性,傳染源病人和無(wú)癥狀帶毒者傳播途徑主要通過(guò)糞口途徑傳播，也可通過(guò)呼吸道傳播多發(fā)于深秋初冬季節(jié)，在我國(guó)常稱為秋季腹瀉,感染最為常見(jiàn)；引起6個(gè)月～2歲嬰幼兒嚴(yán)重胃腸炎，常稱為秋季腹瀉。,致病機(jī)理,臨床表現(xiàn)突然發(fā)病發(fā)熱、水樣腹瀉、伴嘔吐一般為自限性重者脫水和酸中毒，導(dǎo)致死亡,免疫性,型特異性抗體（IGM、IGG、SIGA）腸道SIGA最為重要,微生物檢查,檢測(cè)病毒或病毒抗原患者糞便中有大量病毒顆粒，且形態(tài)結(jié)構(gòu)特殊，用電鏡或免疫電鏡法檢查。2ELISA直接法或間接法檢查病毒抗原。3核酸雜交法、PCR法檢測(cè)病毒核酸。,4聚丙烯酰胺凝膠電泳法根據(jù)A、B、C三組輪狀病毒11個(gè)基因片段的特殊分布圖形進(jìn)行分析判斷，在臨床病因診斷和流行病學(xué)調(diào)查中有重要意義。,防治原則,對(duì)癥治療為主，注意補(bǔ)液，糾正電解質(zhì)平衡,,預(yù)防,控制傳染源切斷傳播途徑注意飲食消毒衛(wèi)生減毒活疫苗,課堂小結(jié),1、經(jīng)腸道感染病毒的種類及疾病。2、脊髓灰質(zhì)炎病毒的生物學(xué)特征。3、脊髓灰質(zhì)炎的有效預(yù)防。4、輪狀病毒的結(jié)構(gòu)特征。5、輪狀病毒的致病性。,復(fù)習(xí)思考題,1、簡(jiǎn)述脊髓灰質(zhì)炎病毒的生物學(xué)特征和致病性。2、如何有效的預(yù)防脊髓灰質(zhì)炎。3、簡(jiǎn)述輪狀病毒的結(jié)構(gòu)特征。4、如何理解輪狀病毒的生命活動(dòng)與其致病性。,

簡(jiǎn)介：病毒性心肌炎,廣州中醫(yī)藥大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院王云飛,,目的要求【掌握】本病的診斷及鑒別診斷【熟悉】本病的中醫(yī)病因病機(jī)和治療及本病的西醫(yī)病因和病理【了解】本病的防治原則,概述,病毒性心肌炎（VIRALMYOCARDITIS）是指病毒感染過(guò)程中引起的以心肌非特異性炎癥為主要改變的心肌疾病，常常為各種病毒全身性感染的一部分表現(xiàn)，是常見(jiàn)的心肌炎之一,,病毒感染的人群中5的病人發(fā)生心肌炎潛伏期1～4周可見(jiàn)于各年齡組，小兒尤易罹患成人發(fā)病年齡以20～30歲居多男性較女性多見(jiàn)夏、秋兩季多見(jiàn),病因病理,病因腸道病毒和呼吸道病毒感染柯薩奇B組病毒（50）柯薩奇A組病毒（23）?？刹《?、流感病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒此外風(fēng)疹、腮腺炎、水痘、天花、皰疹副流感、肝炎、帶狀皰疹、艾滋病等病毒,,柯薩奇病毒心肌病模型一般認(rèn)為該病過(guò)程有兩個(gè)階段第1階段為病毒復(fù)制期該階段是病毒經(jīng)血液直接侵犯心臟，損害心肌，使心肌細(xì)胞溶解破壞急性暴發(fā)性心肌炎在病毒感染1～2周內(nèi)猝死者,,第2階段為免疫變態(tài)反應(yīng)期大多數(shù)病毒性心肌炎慢性期病毒性心肌炎患者病毒在該時(shí)期內(nèi)可能已不存在，但心肌仍持續(xù)受損免疫變態(tài)反應(yīng)主要是T細(xì)胞免疫損傷,,局限性的心肌炎癥心律失常，如早搏、房室傳導(dǎo)阻滯重癥彌漫性的心肌炎急性心力衰竭，心臟顯著擴(kuò)大，心源性休克，乃至突然死亡,較少見(jiàn),,中醫(yī)病因病機(jī)病因1稟賦不足、正氣虛弱正虛2感受外邪，內(nèi)舍于心邪實(shí),,病機(jī)1先天稟賦不足，或后天失養(yǎng)，或久病體虛不能抵御外邪，溫?zé)岫拘坝杀茄驶蛐l(wèi)表而入，肺衛(wèi)不宣惡寒發(fā)熱、頭痛身疼、咽痛咳嗽2熱毒不解逆?zhèn)餍陌貝?、心?熱毒犯心，損傷心氣，燒灼心陰而致心氣虛弱、心陰不足心悸氣短、頭暈乏力、脈律不整4病久不愈，陰損及陽(yáng)，陰陽(yáng)兩虛尿少水腫、心悸喘促等癥,,病位心與肺、脾、腎有關(guān)發(fā)病正氣不足，邪毒侵心病性本虛標(biāo)實(shí)，虛實(shí)夾雜1正虛為本2熱毒、濕毒、痰濁、瘀血為標(biāo),臨床表現(xiàn),臨床分為急性、亞急性、慢性發(fā)病3個(gè)月以內(nèi)稱為急性病毒性心肌炎3～6個(gè)月為亞急性病毒性心肌炎半年以上為慢性病毒性心肌炎,,癥狀1原發(fā)病癥狀發(fā)病前有發(fā)熱、全身酸痛、咽痛、腹瀉等癥狀，反映全身性病毒感染有部分患者原發(fā)病癥狀輕而不顯著，需仔細(xì)追問(wèn)方被注意到2心肌炎癥狀胸悶、心前區(qū)隱痛、心悸、乏力、惡心、頭暈,體征,1輕者心臟不擴(kuò)大心臟擴(kuò)大顯著反映心肌炎廣泛而嚴(yán)重2心率心律心率增速與體溫不相稱心率異常緩慢心律失常極常見(jiàn)3心音心尖區(qū)第一心音可減低或分裂，可呈胎心音樣,,常見(jiàn)并發(fā)癥（一）心律失常（CARDIACARRHYTHMIA）早搏50房性與室性早搏房室傳導(dǎo)阻滯（AVB）心房顫動(dòng)、病態(tài)竇房結(jié)綜合征猝死的原因之一,,4心包摩擦音心包炎5心臟雜音雜音響度不超過(guò)三級(jí)，心肌炎好轉(zhuǎn)后即消失心尖區(qū)收縮期吹風(fēng)樣雜音發(fā)熱、貧血、心腔擴(kuò)大心尖區(qū)舒張期雜音左室擴(kuò)大造成的相對(duì)性二尖瓣狹窄6心力衰竭體征重癥彌漫性心肌炎,,（二）心力衰竭（CARDIACFAILURE）慢性充血性心力衰竭部分慢性期患者，心臟進(jìn)行性擴(kuò)大，心功能減退急性左心衰竭急性肺水腫少數(shù)重癥患者在急性期，可突然出現(xiàn)，救治不及時(shí)可致死亡,,（三）心源性休克（CARDIOGENICSHOCK）心臟泵功能衰竭心源性休克重癥患者使心排血量急驟降低，而導(dǎo)致全身臟器組織血流灌注不足，周圍循環(huán)衰竭，救治不及時(shí)可迅速致死,輔助檢查,一、血液檢查1血沉增快急性期2血清轉(zhuǎn)氨酶、肌酸磷酸激酶增高心肌壞死3抗核抗體、抗心肌抗體陽(yáng)性免疫功能異常4自然殺傷細(xì)胞的活力Α干擾素降低Γ干擾素升高免疫功能失控,,心電圖檢查心電圖改變敏感性高，特異性低1心律失常1早搏66室性早搏，房性、室性、房室交界性早搏2心臟傳導(dǎo)阻滯多數(shù)經(jīng)13周后消失，少數(shù)可長(zhǎng)期存在一度AVB束支傳導(dǎo)阻滯表明病變廣泛2ST-–T改變30,,三、X線檢查1無(wú)異常變化局灶性心肌炎2心影擴(kuò)大，心搏減弱彌漫性心肌炎合并心包炎3肺淤血或肺水腫征象左心功能不全的嚴(yán)重病例,,四、超聲心動(dòng)圖檢查改變無(wú)特異性取決于病毒累及心室損傷的程度和范圍1左室收縮或舒張功能異常2節(jié)段性及區(qū)域性室壁運(yùn)動(dòng)異常3室壁厚度增加4心肌回聲反射增強(qiáng)和不均勻5右室擴(kuò)張及運(yùn)動(dòng)異常6心臟擴(kuò)大、心室壁運(yùn)動(dòng)減弱,,五、同位素心肌顯像鎵和111銦單克隆抗肌凝蛋白抗體顯像敏感性高100特異性低50,,七、心內(nèi)膜心肌活檢1確診金標(biāo)準(zhǔn)2癥狀發(fā)生的前幾周內(nèi)行心肌活檢陽(yáng)性率較高3適應(yīng)證ACC/AHA在心衰治療指南上把心內(nèi)膜活檢作為IIB類適應(yīng)證1病人發(fā)生迅速的進(jìn)行性心肌病2對(duì)常規(guī)的治療無(wú)效或不能解釋的伴有進(jìn)行性地傳導(dǎo)系統(tǒng)病變3危及生命的室性心律失常的心肌病,診斷,參照1999年全國(guó)心肌炎心肌病專題座談會(huì)提出的成人急性病毒性心肌炎診斷參考標(biāo)準(zhǔn)（一）病史與體征在上呼吸道感染、腹瀉等病毒感染后3周內(nèi)出現(xiàn)心臟表現(xiàn)重度乏力、胸悶、頭昏心尖第一心音明顯減弱、舒張期奔馬律、心包摩擦音心臟擴(kuò)大充血性心力衰竭或阿斯綜合征,,（二）感染后3周內(nèi)出現(xiàn)下列心律失常或心電圖改變1竇性心動(dòng)過(guò)速、房室傳導(dǎo)阻滯、竇房阻滯、束支傳導(dǎo)阻滯2多源、成對(duì)室性早搏、自主性房性或交界性心動(dòng)過(guò)速、陣發(fā)或非陣發(fā)性室性心動(dòng)過(guò)速、心房或心室撲動(dòng)或顫動(dòng)32個(gè)以上導(dǎo)聯(lián)ST段呈水平或下斜型下移≥001MV，或ST段抬高或出現(xiàn)異常Q波,,（三）心肌損害的參考指標(biāo)1血清心肌肌鈣蛋白I或T、CKMB明顯增高2超聲心動(dòng)圖示心腔擴(kuò)大或室壁活動(dòng)異常3核素心功能檢查證實(shí)左室收縮或舒張功能減弱。,,（四）病原學(xué)依據(jù)1在急性期從心內(nèi)膜、心肌、心包或心包穿刺液檢測(cè)出病毒、病毒基因片段或病毒蛋白抗原,,2病毒抗體1（如柯薩奇B組病毒中和抗體或流行性感冒病毒血凝抑制抗體等）（2份血清應(yīng)相隔2周以上）第2份血清中同型病毒抗體滴度較第1份血清升高4倍2一次抗體效價(jià)≥640者為陽(yáng)性，320者為可疑陽(yáng)性（如以1∶32為基礎(chǔ)者，則宜以≥256為陽(yáng)性，128為可疑陽(yáng)性）,,3病毒特異性IGM≥1∶320者為陽(yáng)性如同時(shí)有血中腸道病毒核酸陽(yáng)性者更支持有近期病毒感染,,鑒別診斷（一）鏈球菌感染后綜合征扁桃體心臟綜合征（POSTSTREPTOCOCCALINFECTIONSYNDROME）1相同青少年患者有慢性扁桃體炎或咽峽炎等鏈球菌反復(fù)感染鏈球菌毒素引起機(jī)體變態(tài)反應(yīng)關(guān)節(jié)炎、心悸、氣短心電圖ST–T變化，Ⅰ度房室傳導(dǎo)阻滯2不同本病預(yù)后良好癥狀可時(shí)輕時(shí)重青霉素治療或摘除扁桃體后可治愈,,（二）風(fēng)濕性心肌炎（RHEUMATICMYOCARDITIS）1相同抗溶血性鏈球菌溶血素“O”增高血沉增快心肌酶增高心電圖改變2不同大關(guān)節(jié)炎、皮下小結(jié)節(jié)、環(huán)形紅斑心臟雜音病毒學(xué)檢查陰性抗風(fēng)濕治療有效,,（三）原發(fā)性心肌病起病慢無(wú)前驅(qū)感染史無(wú)病毒感染證據(jù)活檢以心肌肥大或心肌變性壞死為主超聲心動(dòng)圖示心室腔明顯擴(kuò)大等可資鑒別但與心肌炎晚期則鑒別較難,,（四）冠心?。–ORONARYHEARTDISEASE）1相同心前區(qū)疼痛及ST–T改變2不同冠心病年齡多較大常伴有冠心病易患因素心前區(qū)悶痛持續(xù)時(shí)間短，硝酸甘油可緩解。短期內(nèi)出現(xiàn)心律失常且演變不迅速如Ⅰ度房室傳導(dǎo)阻滯很快演變成Ⅱ度、Ⅲ度房室傳導(dǎo)阻滯，則要多考慮心肌炎冠狀動(dòng)脈造影可鑒別,,五Β受體亢進(jìn)綜合征（HYPERΒRECEPTERSYNDROME）1相同年輕患者多見(jiàn)心電圖ST–T改變及竇性心動(dòng)過(guò)速2不同常有一定的精神因素主訴多變普萘洛爾心得安試驗(yàn)可在用藥后片刻內(nèi)使ST–T改變恢復(fù)正常,治療,目標(biāo)1控制病毒感染2調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能3消除心肌炎癥4防治心律失常5糾正心功能不全6減少心肌炎后遺癥7降低擴(kuò)張性心肌病的發(fā)生率8提高生存質(zhì)量，減少病死率,,一、中醫(yī)治療中醫(yī)治療原則扶正祛邪六種基本證型進(jìn)行辨證治療熱毒侵心、濕毒犯心、陰虛內(nèi)熱氣陰兩虛、陰陽(yáng)兩虛、陽(yáng)虛欲脫,,（一）辨證論治1熱毒侵心（ATTACKOFTHEHEARTBYNOXIOUSHEAT）證候惡寒發(fā)熱，頭痛身痛，心悸胸痛，氣短乏力，咽痛咳嗽，口干口苦，小便黃赤舌質(zhì)紅，舌苔黃，脈浮數(shù)或促結(jié)代治法清熱解毒，養(yǎng)心復(fù)脈方藥銀翹散合清營(yíng)湯加減,,2濕毒犯心（AFFECTIONOFTHEHEARTBYNOXIOUSDAMPNESS）證候惡寒發(fā)熱，腹痛腹瀉，腹脹納呆惡心嘔吐，困倦乏力，心悸胸悶舌苔黃膩，脈濡滑數(shù)或促或結(jié)代治法清熱化濕，寧心復(fù)脈方藥香蓮?fù)瑁┖细事断镜ぜ訙p,,3陰虛內(nèi)熱（ENDOGENOUSHEATDUETODEFICIENCYOFYIN）證候心悸不寧，心煩不安，失眠多夢(mèng)口干咽燥，手足心熱，潮熱盜汗或低熱不退，小便短少，大便秘結(jié)舌紅少津，脈細(xì)數(shù)或促、結(jié)代治法滋陰清熱，益心復(fù)脈方藥天王補(bǔ)心丹加減,,4氣陰兩虛（DEFICIENCYOFBOTHQIANDYIN）證候心悸怔忡，氣短乏力，自汗盜汗舌紅苔白，脈虛數(shù)或促、澀、結(jié)代治法補(bǔ)氣養(yǎng)陰，益心復(fù)脈方藥生脈散合五味子散加減,,5陰陽(yáng)兩虛（DEFICIENCYOFBOTHYINANDYANG）證候心悸氣短，動(dòng)則喘憋，甚或倚息不得臥胸悶痛，畏寒肢冷，乏力，自汗不止水腫，面色晦暗或發(fā)紺舌暗淡苔白，脈虛數(shù)或促、結(jié)代治法溫陽(yáng)益氣，養(yǎng)陰通脈方藥炙甘草湯加減,,6陽(yáng)虛欲脫（EXHAUSTIONOFYANG）證候起病急驟，心悸氣短，不能平臥煩躁不安，自汗不止，四肢厥冷舌淡苔白，脈微欲絕治法回陽(yáng)固脫方藥參附龍牡湯加減,,二、西醫(yī)治療（一）一般療法1急性期患者應(yīng)充分休息臥床休息602飲食以富有營(yíng)養(yǎng)、容易消化為原則3居住環(huán)境的空氣應(yīng)保持流通、新鮮4及時(shí)退熱、止痛、解除焦慮等對(duì)癥處理，以減輕心臟負(fù)荷5有嚴(yán)重心律失常者,應(yīng)進(jìn)行連續(xù)心電監(jiān)護(hù)，防止因嚴(yán)重心律失常而猝死6必要時(shí)吸氧,,（二）保護(hù)心肌療法心肌炎時(shí)，自由基產(chǎn)生增多，而超氧化物歧化酶活性下降，自由基加重心肌細(xì)胞損傷1臨床可使用大劑量的維生素C加入5葡萄糖注射液中靜脈滴注2輔酶A、肌苷肌內(nèi)注射或靜脈注射3三磷腺苷（ATP）或三磷酸胞苷（CTP）肌內(nèi)注射；4輔酶Q10口服，肌內(nèi)注射或靜脈注射,,（三）免疫抑制劑治療1感染早期最好不要用激素，以免抑制干擾素合成而加速病毒繁殖，加重心肌損害,,2在重癥心肌炎早期使用激素治療1強(qiáng)的松每日30～40MG地塞米松1日5～10MG，分3～4次口服2周后逐漸減量2先用醋酸地塞米松10～20MG或醋酸氫化可的松100～300MG/日分次靜脈滴注，連用3～7天，待病情穩(wěn)定后改口服，并迅速減量至停用3同時(shí)應(yīng)注意停用激素后病情復(fù)發(fā)，后期應(yīng)用硫唑嘌呤100MG/日，分次口服,3抗病毒治療1急性期有人主張應(yīng)用抗病毒藥物常使用阻止病毒進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的金剛烷胺，抑制病毒硫酸復(fù)制的阿糖胞苷、嗎啉呱、干擾素，抑制病毒蛋白合成的縮氨酸脲、異喹啉等其中干擾素還有明顯的調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫的功能，許多研究均提示其作為免疫調(diào)節(jié)劑對(duì)病毒性心肌炎有防治作用,5、抗生素的應(yīng)用病毒性心肌炎常合并鏈球菌感染此時(shí)可給以常規(guī)劑量的青霉素1周,6心力衰竭時(shí)可常規(guī)使用利尿劑及血管擴(kuò)張劑，因心肌本身有壞死應(yīng)慎用洋地黃類藥物7心律失常則用抗心律失常藥物或電除顫治療如系偶發(fā)早搏，可先觀察而不一定給予抗心律失常藥物如為完全房室傳導(dǎo)阻滯時(shí)，應(yīng)使用臨時(shí)體外起搏器，因?yàn)楸静“l(fā)生完全房室傳導(dǎo)阻滯，可在短期內(nèi)恢復(fù),預(yù)防與調(diào)護(hù),一、預(yù)防平時(shí)注意加強(qiáng)體育鍛煉，提高抗病能力。積極預(yù)防感冒，注意飲食衛(wèi)生，遇有感冒及腹瀉要及早治療?；疾∑陂g避免劇烈運(yùn)動(dòng)及重體力勞動(dòng)，急性期應(yīng)充分休息，一般要完全恢復(fù)正常至少半年以上，有心力衰竭時(shí)則時(shí)間宜長(zhǎng)。二、調(diào)理（－）生活調(diào)理（二）飲食調(diào)理（三）精神調(diào)理,思考題,1、簡(jiǎn)述心肌疾病的分類2、簡(jiǎn)述擴(kuò)張型心肌病的臨床特點(diǎn)，如何與缺血性心肌病鑒別3、肥厚型心肌病的超聲心動(dòng)圖有何特點(diǎn)4、擴(kuò)張型心肌病和肥厚型心肌病的治療有何不同5、病毒性心肌炎的中西醫(yī)治療思路如何,,,謝謝,

簡(jiǎn)介：,,什么是禽流感禽流感為何感染人何為H7N9H5N1H7N9為何致死率高,2013年3月安徽、上海等地出現(xiàn)人感染H7N9禽流感疫情。截至2013年4月22日20時(shí)全國(guó)已確診104人，21人死亡，13人痊愈,如何防治H7N9H7N9從哪里來(lái)H7N9會(huì)否人際傳播,,,需掌握的內(nèi)容,病毒與細(xì)菌的區(qū)別病毒的定義、分類病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)病毒的感染與復(fù)制病毒致病機(jī)制病毒的檢測(cè)病毒的預(yù)防與治療,病毒的概念,病毒是一類比細(xì)菌更低等，體積更小、結(jié)構(gòu)更簡(jiǎn)單的，超級(jí)寄生的，具感染性的非細(xì)胞型微生物。它能侵犯植物、動(dòng)物和細(xì)菌、真菌等微生物。,病毒與人類的關(guān)系,所致疾病占感染性疾病的75傳播力強(qiáng)病死率高與致畸、腫瘤和某些免疫性疾病有關(guān)其它（分子生物學(xué)、遺傳學(xué)意義，經(jīng)濟(jì)領(lǐng)域關(guān)系）,病毒的特點(diǎn),體積小，能通過(guò)細(xì)菌濾器無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，只含有一種核酸嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生，以復(fù)制方式繁殖有機(jī)體水平和細(xì)胞水平兩種致病方式耐冷不耐熱，對(duì)抗生素不敏感,病毒的形態(tài),球狀體（皰疹病毒、腺病毒）絲狀體（煙草花葉病毒、流感病毒）磚形體（天花病毒）彈狀體（水泡性口炎病毒、狂犬病毒）蝌蚪狀體（噬菌體）,球狀,腺病毒,SARSCOV,絲狀,新分離的流感病毒,煙草花葉病毒,磚形,痘病毒,子彈形,狂犬病毒,蝌蚪狀,噬菌體,病毒的大小,測(cè)量單位為NM（NANOMETER）,,,,,,,,,,,,,,,葡萄球菌1000NM）,,,,,,,,,牛痘病毒300250NM,A,B,C,D,E,F,G,立克次體450NM,,,衣原體390NM,A、大腸桿菌噬菌體6595NM,B、腺病毒70NM,C、脊髓灰質(zhì)炎病毒30NM,D、乙腦病毒40NM,E、蛋白分子10NM,F、流感病毒100NM,G、煙草花葉病毒200NM,病毒體的大小,病毒體,病毒體VIRION成熟的、具有感染性的病毒個(gè)體。,SARSCOV,病毒的結(jié)構(gòu)與功能,基本結(jié)構(gòu)基因組蛋白衣殼特殊結(jié)構(gòu)包膜觸須,,,,,,基因組GENOME,遺傳物質(zhì)，DNAORRNA病毒遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)，編碼蛋白，控制病毒性狀，決定病毒復(fù)制及增殖。,SARSCOV基因組（單股正鏈RNA）,圖片來(lái)源MARRA,MA,ETALTHEGENOMICSEQUENCEOFTHESARSASSOCIATEDCORONAVIRUSSCIENCE2003MAY3030013991404,HIV1基因組（單正鏈RNA）HBV基因組（不完全雙鏈環(huán)狀DNA）,,蛋白衣殼CAPSID,包裹或鑲嵌在病毒核酸外面，由病毒基因組編碼的蛋白質(zhì)。保護(hù)核酸免受外界環(huán)境因素影響，同時(shí)有其特定的病毒生物學(xué)特性。如細(xì)胞親嗜性，致病性，抗原性，毒性等。,病毒衣殼的對(duì)稱性,病毒衣殼的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，就是其排列的對(duì)稱性。立體對(duì)稱螺旋對(duì)稱復(fù)合對(duì)稱,立體對(duì)稱,二十面體,五鄰體,六鄰體,,,螺旋對(duì)稱,復(fù)合對(duì)稱,,包膜ENVELOP,包裹在病毒核殼外的膜狀結(jié)構(gòu)，由脂質(zhì)和糖蛋白組成。脂質(zhì)細(xì)胞親嗜性，決定病毒的特定侵害部位。糖蛋白吸附，結(jié)合細(xì)胞受體，介導(dǎo)細(xì)胞融合，特殊功能，如流感病毒的HA，NA。,有包膜病毒,CALIFORNIAENCEPHALITISVIRUSCORONAVIRUSCYTOMEGALOVIRUSCMVEASTERNEQUINEENCEPHALITISVIRUSEEEVEPSTEINBARRVIRUSEBVHANTAVIRUSHEPATITISBVIRUSHBVHEPATITISCVIRUSHCVHEPATITISDELTAVIRUSHDVHERPESSIMPLEXVIRUS1HHV1ROTAVIRUSRUBELLAVIRUSSAINTLOUISENCEPHALITISVIRUSSMALLPOXVIRUSVARIOLAVACCINIAVIRUS,HERPESSIMPLEXVIRUS2HHV2HUMANIMMUNODEFICIENCYVIRUSHIVHUMANTLYMPHOTROPHICVIRUSHTLVINFLUENZAVIRUSFLUVIRUSMOLLUSCUMCONTAGIOSUMPAPILLOMAVIRUSHPVPOLIOVIRUSRHINOVIRUSVARICELLAZOSTERVIRUSHHV3VENEZUELANEQUINEENCEPHALVIRVEEVWESTERNEQUINEENCEPHALITISVIRUSWEEVYELLOWFEVERVIRUS,無(wú)包膜病毒,ADENOASSOCIATEDVIRUSAAVADENOVIRUSPARVOVIRUSB19COXSACKIEVIRUS–ACOXSACKIEVIRUS–BECHOVIRUSHEPATITISAVIRUSHAVHEPATITISEVIRUSHEVNORWALKVIRUS,,觸須ANTENNA,,腺病毒的觸須可凝聚和毒害宿主細(xì)胞。,病毒的化學(xué)組成,核酸DNA或RNA，決定病毒的感染性，復(fù)制特性，遺傳性蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白，保護(hù)病毒核酸，參與病毒感染過(guò)程，抗原性，構(gòu)成病毒的酶，毒素作用糖類，脂類包膜成分，抗原性，毒性，信號(hào)傳導(dǎo),病毒的分類,核酸類型DNA病毒RNA病毒結(jié)構(gòu)特點(diǎn)雙鏈單鏈正鏈負(fù)鏈有包膜無(wú)包膜,病毒的分類,傳播方式和感染部位蟲媒病毒腸道病毒呼吸道病毒肝炎病毒性傳播病毒,亞病毒,亞病毒比病毒更小，更簡(jiǎn)單的病毒治病因子。衛(wèi)星病毒單鏈RNA（擬病毒）亞病毒類病毒單鏈環(huán)狀RNA分子朊病毒蛋白質(zhì),,病毒與細(xì)菌的比較,課堂作業(yè)疾病與病原體,1關(guān)于熱原質(zhì)，錯(cuò)誤的描述有A本質(zhì)是脂多糖B通過(guò)高壓蒸汽滅菌（121℃20MIN）可以破壞C主要由革蘭陰性菌產(chǎn)生D是細(xì)菌的合成代謝產(chǎn)物E采用高溫干烤可以破壞2細(xì)菌缺乏下列哪一種結(jié)構(gòu)仍可存活A(yù)細(xì)胞壁B細(xì)胞膜C細(xì)胞質(zhì)D核質(zhì)E以上均可3名詞解釋HOSPITALACQUIREDINFECTION4名詞解釋PHAGE5簡(jiǎn)答正常菌群什么情況下會(huì)變成條件致病菌6問(wèn)答細(xì)菌的毒力包括哪些,第二章,病毒的復(fù)制與變異病毒的培養(yǎng),病毒的復(fù)制,病毒借助宿主細(xì)胞提供原料和能量，完成自我復(fù)制，產(chǎn)生子代病毒。即病毒的增殖。病毒的復(fù)制步驟（復(fù)制周期）可大致分為吸附ADSORPTION穿入PENETRATION脫殼UNCOATING生物合成BIOSYNTHESIS裝配ASSEMBLY釋放RELEASE,1吸附病毒表面蛋白與宿主細(xì)胞表面受體特異性結(jié)合。,包膜糖蛋白或衣殼蛋白與細(xì)胞表面受體特異性結(jié)合，決定了病毒嗜組織特異性。,2穿入包膜融合，病毒胞飲,,3脫殼,宿主細(xì)胞溶酶體酶破壞病毒衣殼，釋放病毒核酸,4生物合成,復(fù)制病毒核酸，轉(zhuǎn)錄MRNA，翻譯病毒蛋白質(zhì)。此過(guò)程不存在病毒體，只有病毒元件，稱為隱蔽期。DNA病毒DNA復(fù)制，合成蛋白質(zhì)RNA病毒/鏈雙鏈復(fù)制中間體逆轉(zhuǎn)錄病毒逆轉(zhuǎn)錄為DNA，整合至宿主染色體,逆轉(zhuǎn)錄,逆轉(zhuǎn)錄REVERSETRANSCRIPTION以RNA為模板合成DNA的過(guò)程，即RNA指導(dǎo)下的DNA合成。,HIV逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程,HIV逆轉(zhuǎn)錄酶活性RNA依賴的DNA聚合酶活性RNASEH活性DNA依賴的DNA聚合酶活性但沒(méi)有3’?5’外切酶活性（無(wú)糾錯(cuò)功能，突變率高）,病毒基因組整合至宿主細(xì)胞染色體,HIV整合酶活性DNA外切酶活性雙鏈內(nèi)切酶活性連接酶活性,,裝配病毒核殼蛋白與核酸包裹，形成病毒體釋放無(wú)包膜病毒裂解細(xì)胞，子代病毒釋放有包膜病毒通過(guò)出芽方式，釋放子代病毒。帶走細(xì)胞核膜或細(xì)胞質(zhì)膜，作為自身包膜成分。,病毒生長(zhǎng)曲線,,,請(qǐng)觀看HIV1病毒復(fù)制周期FLASH，注意尋找病毒復(fù)制步驟。,,,病毒的異常增殖,頓挫感染ABORTIVEINFECTION缺損病毒DEFECTIVEVIRUS病毒干擾VIRALINTERFERENCE,病毒的變異,病毒變異類型突變基因重組表型重組,,,,,突變,突變的本質(zhì)突變類型條件致死性突變株（溫敏突變株）缺陷型干擾突變株宿主范圍突變株耐藥突變株突變株與變異株概念,,基因重組,兩個(gè)病毒基因組之間發(fā)生核酸水平上的互換和重新組合，形成兼有兩親代病毒特性的子代病毒。此過(guò)程為基因重組。重組時(shí)核酸分子斷裂，交叉連接，引起核酸分子內(nèi)部重新排列。分節(jié)段的RNA病毒基因組之間，兩個(gè)病毒株交換基因片段，稱為重配。,,表型重組,兩種病毒感染同一細(xì)胞時(shí)，各自產(chǎn)生不同的結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白，在子代病毒裝配時(shí)，出現(xiàn)互換衣殼和包膜蛋白時(shí)，表型會(huì)發(fā)生混合和交換。,,人工定向變異,改變宿主親嗜性冷適應(yīng)株或溫度敏感株基因重組基因改造突變,病毒的抵抗力,物理因素化學(xué)因素,病毒的培養(yǎng),易感動(dòng)物、雞胚或易感細(xì)胞,CPE（CYTOPATHICEFFECT）,D0,D15,D8,D5,D4,D3,D2,D1,D16,,,,,,,,,思考題,什么是病毒病毒有那些特點(diǎn)簡(jiǎn)述病毒的基本結(jié)構(gòu)。以HBV病毒為例，試述病毒的復(fù)制周期。解釋病毒的干擾現(xiàn)象、缺陷病毒、頓挫感染、亞病毒、朊粒。,THEEND,

簡(jiǎn)介：,第三章病毒和亞病毒,第三章病毒與亞病毒,第一節(jié)病毒第二節(jié)亞病毒第三節(jié)病毒與實(shí)踐,第一節(jié)病毒,概述病毒的形態(tài)和結(jié)構(gòu)病毒的復(fù)制病毒的溶原性病毒對(duì)理化因素抵抗力,一、病毒的特點(diǎn)和定義,第一節(jié)概述,1、特點(diǎn),1）不具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，具有一般化學(xué)大分子的特征。,2）一種病毒的毒粒內(nèi)只含有一種核酸，DNA或者RNA。,3）大部分病毒沒(méi)有酶或酶系極不完全，不含催化能量代謝的酶，不能進(jìn)行獨(dú)立的代謝作用。,4）嚴(yán)格的活細(xì)胞內(nèi)寄生，沒(méi)有自身的核糖體，沒(méi)有個(gè)體生長(zhǎng)，也不進(jìn)行二均分裂，必須依賴宿主細(xì)胞進(jìn)行自身的核酸復(fù)制，形成子代。,5）個(gè)體微小，在電子顯微鏡下才能看見(jiàn)。,6）對(duì)大多數(shù)抗生素不敏感，對(duì)干擾素敏感。,例如一些簡(jiǎn)單的病毒僅由核酸和蛋白質(zhì)外殼（COAT）構(gòu)成，故可把它們視為核蛋白分子。,朊病毒甚至僅由蛋白質(zhì)構(gòu)成,病毒感染敏感宿主細(xì)胞后，病毒核酸進(jìn)入細(xì)胞，通過(guò)其復(fù)制與表達(dá)產(chǎn)生子代病毒基因組和新的蛋白質(zhì)，然后由這些新合成的病毒組分裝配（ASSEMBLY）成子代毒粒，并以一定方式釋放到細(xì)胞外。病毒的這種特殊繁殖方式稱做復(fù)制（REPLICATION）。,第一節(jié)概述,1、特點(diǎn),一、病毒的特點(diǎn)和定義,病毒是一類既具有化學(xué)大分子屬性，又具有生物體基本特征；既具有細(xì)胞外的感染性顆粒形式，又具有細(xì)胞內(nèi)的繁殖性基因形式的獨(dú)特生物類群。,,超顯微的、沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的、專性活細(xì)胞內(nèi)寄生的實(shí)體,第一節(jié)概述,1、特點(diǎn),一、病毒的特點(diǎn)和定義,單細(xì)胞微生物與病毒性質(zhì)的比較,ADNA病毒和RNA病毒中的一部分B利福平可抑制痘病毒復(fù)制,第一節(jié)概述,2、定義,一、病毒的特點(diǎn)和定義,迄今仍無(wú)一個(gè)科學(xué)而嚴(yán)謹(jǐn)?shù)亩x,病毒為具有獨(dú)立于其宿主的進(jìn)化史的絕對(duì)細(xì)胞內(nèi)寄生物，它的DNA或RNA基因組被其所編碼的蛋白質(zhì)殼體化（ENCAPSIDATION）。（FIELDS等，1990年）,非細(xì)胞生物,,（真）病毒至少含核酸和蛋白質(zhì)二種組分,亞病毒SUBVIRUS,,類病毒（VIROID只含具侵染性的RNA組分?jǐn)M病毒（VIRUSOID只含有不具侵染性的RNA組分朊病毒（PRION只含蛋白質(zhì),,二病毒的宿主范圍,第一節(jié)概述,病毒幾乎可以感染所有的細(xì)胞生物，并具有宿主特異性,,,噬菌體（PHAGE）、植物病毒（PLANTVIRUSES）動(dòng)物病毒（ANIMALVIRUSES）,三、病毒的培養(yǎng)和純化,第一節(jié)概述,同微生物學(xué)其他學(xué)科分支一樣，病毒學(xué)的進(jìn)步完全得益于研究方法和技術(shù)手段的發(fā)展。,通過(guò)病毒的分離與純化獲得純化的、有感染性的病毒制備物是病毒學(xué)研究和實(shí)踐的基本技術(shù)。,1、病毒的培養(yǎng),病毒的培養(yǎng)二元培養(yǎng)物法,四、病毒的培養(yǎng)和純化,1、病毒的培養(yǎng),噬菌體,,細(xì)菌培養(yǎng)物,,培養(yǎng)液,營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板,,細(xì)菌培養(yǎng)液變清亮,細(xì)菌平板成為殘跡平板,,若是噬菌體標(biāo)本經(jīng)過(guò)適當(dāng)稀釋再接種細(xì)菌平板，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間培養(yǎng)，在細(xì)菌菌苔上可形成圓形局部透明區(qū)域，即噬斑（PLAGUE）。,MICROBIOLOGY,雙層平板法,優(yōu)點(diǎn)①?gòu)浹a(bǔ)玻璃皿底面不平的缺陷②所形成全部噬菌體斑都接近處于同一平面上③形成的噬菌斑較大，更有利于計(jì)數(shù),MICROBIOLOGY,噬菌斑,四、病毒的培養(yǎng)和純化,1、病毒的培養(yǎng),動(dòng)物病毒,,,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,雞胚,多種細(xì)胞培養(yǎng),四、病毒的培養(yǎng)和純化,1、病毒的培養(yǎng),植物病毒,,敏感植物葉片,,產(chǎn)生壞死斑，或稱枯斑,蛋白質(zhì)提純方法（鹽析、等電點(diǎn)沉淀、有機(jī)溶劑沉淀、凝膠層析、離子交換等）,四、病毒的培養(yǎng)和純化,2、病毒純化,標(biāo)準(zhǔn),,純化的病毒制備物應(yīng)保持其感染性,病毒是有感染性的生物體,,病毒具有化學(xué)大分子的屬性,,純化的病毒制備物的理化性質(zhì)應(yīng)具有均一性,方法,,主要化學(xué)組成為蛋白質(zhì),,具有一定的大小、形狀和密度,,,差速離心,梯度離心（超速離心）,第二節(jié)毒粒的性質(zhì),病毒是一類既具有化學(xué)大分子屬性，又具有生物體基本特征；既具有細(xì)胞外的感染性顆粒形式，又具有細(xì)胞內(nèi)的繁殖性基因形式的獨(dú)特生物類群。,毒粒（病毒顆粒）病毒的細(xì)胞外顆粒形式，也是病毒的感染性形式。,一團(tuán)能夠自主復(fù)制的遺傳物質(zhì),保護(hù)遺傳物質(zhì)免遭環(huán)境破壞，并作為將遺傳物質(zhì)從一個(gè)宿主細(xì)胞傳遞給另一個(gè)宿主細(xì)胞的載體。,蛋白質(zhì)外殼,包膜,,,,第二節(jié)毒粒的性質(zhì),一、毒粒的形態(tài)結(jié)構(gòu),1、病毒的大小和形狀,個(gè)體小，必需在電鏡下觀察；,不同病毒的毒粒大小差別很大；,毒粒的形狀動(dòng)物病毒有球狀、卵圓狀、磚形植物病毒有桿狀、絲狀、球狀噬菌體有蝌蚪狀和絲狀,,,,采用各種電鏡技術(shù)觀察毒粒的形態(tài)結(jié)構(gòu),ORFVIRUS口瘡病毒接觸性膿皰皮炎病毒（負(fù)染技術(shù)）,EBOLAVIRUS埃博拉病毒（正染技術(shù)）,VACCINIAVIRUS痘苗病毒（投影技術(shù)）,甲型H1N1型流感病毒,SARS病毒,第二節(jié)毒粒的性質(zhì),毒粒的化學(xué)組成,毒粒（化學(xué)組成）,,核酸；蛋白質(zhì)；脂類；碳水化合物；,,基本化學(xué)組成,,病毒顆粒在化學(xué)上表現(xiàn)為核蛋白,二、毒粒的化學(xué)組成,1、病毒的核酸,核酸是病毒的遺傳物質(zhì)；一種病毒的毒粒只含有一種核酸DNA或是RNA；,病毒核酸,,單鏈DNA（SSDNA，SINGLESTRANDEDDNA）；雙鏈DNA（DSDNA）；單鏈RNA（SSRNA）；雙鏈RNA（DSRNA）；,二、毒粒的化學(xué)組成,2、病毒的蛋白質(zhì),病毒蛋白質(zhì),,結(jié)構(gòu)蛋白,非結(jié)構(gòu)蛋白,病毒基因組編碼的，在病毒復(fù)制過(guò)程中產(chǎn)生并具有一定功能，但并不結(jié)合于毒粒中的蛋白質(zhì)。,構(gòu)成一個(gè)形態(tài)成熟的有感染性的病毒顆粒所必需的蛋白質(zhì),,,殼體蛋白；包膜蛋白；存在于毒粒中的酶；,二、毒粒的化學(xué)組成,2、病毒的蛋白質(zhì),病毒結(jié)構(gòu)蛋白的主要生理功能,1）構(gòu)成蛋白質(zhì)外殼，保護(hù)病毒核酸免受核酸酶及其它理化因子的破壞；,2）決定病毒感染的特異性，與易感細(xì)胞表面存在的受體具特異性親和力，促使病毒粒子的吸附和入侵；,3）決定病毒的抗原性，能刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體；,4）構(gòu)成毒粒酶，或參與病毒對(duì)宿主細(xì)胞的入侵（如T4噬菌體的溶菌酶等），或參與病毒復(fù)制過(guò)程中所需要病毒大分子的合成（如逆轉(zhuǎn)錄酶等）；,一般來(lái)說(shuō)，病毒是不具酶或酶系極不完全的，所以一旦離開宿主就不能獨(dú)立進(jìn)行代謝和繁殖。,第二節(jié)病毒的性質(zhì),2、病毒的殼體結(jié)構(gòu),殼體或衣殼（CAPSID）,包圍著病毒核酸的蛋白質(zhì)外殼，由蛋白質(zhì)亞基按對(duì)稱的形式、有規(guī)律地排列而成，是病毒毒粒的基本結(jié)構(gòu)。,殼體結(jié)構(gòu)類型,,螺旋對(duì)稱殼體二十面體對(duì)稱殼體復(fù)合對(duì)稱結(jié)構(gòu),螺旋對(duì)稱殼體亞基有規(guī)律地沿著中心軸（核酸）呈螺旋排列，進(jìn)而形成高度有序、對(duì)稱的穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。,二十面體對(duì)稱殼體構(gòu)成對(duì)稱結(jié)構(gòu)殼體的第二種方式是蛋白質(zhì)亞基圍繞具立方對(duì)稱的正多面體的角或邊排列，進(jìn)而形成一個(gè)封閉的蛋白質(zhì)的鞘。,具有復(fù)合對(duì)稱結(jié)構(gòu)的典型例子是有尾噬菌體（TAILEDPHAGE）,其殼體由頭部和尾部組成。包裝有病毒核酸的頭部通常呈二十面體對(duì)稱，尾部呈螺旋對(duì)稱。,一、病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu),3、病毒的包膜結(jié)構(gòu),病毒包膜的基本結(jié)構(gòu)與生物膜相似，是脂雙層膜。在包膜形成時(shí)，細(xì)胞膜蛋白被病毒的包糖蛋白取代。刺突（SPIKE）包膜或核衣殼上的突起。,第二節(jié)病毒的性質(zhì),一、病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu),3、病毒的包膜結(jié)構(gòu),病毒的蛋白質(zhì)殼體和病毒核酸（核心）構(gòu)成的復(fù)合物，又稱核衣殼。,核殼（NUCLEOCAPSID）,僅由核衣殼構(gòu)成的病毒顆粒,裸露毒粒（NAKEDVIRION）,如煙草花葉病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒（POLIOVIRUS）等一些簡(jiǎn)單的病毒的毒粒。,包膜（ENVELOPE）,有些病毒核衣殼包裹著的一層脂蛋白膜，它是病毒以出芽（BUDDING）方式成熟時(shí)，由細(xì)胞膜衍生而來(lái)的。有維系毒粒結(jié)構(gòu)，保護(hù)病毒核殼的作用。特別是病毒的包膜糖蛋白，具有多種生物學(xué)活性，是啟動(dòng)病毒感染所必需的。,有包膜的病毒,,第二節(jié)病毒的性質(zhì),一、病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu),4、病毒的結(jié)構(gòu)類型,四種主要結(jié)構(gòu)類型,,裸露的二十面體；裸露的螺旋；有包膜的二十面體；有包膜的螺旋；,有些病毒，如有尾噬菌體、痘病毒等結(jié)構(gòu)更為復(fù)雜，不能包括在這些結(jié)構(gòu)類型之內(nèi)。,不同病毒的毒粒結(jié)構(gòu)復(fù)雜程度有很大的區(qū)別,3、三類典型形態(tài)的病毒及其代表,二十面體對(duì)稱的代表腺病毒,復(fù)合對(duì)稱的代表T偶數(shù)噬菌體,螺旋對(duì)稱的代表煙草花葉病毒TMV,（1）螺旋對(duì)稱的代表煙草花葉病毒TOBACOMOSAICVIRUS,TMV,,,有三種類型纖維狀、直桿狀和彎曲桿狀。衣殼形似一中空柱，內(nèi)包核酸，衣殼粒和核酸呈螺旋對(duì)稱形排列。由95％衣殼PR和5％SSRNA組成。蛋白質(zhì)衣殼由衣殼粒（2130個(gè)）一個(gè)緊挨一個(gè)地呈螺旋排列而成，SSRNA位于衣殼內(nèi)側(cè)螺旋狀溝中。,（2）二十面體對(duì)稱的代表－腺病毒ADENOVIRUS,具有20個(gè)面，30條邊和12個(gè)頂角。核衣殼由不同數(shù)量的衣殼粒按一定方式排列成對(duì)稱體。腺病毒粒子共由252個(gè)球形的衣殼粒排列成一個(gè)具有廿面的對(duì)稱體，線狀DSDNA。噬菌體X174只有12個(gè)衣殼粒，最大的廿面體是由1，472個(gè)衣殼粒組成的昆蟲病毒粒子。,絕大多數(shù)噬菌體為蝌蚪形，現(xiàn)以ECOLIT4為例，介紹蝌蚪形噬菌體的結(jié)構(gòu),大腸桿菌T4噬菌體構(gòu)造,（3）復(fù)合對(duì)稱的代表－T偶數(shù)噬菌體,,,95NM,95NM,,65NM,,24環(huán),頸環(huán),,3、病毒的群體形態(tài),包涵體INCLUSIONBODY,噬菌斑PLAQUE,空斑PLAQUE,枯斑LESION,,,病毒的群體形態(tài)有,（1）包涵體（INCLUSIONBODY）,概念感染病毒的宿主細(xì)胞內(nèi)，出現(xiàn)在光學(xué)顯微鏡下可見(jiàn)的大小、形態(tài)、數(shù)量不等的小體，稱為包涵體。在宿主細(xì)胞內(nèi)形成包涵體是病毒的特征，不同的病毒其形成的包涵體具有不同的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、和特性。,包涵體在細(xì)胞中的形成部位位于細(xì)胞核內(nèi)如包疹病毒位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)如狂犬病毒等胞核內(nèi)胞質(zhì)都有麻疹病毒,包涵體（INCLUSIONBODY）,是病毒的聚集體,是病毒的合成部位,是病毒蛋白和與病毒感染有關(guān)的蛋白質(zhì),非病毒性包涵體,由化學(xué)因子或細(xì)菌感染形成,包涵體的實(shí)踐意義病毒鑒定、臨床診斷依據(jù)。,2噬菌斑PLAQUE,,噬菌斑是指在宿主細(xì)菌的菌苔上，噬菌體使菌體裂解而形成的空斑。,應(yīng)用1、噬菌體定量計(jì)數(shù)2、噬菌體的鑒定,空斑和病斑,在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)物上的與噬菌斑類似的空斑,稱為病斑因?yàn)槭苣[瘤病毒感染?？瞻吆筒“哂糜趧?dòng)物病毒粒子的計(jì)數(shù)也可以采用噬菌斑法類似的技術(shù)。,枯斑植物病毒在植物葉片上形成的群體稱為枯斑。,第三節(jié)病毒的復(fù)制,病毒的特點(diǎn),嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生物，只能在活細(xì)胞內(nèi)繁殖。,毒粒,,宿主細(xì)胞,,有繁殖性的病毒基因組,,具有感染性的毒粒消失,病毒基因組復(fù)制、表達(dá),,病毒核酸和蛋白質(zhì),裝配形成具有感染性的毒粒,,釋放至細(xì)胞外,,,,,原料；能量；生物合成場(chǎng)所；,,第三節(jié)病毒的復(fù)制,病毒的復(fù)制,病毒感染敏感宿主細(xì)胞后，病毒核酸進(jìn)入細(xì)胞，通過(guò)其復(fù)制與表達(dá)產(chǎn)生子代病毒基因組和新的蛋白質(zhì)，然后由這些新合成的病毒組分裝配（ASSEMBLY）成子代毒粒，并以一定方式釋放到細(xì)胞外。病毒的這種特殊繁殖方式稱做復(fù)制（REPLICATION）。,第三節(jié)病毒的復(fù)制,一、病毒的復(fù)制周期,1、一步生長(zhǎng)曲線（ONESTEPGROWTHCURVE）,1939年，MAXDELBRUCKEMORYELLIS,ECOLI/BACTERIOPAGE,1、用噬菌體的稀釋液感染高濃度的宿主細(xì)胞；2、數(shù)分鐘后，加入抗噬菌體的抗血清（中和未吸附的噬菌體）；3、將上述混合物大量稀釋，終止抗血清的作用和防止新釋放的噬菌體感染其它細(xì)胞；4、保溫培養(yǎng)并定期檢測(cè)培養(yǎng)物中的噬菌體效價(jià)（對(duì)噬菌體含量進(jìn)行計(jì)數(shù)）；5、以感染時(shí)間為橫坐標(biāo)，病毒的感染效價(jià)為縱坐標(biāo)，繪制出病毒特征性的繁殖曲線；,該實(shí)驗(yàn)標(biāo)志著分子病毒學(xué)、分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的建立MAXDELBRUCK因此榮獲1969年NOBELPRIZE,一、病毒的復(fù)制周期,1、一步生長(zhǎng)曲線（ONESTEPGROWTHCURVE）,噬菌體復(fù)制（繁殖）的三個(gè)階段（吸附期）；游離的噬菌體吸附到宿主細(xì)胞1、潛伏期；從噬菌體吸附到細(xì)胞到釋放出新噬菌體的最短時(shí)期2、裂解期；隨著菌體不斷破裂，新噬菌體數(shù)目增加，直到最高值3、平穩(wěn)期；,一、病毒的復(fù)制周期,1、一步生長(zhǎng)曲線（ONESTEPGROWTHCURVE）,,,取培養(yǎng)物直接測(cè)定病毒數(shù)量,將培養(yǎng)物過(guò)濾去細(xì)胞后測(cè)定病毒數(shù)量,將細(xì)胞裂解后測(cè)定病毒的數(shù)量。前期可將培養(yǎng)物先離心去上清以消除未吸附病毒的影響,,裂解量每個(gè)受染細(xì)胞所產(chǎn)生的子代病毒顆粒的平均數(shù)目。其值等于潛伏期受染細(xì)胞的數(shù)目除以穩(wěn)定期受染細(xì)胞所釋放的全部子代病毒數(shù)目，即等于穩(wěn)定期病毒效價(jià)與潛伏期病毒效價(jià)之比。,一、病毒的復(fù)制周期,2、隱蔽期（ECLIPSEPERIOD）,,在潛伏期的前一段，受染細(xì)胞內(nèi)檢測(cè)不到感染性病毒，后一階段，感染性病毒在受染細(xì)胞內(nèi)的數(shù)量急劇增加。自病毒在受染細(xì)胞內(nèi)消失到細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)新的感染性病毒的時(shí)間為為隱蔽期。,隱蔽期病毒在細(xì)胞內(nèi)存在的動(dòng)力學(xué)曲線呈線性函數(shù)，而非指數(shù)關(guān)系，從而證明子代病毒顆粒是由新合成的病毒基因組與蛋白質(zhì)經(jīng)裝配成熟，而不是通過(guò)雙分裂方式產(chǎn)生的。,不同病毒的隱蔽期長(zhǎng)短不同，例如，DNA動(dòng)物病毒的隱蔽期為5～20小時(shí)，RNA動(dòng)物病毒為2～10小時(shí)。,,一、病毒的復(fù)制周期,1、一步生長(zhǎng)曲線（ONESTEPGROWTHCURVE）,一步生長(zhǎng)曲線是研究病毒復(fù)制的一個(gè)經(jīng)典試驗(yàn)，最初是為研究噬菌體的復(fù)制而建立，以后推廣到動(dòng)物病毒和植物病毒的復(fù)制研究中。,以適量的病毒接種于標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)的高濃度的敏感細(xì)胞，待病毒吸附后，離心除去未吸附的病毒，或以抗病毒抗血清處理病毒細(xì)胞培養(yǎng)物以建立同步感染，然后繼續(xù)培養(yǎng)并定時(shí)取樣測(cè)定培養(yǎng)物中的病毒效價(jià)，并以感染時(shí)間為橫坐標(biāo)，病毒的感染效價(jià)為縱坐標(biāo)，繪制出病毒特征性的繁殖曲線，即一步生長(zhǎng)曲線。,不同病毒的潛伏期長(zhǎng)短不同，噬菌體以分鐘計(jì)，動(dòng)物病毒和植物病毒以小時(shí)或天計(jì)。,潛伏期,噬菌體的裂解量一般為幾十到上百個(gè)，植物病毒和動(dòng)物病毒可達(dá)數(shù)百乃至上萬(wàn)個(gè)。,裂解量,一、病毒的復(fù)制周期,3、病毒的復(fù)制周期,復(fù)制周期（REPLICATIVECIRCLE）或稱復(fù)制循環(huán),自病毒吸附于細(xì)胞開始，到子代病毒從感染細(xì)胞釋放到細(xì)胞外的病毒復(fù)制過(guò)程。,①吸附；②侵入；③增殖；（包括病毒基因組的表達(dá)與復(fù)制）④裝配（成熟）⑤釋放（裂解）；,第三節(jié)病毒的復(fù)制,二、病毒感染的起始,1、吸附,毒粒,敏感細(xì)胞,隨機(jī)碰撞而接觸（靜電引力或氫鍵）,可逆吸附，無(wú)特異性（非細(xì)胞顆粒也可吸附）,,,病毒表面蛋白與細(xì)胞受體的結(jié)合,特異性，不可逆吸附，啟動(dòng)病毒感染的第一階段,二、病毒感染的起始,1、吸附,病毒吸附蛋白與細(xì)胞受體間的結(jié)合力來(lái)源于空間結(jié)構(gòu)的互補(bǔ)性，相互間的電荷、氫鍵、疏水性相互作用及范得華力。,不同種系的細(xì)胞具有不同病毒的細(xì)胞受體，病毒受體的細(xì)胞種系特異性決定了病毒的宿主范圍。,二、病毒感染的起始,2、侵入,侵入又稱病毒內(nèi)化，它是一個(gè)病毒吸附后幾乎立即發(fā)生，依賴于能量的感染步驟。不同的病毒宿主系統(tǒng)的病毒侵入機(jī)制不同,二、病毒感染的起始,2、侵入,有尾噬菌體,注射方式將噬菌體核酸注入細(xì)胞,通過(guò)尾部刺突固著于細(xì)胞；尾部的酶水解細(xì)胞壁的肽聚糖，是細(xì)胞壁產(chǎn)生小孔；尾鞘收縮，核酸通過(guò)中空的尾管壓入胞內(nèi)，蛋白質(zhì)外殼留在胞外；,吸附,尾釘固著,尾鞘收縮,尾管穿入,DNA注入,如果大量噬菌體在短時(shí)間內(nèi)吸附于同一細(xì)胞上，使細(xì)胞壁產(chǎn)生許多小孔，也可引起細(xì)胞立即裂解，但并未進(jìn)行噬菌體的增殖，這種現(xiàn)象稱為自外裂解（LYSISFROMWITHOUT）。,二、病毒感染的起始,2、侵入,植物病毒,通過(guò)因人為地或自然的機(jī)械損傷所形成的微傷口進(jìn)入細(xì)胞；或者靠攜帶有病毒的媒介，主要靠是有吮吸式口器的昆蟲取食將病毒帶入細(xì)胞。,植物病毒一旦進(jìn)入細(xì)胞后，增殖產(chǎn)生的子代病毒或病毒核酸可通過(guò)病毒編碼的運(yùn)動(dòng)蛋白（MOVEMENTPROTEIN）與胞間連絲的相互作用從受染細(xì)胞進(jìn)入鄰近細(xì)胞。,二、病毒感染的起始,脫殼,脫殼是病毒侵入后，病毒的包膜和/或殼體除去而釋放出病毒核酸的過(guò)程。脫殼是病毒基因組進(jìn)行功能表達(dá)所必需的感染事件。,T偶數(shù)噬菌體脫殼與侵入是一起發(fā)生的,動(dòng)物病毒存在不同的結(jié)構(gòu)類型和不同的侵入方式，其脫殼過(guò)程也較復(fù)雜。,第三節(jié)病毒的復(fù)制,三、增殖,病毒基因組進(jìn)入胞內(nèi),,宿主細(xì)胞的代謝發(fā)生改變,,病毒利用宿主的生物合成機(jī)構(gòu)和場(chǎng)所，使病毒核酸表達(dá)和復(fù)制，產(chǎn)生大量的病毒蛋白質(zhì)和核酸。,④成熟（裝配）,已合成的各部件進(jìn)行自行裝配成新的噬菌體的過(guò)程。,T偶數(shù)噬菌體裝配過(guò)程模式圖,被感染細(xì)胞裂解，成熟的子代噬菌體轉(zhuǎn)移到外界。開始新的生活史。,,,⑤裂解（釋放）,,裂解量平均每一宿主細(xì)胞裂解后所產(chǎn)生的子代噬菌體數(shù)。,,有囊膜病毒以“出芽”方式釋放,吸附,侵入,早期病毒特異性酶的合成,病毒核酸復(fù)制,病毒結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)合成,裝配,釋放,,病毒大分子合成,2、噬菌體效價(jià)的測(cè)定,效價(jià)（噬菌斑形成單位數(shù)、感染中心數(shù)）每ML樣品中所含有的具侵染性的噬菌體粒子數(shù)。,測(cè)定方法斑點(diǎn)試驗(yàn)法、液體稀釋管法、單層平板法、雙層平板法、快速玻片法,,,,,,噬菌斑數(shù)試樣中噬菌體數(shù),雙層平板法,噬菌體與宿主關(guān)系,1、烈性噬菌體凡能引起宿主細(xì)胞迅速裂解的噬菌體。2、溫和性噬菌體噬菌體侵染宿主后，并不增殖，裂解，而與宿主DNA結(jié)合，隨宿主DNA復(fù)制而復(fù)制，此時(shí)細(xì)胞中找不到形態(tài)上可見(jiàn)的噬菌體，這種噬菌體稱為溫和性噬菌體。含有溫和性噬菌體的細(xì)菌稱為溶源性細(xì)菌LYSOGENICBACTERIA,第四節(jié)病毒的非增殖性感染,溫和噬菌體的溶源性反應(yīng),烈性噬菌體（VIRULENTPHAGE）,感染宿主細(xì)胞后能在細(xì)胞內(nèi)正常復(fù)制并最終殺死細(xì)胞，形成裂解循環(huán)（LYTICCYCLE）。,溫和噬菌體或稱溶源性噬菌體（LYSOGENICPHAGE）,感染宿主細(xì)胞后不能完成復(fù)制循環(huán)，噬菌體基因組長(zhǎng)期存在于宿主細(xì)胞內(nèi)，沒(méi)有成熟噬菌體產(chǎn)生。,這一現(xiàn)象稱做溶源性（LYSOGENY）現(xiàn)象,在大多數(shù)情況下，溫和噬菌體的基因組都整合于宿主染色體中（如Λ噬菌體），亦有少數(shù)是以質(zhì)粒形成存在（如P1噬菌體）。,溫和性噬菌體存在狀態(tài),1）游離具感染性的VIRION；2）前噬菌體（PROPHAGE）附著或整合在宿主染色體上，一道復(fù)制；3）營(yíng)養(yǎng)期噬菌體指導(dǎo)合成。,溫和噬菌體的溶源性反應(yīng),整合于細(xì)菌染色體或以質(zhì)粒形成存在的溫和噬菌體基因組稱做原噬菌體（PROPHAGE）,在原噬菌體階段，噬菌體的復(fù)制被抑制，宿主細(xì)胞正常地生長(zhǎng)繁殖，而噬菌體基因組與宿主細(xì)菌染色體同步復(fù)制，并隨細(xì)胞分裂而傳遞給子代細(xì)胞。,細(xì)胞中含有以原噬菌體狀態(tài)存在的溫和噬菌體基因組的細(xì)菌稱做溶源性細(xì)菌（LYSOGENICBACTERIA）,溶源性細(xì)菌經(jīng)自發(fā)裂解或誘發(fā)裂解，進(jìn)入裂解循環(huán),噬菌體的應(yīng)用,噬菌體會(huì)給人類造成損失，利用微生物進(jìn)行發(fā)酵的工業(yè)常深受其害。但是，由于噬菌體的某些生物學(xué)特性，使其在人類的生產(chǎn)實(shí)踐和生物學(xué)基礎(chǔ)理論研究中都有一定價(jià)值?？筛爬橐韵聨追矫?。,1用于鑒定未知細(xì)菌在醫(yī)學(xué)上，有些難鑒別的病原菌，利用噬菌體對(duì)宿主細(xì)胞的高度?；缘拿舾行?，不僅可鑒定到菌種，而且可鑒定到菌型。2用于臨床治療某些傳染性疾病。如果將噬菌體制劑與抗生素或者磺胺藥物配合應(yīng)用，則效果更好。3檢驗(yàn)植物病原菌利用噬菌體可以檢驗(yàn)由種子攜帶的植物病原菌。4測(cè)定輻射劑量某些噬菌體如T2對(duì)輻射劑量的反應(yīng)敏感而精確。5噬菌體在分子生物學(xué)研究中的作用噬菌體現(xiàn)已成為進(jìn)行分子生物學(xué)研究的較為理想的重要材料。,,,（二）植物病毒,,已知的植物病毒多達(dá)700種（1989年），多數(shù)是SSRNA病毒。形態(tài)桿、絲、球狀，一般無(wú)包膜。,1619年荷蘭畫師描畫的有病郁金香的畫像。,花葉、黃化或紅化等癥狀,植株發(fā)生矮化，叢枝或畸形等,形成枯斑或壞死等癥狀,植物感染病毒后的主要癥狀,植物黃萎病,,借昆蟲刺吸式口器進(jìn)入、通過(guò)傷口或嫁接進(jìn)入，再通過(guò)胞間連絲或輸導(dǎo)組織迅速向其它部位擴(kuò)散引起普遍感染。,1、“侵入”方式,,3、核酸的復(fù)制和蛋白質(zhì)的合成,2、脫殼植物病毒侵入宿主細(xì)胞后才能發(fā)生脫殼。,,增殖過(guò)程,4、裝配（成熟）,（三）人類和脊椎動(dòng)物病毒,在人類與脊椎動(dòng)物中廣泛寄生著相應(yīng)的病毒。人類傳染病80％由病毒引起（＞300種），脊椎動(dòng)物病毒＞900種，許多病毒引起人畜共患病。另一些病毒感染動(dòng)物后，并不致死宿主細(xì)胞，而是引起腫瘤。,種類,DSDNA、SSDNA、DSRNA、SSRNA。衣殼外有的有包膜，有的無(wú)包膜，有的包膜上有刺突。,增殖過(guò)程,與噬菌體的增殖大致相同，可分為五個(gè)連續(xù)步驟1）吸附具高度專一性地吸附于敏感細(xì)胞表面的受體。2）侵入以胞飲、包膜溶入細(xì)胞膜、特異受體轉(zhuǎn)移等方式侵入敏感細(xì)胞內(nèi)。3）脫殼脫去衣殼和包膜。4）生物合成核酸的復(fù)制和蛋白質(zhì)的合成。5）裝配和成熟分別合成的核酸和蛋白質(zhì)組合成完整的、新的病毒粒子。6）釋放大量有侵染性的子代病毒。,多角體多數(shù)昆蟲病毒可在宿主細(xì)胞內(nèi)形成光鏡下呈多角形的包涵體。直徑一般3ΜM（05～10ΜM），堿溶性蛋白，內(nèi)包裹數(shù)目不等的病毒粒，可在細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)內(nèi)形成。功能保護(hù)病毒粒免受外界不良環(huán)境的破壞。,（四）昆蟲病毒（無(wú)脊椎動(dòng)物病毒）,已知昆蟲病毒1671種（1990），其中80％以上鱗翅目昆蟲的病原體。,昆蟲病毒的種類,除非包涵體病毒病毒外，可分為,核型多角體病毒NUCLEARPOLYHEDROSISVIRUS,NPV,質(zhì)型多角體病毒CYTOPLASMICPOLYHEDROSISVIRUS,CPY,顆粒體病毒GRANULOSISVIRUS,GV,,昆蟲病毒做為生物農(nóng)藥優(yōu)點(diǎn),專一性高,毒力大,后效長(zhǎng),使用方便,對(duì)人畜安全,無(wú)公害,缺點(diǎn)危害經(jīng)濟(jì)動(dòng)物,,,,類病毒VIROID,擬病毒VIRUSOID,朊病毒PRION,第二節(jié)亞病毒,只含核酸或蛋白質(zhì)一種成分的分子病原體。,包括,一、類病毒,只含RNA一種成分，專性活細(xì)胞內(nèi)寄生的分子病原體。是寄生于高等生物細(xì)胞中一類最小的新的病原體。SSRNA，分子量約5104DA～12104DA，為已知最小病毒分子量的十分之一左右。到目前為止，類病毒只在植物中被發(fā)現(xiàn)。類病毒對(duì)各種化學(xué)和物理因子的作用都不敏感，對(duì)熱以及紫外光和離子輻射有高度抗性。,類病毒VIROID,馬鈴薯紡錘塊莖病的病原體,長(zhǎng)50NM棒狀RNA分子,179核苷酸180核苷酸,RNA由,組成,兩半體間有70％堿基以氫鍵方式結(jié)合共形成122個(gè)堿基對(duì)，27個(gè)內(nèi)環(huán)。,VIROIDDISEASESOFPOTATO,二、擬病毒VIRUSOIDS，類類病毒,是包裹在動(dòng)植物病毒粒子中的類病毒極其微小，僅由裸露的RNA（300～400個(gè)核苷酸）或DNA組成。,輔助病毒類病毒“寄生”的真病毒。擬病毒為輔助病毒的“衛(wèi)星”，其復(fù)制必須依賴輔助病毒的協(xié)助。擬病毒也可干擾輔助病毒的復(fù)制、減輕其對(duì)宿主的病害、用于生物防治中。,,,是一類不含核酸的侵染性蛋白質(zhì)分子。小型蛋白質(zhì)顆粒，分子量33104～35104DA,約由250個(gè)氨基酸組成。能引起宿主體內(nèi)現(xiàn)成的同類蛋白質(zhì)分子發(fā)生與其相似的構(gòu)象變化而使宿主致病。毒性很強(qiáng)，1G含朊病毒的鼠腦可感染1億只小鼠。,三、朊病毒,引起的疾病羊搔癢病、瘋牛病、瘋羊病、克雅氏病。,朊病毒侵入人體大腦的過(guò)程借食物進(jìn)入消化道，再經(jīng)淋巴系統(tǒng)侵入大腦。,MICROBIOLOGY,朊病毒（PRION，VIRINO）,朊病毒有哪些特點(diǎn)首先，它沒(méi)有核酸，能使正常的蛋白質(zhì)由良性轉(zhuǎn)為惡性，由沒(méi)有感染性轉(zhuǎn)化為感染性；其次，它沒(méi)有病毒的形態(tài)，是纖維狀的東西；第三，它對(duì)所有殺滅病毒的物理化學(xué)因素均有抵抗力，現(xiàn)在的消毒方法都無(wú)用，只有在136℃高溫和兩個(gè)小時(shí)的高壓下才能滅活；第四，病毒潛伏期長(zhǎng)，從感染到發(fā)病平均28年，一旦出現(xiàn)癥狀半年到一年100％死亡；第五，診斷困難，正常的人與動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)都有朊蛋白存在，不明原因作用下它的立體結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，變成有傳染性的蛋白，患者體內(nèi)不產(chǎn)生免疫反應(yīng)和抗體，因此無(wú)法監(jiān)測(cè)。,與真病毒的主要區(qū)別,（1）在電鏡下，朊病毒呈淀粉樣顆粒狀，成叢排列，每叢大小和形狀不一；（2）無(wú)核酸成分；（3）無(wú)免疫原性；（4）由宿主細(xì)胞內(nèi)的基因編碼；（5）抗逆性強(qiáng)，能耐殺菌劑（甲醛）和高溫（120～130℃處理4H后仍具感染性）。,人的庫(kù)魯病KURU、克雅氏病CREUTZFELDTJAKOBDISEASE,CJD等,羊搔癢癥SCRAPIE,牛海綿狀腦病SPONGIFORMENCEPHALOPATHY,第三節(jié)病毒與實(shí)踐,病毒與實(shí)踐的關(guān)系極密切，由病毒引起

簡(jiǎn)介：項(xiàng)目名稱細(xì)胞抗病毒先天免疫相關(guān)蛋白的生物學(xué)細(xì)胞抗病毒先天免疫相關(guān)蛋白的生物學(xué)研究研究首席科學(xué)家郭德銀郭德銀武漢大學(xué)武漢大學(xué)起止年限20102010年1月20142014年8月依托部門教育部教育部作啟動(dòng)機(jī)體的抗病毒免疫，為病毒新型疫苗的合理設(shè)計(jì)提供理論基礎(chǔ)。具體研究?jī)?nèi)容包括1）RLR信號(hào)通路分子及其相關(guān)蛋白的篩選、克隆和相互作用研究主要采用酵母雙雜交和蛋白芯片技術(shù)，篩選、克隆相關(guān)的新基因和蛋白。從信號(hào)通路及調(diào)節(jié)分子的相互作用及其機(jī)理著手，闡明RLR信號(hào)通路的傳遞以及調(diào)節(jié)的機(jī)制2）這些新發(fā)現(xiàn)蛋白分子在抗病毒細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)中的作用研究著重闡明信號(hào)通路分子及調(diào)節(jié)分子在病毒感染和抗病毒先天免疫中的作用，以及如何通過(guò)信號(hào)通路的調(diào)節(jié)發(fā)揮作用。3）抗病毒信號(hào)通路的交叉和關(guān)聯(lián)研究主要研究RLR和TLR在病毒感染時(shí)信號(hào)通路交叉和影響，研究這種關(guān)聯(lián)在病毒感染和抗病毒先天免疫中的意義。4）抗病毒先天免疫相關(guān)分子調(diào)控樹突狀細(xì)胞病毒抗原遞呈的機(jī)制研究研究誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞成熟的MYD88依賴型信號(hào)通路和MYD88非依賴型TRIF依賴型信號(hào)通路調(diào)控病毒蛋白抗原遞呈的分子機(jī)制，胞內(nèi)的RLR信號(hào)通路對(duì)樹突狀細(xì)胞抗原遞呈途徑的影響，鑒定RLR信號(hào)通路參與調(diào)控樹突狀細(xì)胞病毒抗原遞呈相關(guān)囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)的相關(guān)分子，研究病毒編碼蛋白對(duì)抗原遞呈途徑的影響與其免疫逃逸的關(guān)系。5）抗病毒先天免疫相關(guān)分子調(diào)控病毒獲得性免疫應(yīng)答機(jī)制研究采用單純皰疹病毒、鼠肝炎病毒等感染動(dòng)物模型，通過(guò)產(chǎn)生樹突狀細(xì)胞特異性KNOCKINDOWN的轉(zhuǎn)基因小鼠，研究不同抗原遞呈途徑與病毒免疫應(yīng)答的關(guān)系，揭示抗病毒先天免疫相關(guān)分子調(diào)控病毒獲得性免疫應(yīng)答與病毒免疫逃逸的機(jī)制。2病毒感染導(dǎo)致的宿主細(xì)胞蛋白的翻譯后修飾與功能研究病毒感染導(dǎo)致的宿主細(xì)胞蛋白的翻譯后修飾與功能研究許多病毒感染依賴宿主脂筏，膽固醇代謝途徑中的蛋白組份也被病毒修飾利用。我們將采用蛋白組學(xué)方法，研究病毒對(duì)宿主脂筏以及膽固醇代謝途徑的影響，特別針對(duì)HCV病毒感染，篩選潛在的能夠被HCV絲氨酸蛋白酶NS34A切割的宿主蛋白并研究其在HCV感染過(guò)程中的作用。已有的研究表明，蛋白質(zhì)的磷酸化去磷酸化，泛素化去泛素化，SUMO化去SUMO化修飾在調(diào)節(jié)病毒感染和復(fù)制、細(xì)胞抗病毒先天免疫反應(yīng)等過(guò)程中具有重要作用。我們將用蛋白質(zhì)組學(xué)方法系統(tǒng)的篩選調(diào)節(jié)病毒感染誘導(dǎo)I型干擾素表達(dá)的蛋白質(zhì)修飾酶和去修飾酶基因，比較病毒感染前后宿主細(xì)胞蛋白

簡(jiǎn)介：疾病學(xué)基礎(chǔ)皰疹病毒,演講人組員周林燕賈旭艷王夢(mèng)麗陸夢(mèng)瑄,學(xué)習(xí)要點(diǎn)一、皰疹病毒簡(jiǎn)介二、發(fā)現(xiàn)與描述三、基因與結(jié)構(gòu)四、病毒復(fù)制五、致病作用與臨床表現(xiàn),皰疹病毒簡(jiǎn)介,與人類有關(guān)的皰疹病毒稱為人類皰疹病毒（HUMANHERPESVIRUS,HHV）,包括單純皰疹病毒I型、II型、水痘－帶狀皰疹病毒、巨細(xì)胞病毒、EB病毒、人類皰疹病毒6、7、8型等。皰疹病毒（HERPESVIRUSES）是一類中等大小、結(jié)構(gòu)相似、有包膜的雙鏈DNA病毒?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)近一百種，根據(jù)其理化性質(zhì)分為Α、Β、Γ三個(gè)亞科。,2024/3/27,發(fā)現(xiàn)與描述,“HERPES”一詞源于希臘語(yǔ)“HERPEIN”。1913年，德國(guó)眼科醫(yī)生WILHELMGRATER證實(shí)了皰疹具有傳染性。1925年，美國(guó)病毒學(xué)家ERNESTGOODPASTURE論證了皰疹病原體可經(jīng)神經(jīng)傳播。1939年澳大利亞病毒學(xué)家諾貝爾獎(jiǎng)獲得者FRANKLACFARLANEBURNET提出皰疹病原體的潛伏感染學(xué)說(shuō)。1954年另一諾貝爾獎(jiǎng)獲得者THOMASWELLER成功分離了水痘帶狀皰疹病毒。1964年EPSTEIN及其同事成功分離了EB病毒。1968年，GERTRUDEHENLE和WERNERHELEN成功分離了單純皰疹病毒。,2024/3/27,基因與結(jié)構(gòu),皰疹病毒科成員的基因組均為線性雙鏈DNA，其大小在120230KB之間，含基因60120個(gè)。皰疹病毒科成員在形態(tài)上具有較高相似性電鏡下，皰疹病毒呈中等大小，有包膜的不規(guī)則球形，直徑120200NM。在結(jié)構(gòu)上由四部分組成，即核心，衣殼，皮層和包膜。,2024/3/27,皰疹病毒模式圖,2024/3/27,病毒復(fù)制,吸附↓穿入與脫殼↓生物合成↓裝配與成熟↓釋放,2024/3/27,致病作用與臨床表現(xiàn),水痘帶狀皰疹病毒致病,單純皰疹病毒致病,人巨細(xì)胞病毒致病,2024/3/27,單純皰疹病毒致病,人類單純皰疹病毒分為2個(gè)血清型HSV1HSV2,2024/3/27,HSV1原發(fā)感染多發(fā)生于6個(gè)月至2歲的嬰兒，多為隱性感染；顯性感染常表現(xiàn)為皰疹性齦口炎，皰疹性角膜炎等。主要潛伏于三叉神經(jīng)節(jié)和頸上神經(jīng)節(jié)細(xì)胞內(nèi)。,HSV1,2024/3/27,HSV2原發(fā)感染多為生殖器皰疹，可經(jīng)性接觸傳播。主要潛伏于骶神經(jīng)節(jié)。HSV2可能引起宮頸癌,HSV2,HSV2,2024/3/27,原發(fā)感染多發(fā)生于39歲兒童，表現(xiàn)為水痘，再發(fā)感染多見(jiàn)于成人。原發(fā)感染后，病毒潛伏于脊髓后根神經(jīng)節(jié)或顱神經(jīng)的感覺(jué)神經(jīng)節(jié)。以后如機(jī)體免疫力下降，病毒被激活，病毒沿神經(jīng)軸突下行到所支配的皮膚細(xì)胞內(nèi)增殖，發(fā)生皰疹，排列呈帶狀，稱帶狀皰疹發(fā)生于身體的一側(cè)，以軀干中線為界，好發(fā)部位為胸、腹和面部,水痘帶狀皰疹病毒致病,2024/3/27,水痘,2024/3/27,帶狀皰疹,2024/3/27,人巨細(xì)胞病毒（HCMV）為最常見(jiàn)的人類伴隨病毒，原發(fā)感染在2歲左右，呈隱形感染。再發(fā)感染多見(jiàn)于免疫缺陷人群和大量病毒輸入人群，表現(xiàn)為單核細(xì)胞增多癥。可引起巨細(xì)胞病毒肺炎，巨細(xì)胞病毒肝炎等。HCMV潛伏部位可能為唾液腺，乳腺，腎臟，外周血單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞。母親妊娠期出現(xiàn)原發(fā)或再發(fā)感染，可引起胎兒宮內(nèi)感染，胎兒表現(xiàn)為肝脾腫大、黃疸、血小板減少性紫癜、血溶性貧血；極少數(shù)呈先天性畸形；亦可引起流產(chǎn)，死胎。HCMV感染與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化、慢性疲勞綜合癥、復(fù)發(fā)性口腔潰瘍等多種疾病有一定關(guān)聯(lián)。,人巨細(xì)胞病毒致病,2024/3/27,檢測(cè)與防治,1皰疹病毒的微生物檢測(cè)皰疹病毒感染可造成感染細(xì)胞的明顯病變，故經(jīng)典的皰疹病毒檢測(cè)多采取感染部位的組織標(biāo)本染色鏡檢。為配合圍產(chǎn)期醫(yī)學(xué)檢查，目前對(duì)潛伏感染者多采取血清學(xué)檢測(cè)，臨床上對(duì)單純皰疹病毒,人巨細(xì)胞病毒可采取病毒核酸檢測(cè)。2皰疹病毒的防治除水痘帶狀皰疹病毒減毒活疫苗已廣泛使用外，單純皰疹病毒，人巨細(xì)胞病毒疫苗尚在研制中。,,謝謝觀賞,2024/3/27,

簡(jiǎn)介：中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué),葉放YEFANG973163COMHTTP//YEFANG973BLOG163COM國(guó)醫(yī)大師“周仲瑛名醫(yī)工作室”國(guó)家中醫(yī)藥管理局中醫(yī)肝膽病重點(diǎn)學(xué)科,第二講病毒性肝炎（五種病毒性肝炎概況）,教學(xué)日歷,,,4,4,病毒性肝炎在我國(guó)危害極大其中，乙肝是危害全球健康的問(wèn)題,有35億慢性攜帶者最高可達(dá)25的人將死于乙肝或其相關(guān)并發(fā)癥每年有100萬(wàn)死于HBV感染,是全球范圍內(nèi)第9位死因,其它地區(qū),亞太地區(qū)75,至今為止仍然沒(méi)有任何一種藥物可以真正清除病毒或阻斷肝病進(jìn)展；中醫(yī)藥在防治肝病過(guò)程中的各個(gè)環(huán)節(jié)都能發(fā)揮著一定的作用。,在各類傳染病中發(fā)病率最高；我國(guó)HBV感染者逾12億，10。乙型肝炎患者近3千萬(wàn)每年近30萬(wàn)人死于肝炎或肝癌,全世界,全中國(guó),,,5,5,病毒性肝炎總論,轉(zhuǎn)氨酶升高患肝炎需要隔離,,,6,6,肝炎，是指一類由各種病因引起的肝臟炎癥病變。其病因復(fù)雜多樣,病毒性肝炎已知有五種酒精性肝病脂肪性肝??；臨床十分常見(jiàn)藥物性肝炎抗癆或抗菌藥、免疫抑制劑、內(nèi)分泌治療藥物等其他病原體感染鉤端螺旋體病、肝結(jié)核等自身免疫性肝炎遺傳代謝性疾病工業(yè)化學(xué)物中毒四氯化碳、二甲苯、二惡英等其他肝臟缺血、膽道疾患、多臟衰等,7,7,病毒性肝炎VIRALHEPATITIS的分類,黃熱病毒（YFV）EB病毒（EBV）巨細(xì)胞病毒（CMV）單純皰疹病毒（HSV）風(fēng)疹病毒RV,能引起肝功能損害的病毒有很多,它們均非嗜肝病毒,所致肝損害為繼發(fā)性；不是以肝臟損害為主,,病毒分型,正式命名的5種肝炎甲型肝炎病毒HEPATITISAVIRUSHAV甲型肝炎乙型肝炎病毒HEPATITISBVIRUSHBV乙型肝炎丙型肝炎病毒HEPATITISCVIRUSHCV丙型肝炎丁型肝炎病毒HEPATITISDVIRUSHDV丁型肝炎戊型肝炎病毒HEPATITISEVIRUSHEV戊型肝炎己肝病毒HFV現(xiàn)已被否定庚肝病毒HGV/GBVC、TT病毒和SEN病毒不屬于肝炎病毒,,,,,,根據(jù)傳播途徑的不同分類糞口途徑甲型和戊型肝炎季節(jié)性，可引起暴發(fā)或流行，無(wú)慢性肝炎腸道外傳播即輸血注射及母嬰傳播乙、丙和丁型肝炎，多為散發(fā)，無(wú)季節(jié)性，有慢性化傾向，部分病例可發(fā)展成肝硬化和肝細(xì)胞癌HCC,危害世界范圍流行，我國(guó)是高發(fā)區(qū)，尤其甲肝和乙肝,1992～1995年全國(guó)病毒性肝炎血清流行病學(xué)調(diào)查,,據(jù)衛(wèi)生部2003～2005年全國(guó)法定報(bào)告?zhèn)魅静∫咔楦窝卓偘l(fā)病率和死亡率有不同程度發(fā)病率仍位于法定報(bào)告?zhèn)魅静〉牡谝?、二位，死亡率位于第三位，其中甲肝發(fā)病率乙肝發(fā)病率丙肝發(fā)病率戊肝發(fā)病率呈波動(dòng)狀態(tài)甲、乙肝疫苗接種面積防制力度,,,,,,,,,,,甲型肝炎病毒HAV以肝臟損害為主的急性腸道傳染病以糞口途徑傳播為主，可形成暴發(fā)或流行，主要感染對(duì)象為兒童及青少年,,第一節(jié)甲型肝炎,第一部分五種病毒性肝炎,13,13,一、甲型病毒性肝炎,甲肝,HAV為單股正鏈RNA病毒，歸類于小RNA病毒科肝炎病毒屬,●病毒形態(tài),1973年，F(xiàn)EINSTONE等采用免疫電鏡首次觀察到該病毒。,病毒直徑27NM，無(wú)囊膜，為正20面體球形顆粒,,（一）病原學(xué),7,500個(gè)左右核苷酸,甲肝,HAV體外較一般腸道病毒抵抗力強(qiáng)，低溫下可長(zhǎng)期存活。在淡水、海水、污水、泥沙毛蚶等水產(chǎn)品中；,HAV傳染性高于HEV，發(fā)病有家庭聚集現(xiàn)象,●抵抗力,化學(xué)消毒劑抵抗力強(qiáng)于腸道病毒屬病毒余氯10～15PPM30MIN3福爾馬林5MIN均可滅活70乙醇3MIN部分滅活不耐受冷凍干燥，對(duì)紫外線敏感,溫度60℃1H仍可存活10～12H部分滅活，100℃5MIN完全滅活；4℃其抗原性和組織培養(yǎng)活性可保持1年20℃可存活多年并保持傳染性,,15,15,●病毒分型和抗原抗體系統(tǒng),HAV只有有一個(gè)血清型HAV只有一個(gè)抗原抗體系統(tǒng)抗HAVIGM是診斷HAV急性感染的指標(biāo)抗HAVIGG是保護(hù)性抗體，是產(chǎn)生免疫力的標(biāo)志,動(dòng)物模型黑猩猩、狨猴及獼猴等靈長(zhǎng)類動(dòng)物易感，且可傳代細(xì)胞培養(yǎng)HAV生長(zhǎng)緩慢，接種后約需4周才可檢出抗原,16,16,甲肝,（二）流行病學(xué),●傳染源主要為急性患者和亞臨床、隱性感染者,,靈長(zhǎng)類動(dòng)物黑猩猩、狨猴及獼猴等作為傳染源的意義不大,17,17,甲肝,●傳播途徑,糞口途徑糞便排出病毒，經(jīng)口腔攝入而感染,散發(fā)流行以日常生活接觸為主，臨床較多見(jiàn),暴發(fā)流行水源或食物污染，尤其是生食毛蚶、蛤蠣、牡蠣等水產(chǎn)品最易引起。,,HAV易通過(guò)食物和水在人群中傳播,經(jīng)食物傳播經(jīng)食用受污染的貝殼類水產(chǎn)品、經(jīng)產(chǎn)、供、銷環(huán)節(jié)污染的食物經(jīng)水傳播衛(wèi)生條件差的國(guó)家和地區(qū)特點(diǎn)發(fā)病者多飲用同一水源，病例分布與供水范圍一致日常生活接觸傳播,我國(guó)甲肝高流行區(qū)呈北高南低、西高東低、農(nóng)村高城市低,18,18,●易感人群及免疫力,我國(guó)40歲以上成人90～98抗HAVIGG陽(yáng)性,6個(gè)月以內(nèi)嬰兒,母親,抗體,,普遍易感，感染后可獲得持久的免疫力，再次感染極為罕見(jiàn)嬰幼、兒童時(shí)期甲肝的易感性最高人群易感性影響甲肝流行的關(guān)鍵因素接種甲肝疫苗降低人群易感性的重要措施,19,19,甲肝,（三）發(fā)病機(jī)理,以往認(rèn)為HAV對(duì)肝細(xì)胞有直接殺傷作用。,目前觀點(diǎn)HAV導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷的機(jī)理以宿主免疫反應(yīng)為主,20,20,甲肝,（四）臨床特點(diǎn),1潛伏期2～6周,,2流行季節(jié),●各型病毒性肝炎散發(fā)病例均無(wú)明顯季節(jié)性。,●甲肝、戊肝的暴發(fā)流行多見(jiàn)與秋冬季節(jié)或雨水多、洪水泛濫的季節(jié)。,3臨床特點(diǎn),●HAV隱性感染多于顯性感染,●臨床病例無(wú)黃疸型多于黃疸型,,21,21,●甲肝預(yù)后良好,,甲肝,（五）預(yù)后,●無(wú)慢性化傾向,●無(wú)演化成肝癌的危險(xiǎn),●發(fā)生肝衰竭者罕見(jiàn),預(yù)防策略與措施,管理傳染源早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早報(bào)告、早隔離、早治療切斷傳播途徑保護(hù)易感人群主動(dòng)免疫甲肝減毒活疫苗被動(dòng)免疫甲肝免疫球蛋白,第二節(jié)戊型肝炎,戊型肝炎病毒HEV糞口途徑傳播的以肝臟損害為主的急性傳染病,,24,24,戊肝,戊肝原稱為“腸道傳播的非甲非乙型病毒性肝炎”,●HEV為單股線狀正鏈RNA病毒，現(xiàn)暫歸類于嵌杯病毒科。,●流行病學(xué)特征、發(fā)病機(jī)理及臨床表現(xiàn)與甲肝類似，不轉(zhuǎn)為慢性,●抗HEV,,,抗HEVIGM是近期內(nèi)HEV感染的標(biāo)志，有早期診斷價(jià)值,抗HEVIGGHEV感染后可長(zhǎng)期存在，可用于流行病學(xué)調(diào)查,病原學(xué),嵌杯樣病毒科結(jié)構(gòu)無(wú)包膜、直徑27～38NM、20面體表面有鋸齒狀刻缺和突起的圓球狀顆粒實(shí)心和空心兩種顆粒單股正鏈RNA7,200個(gè)核苷酸,3個(gè)開放讀碼框架抵抗力不穩(wěn)定，對(duì)高鹽、氯化銫和氯仿敏感反復(fù)凍融易降解4～8℃、3～5D病毒滴度長(zhǎng)期保存液氮/85℃超低溫冰箱內(nèi),,,流行過(guò)程,傳染源潛伏末期和急性期病人臨床型、亞臨床型和隱性感染傳播途徑經(jīng)糞口途徑傳播人群易感性人對(duì)HEV普遍易感抗體抗HEV中和病毒,流行特征,地區(qū)分布世界性分布亞、非、中美洲的發(fā)展中國(guó)家我國(guó)北方南方、東部西部、農(nóng)村城市時(shí)間分布明顯的季節(jié)性，多見(jiàn)于雨季或洪水后人群分布多青壯年，高發(fā)年齡在15～35歲,一般男性患病女性孕產(chǎn)婦罹患率病死率,,,28,28,戊肝,臨床特點(diǎn),①HEV體外抵抗力及傳染性較HAV低，發(fā)病無(wú)家庭集聚現(xiàn)象；暴發(fā)流行較多見(jiàn),②急性黃疸型感染的發(fā)生率高，且黃疸較深；,③臨床癥狀及肝損害程度較重；,④老年人及孕婦感染后易發(fā)展為重型肝炎，病死率高,29,29,,與甲型肝炎比較1成人感染率比甲型肝炎高；兒童感染率比甲型肝炎低；2淤膽型肝炎更多見(jiàn)；3病情恢復(fù)比甲型肝炎慢；4孕婦患戊肝后易發(fā)生重型肝炎，病死率高；5患病后無(wú)終身免疫作用6尚無(wú)預(yù)防性疫苗可供使用,戊肝,30,30,二、乙型病毒性肝炎,乙肝,（一）病原學(xué),HBV屬嗜肝DNA病毒,土撥鼠肝炎病毒（WHV）地松鼠肝炎病毒GSHV鴨乙型肝炎病毒（DHBV）蒼鷺乙型肝炎病毒（HHBV）,,,31,31,1HBV形態(tài)結(jié)構(gòu),大球形顆粒（DANE顆粒）,小球形顆粒,管形顆粒,,,,32,32,DANE顆粒（完整的病毒）形態(tài),HBSAG,HBCAG,HBVDNA,DNAP,,,,,,,,,（外膜蛋白）,（核衣殼蛋白）,33,33,●小球形顆粒直徑22NM數(shù)量最多●管形顆粒2240～400NM兩者均為過(guò)剩的病毒外殼，僅含HBSAG，無(wú)感染性。,“空心湯團(tuán)”,,2HBV基因組結(jié)構(gòu),PRES1,PRES2,S,P,C,PREC,X,HBVDNA32KB,乙肝,PRES1PRES1蛋白PRES2PRES2蛋白SHBSAGPRECHBEAGCHBCAGPDNAPXHBXAG,,,,,,,,編碼,,,,,,,HBSAG,PRES2,PRES1,,35,35,乙肝,3HBV血清標(biāo)志物及其臨床意義,（1）HBSAG,●出現(xiàn)時(shí)間HBV感染后2～6個(gè)月（潛伏期）,●持續(xù)時(shí)間,,,,曾用名HA、澳抗,急性自限性肝炎6個(gè)月內(nèi)可消失,慢性肝炎或慢性HBSAG攜帶者可持續(xù)陽(yáng)性,現(xiàn)在認(rèn)為HBSAG與CCCDNA滴度呈正相關(guān)，是判斷抗經(jīng)病毒HBVDNA轉(zhuǎn)陰后，肝炎是否復(fù)發(fā)的主要指標(biāo),36,36,●HBSAG有抗原性而無(wú)傳染性,,HBV,S基因,,整合,肝細(xì)胞DNA,,持續(xù)表達(dá),“空心湯團(tuán)”,HBSAG,乙肝,,●HBSAG的亞型,ADR,ADW,AYR,AYW,長(zhǎng)江以北,長(zhǎng)江以南,新疆、西藏、內(nèi)蒙等,,,,,,37,37,乙肝,（2）抗HBS,●出現(xiàn)時(shí)間急性感染后期或HBSAG消失后,（空白期或窗口期）,●抗HBS為保護(hù)性抗體（中和抗體）,其出現(xiàn)標(biāo)志著HBV感染進(jìn)入恢復(fù)期,●抗HBS對(duì)相同HBSAG亞型的HBV再感染有免疫力，但對(duì)不同亞型的HBV保護(hù)力不完全。,38,38,乙肝,（3）HBEAG,HBEAG是HBCAG的降解產(chǎn)物,,,HBVC基因,前C區(qū),C區(qū),,,前C/C蛋白,HBEAG,HBCAG,表達(dá),,,切割、加工,,分泌到細(xì)胞外,,HBEAG只存在于血清中,●HBEAG是病毒復(fù)制和傳染性的標(biāo)志,血清HBEAG陽(yáng)性者中，HBVDNA陽(yáng)性率為92左右,39,39,乙肝,（4）抗HBE,●出現(xiàn)時(shí)間隨著HBEAG的消失而出現(xiàn),●抗HBE的出現(xiàn)標(biāo)志著病毒復(fù)制減少、傳染性降低,,,抗HBE陽(yáng)性者中，163～30左右的患者HBVDNA仍陽(yáng)性可能與前C基因變異有關(guān),,易加重病情、易演變?yōu)楦斡不?Α干擾素療效亦較差,,,,40,40,（5）HBCAG,乙肝,●HBCAG主要存在于HBV感染的肝細(xì)胞內(nèi)或DANE顆粒核心中，到血液中即被降解為HBEAG。,一般血清學(xué)方法檢測(cè)不到HBCAG，而只能檢測(cè)到抗HBC,,（6）抗HBC,1、抗HBCIGM是HBV近期感染或慢性感染者病毒活動(dòng)標(biāo)志,2、抗HBCIGG凡“有過(guò)”HBV感染者均可陽(yáng)性,HBCAG的免疫原性最強(qiáng),持續(xù)時(shí)間6～18個(gè)月,,可終身陽(yáng)性,,41,41,（6）HBVDNA,是病毒復(fù)制和有傳染性最直接的證據(jù),檢測(cè)方法斑點(diǎn)雜交法、PCR法,（7）DNAP（DNA多聚酶）是逆轉(zhuǎn)錄酶也是直接反應(yīng)病毒復(fù)制的指標(biāo)之一,乙肝,（8）HBXAG也可作為病毒復(fù)制的標(biāo)志,HBXAG具有反向激活作用，可調(diào)控病毒基因轉(zhuǎn)錄水平，并對(duì)宿主癌基因可能有激活作用。,42,42,乙肝,●三個(gè)概念,①“兩對(duì)半”,②血清抗原抗體轉(zhuǎn)換率HBEAG抗HBE,,③“轉(zhuǎn)陰”,常用指標(biāo)血清HBEAG抗原抗體轉(zhuǎn)換率HBVDNA陰轉(zhuǎn)率,43,43,乙肝,（二）流行病學(xué),1傳染源主要為急、慢性乙肝患者或病毒攜帶者,,2傳播途徑,水平傳播,最主要途徑是注射或粘膜接觸含HBV的血液及分泌物,性傳播不少見(jiàn)。,密切接觸有可能,飲食傳播可能性較小。,44,44,乙肝,垂直傳播,主要途徑圍產(chǎn)期（新生兒皮膚、粘膜有破損而接觸母血）和產(chǎn)后密切接觸,經(jīng)胎盤及生殖細(xì)胞傳播有可能,,醫(yī)源性傳播,輸血或注射器、血透機(jī)、內(nèi)窺鏡等消毒不嚴(yán)格,垂直傳播是我國(guó)HBV感染的主要模式,,45,45,乙肝,3易感人群,（1）感染者年齡高峰低發(fā)病區(qū)20～40歲,高發(fā)病區(qū)4～8歲,（2）男女感染率相近，但發(fā)病者男多于女,（3）感染時(shí)年齡越小，越易形成慢性肝炎、肝硬化或慢性HBV攜帶狀態(tài)（免疫耐受）。,（4）感染后對(duì)相同HBSAG亞型的HBV再感染有持久免疫力，但對(duì)不同亞型的保護(hù)力不完全。,46,46,乙肝,（三）發(fā)病機(jī)理,,47,47,乙肝,2HBV在體內(nèi)的復(fù)制過(guò)程是一個(gè)逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程,HBVDNA,CCCDNA,前基因組RNA,,,3HBV損傷肝細(xì)胞的機(jī)理,以細(xì)胞免疫介導(dǎo)的肝損傷為主，HBV本身無(wú)細(xì)胞致病性,三類淋巴細(xì)胞參與,NK細(xì)胞不需致敏,CTLCD8主要靶抗原為肝細(xì)胞膜上HBCAG,抗體依賴性淋巴細(xì)胞（ADCC）,抗LSP,抗LMP,,,,自身免疫,48,48,乙肝,（四）臨床特點(diǎn),1潛伏期2～6個(gè)月,急性感染,慢性乙型肝炎,肝硬化,2臨床類型,49,49,乙肝,●慢性HBSAG攜帶者無(wú)臨床癥狀，HBEAG亦可陽(yáng)性。大部分肝組織有病理變化。,,,（五）預(yù)后,●嬰幼兒期感染近90轉(zhuǎn)為慢性,●成年人感染85以上可痊愈，10左右轉(zhuǎn)為慢性,慢性乙肝,肝硬化,肝癌,,,＞10,＞10,“三部曲”,,,,50,50,HBV感染的可能轉(zhuǎn)歸,急性乙肝感染,慢性HBV感染,510成年期感染,95圍產(chǎn)期/嬰幼兒期感染,肝硬化,失代償性肝硬化,肝細(xì)胞癌,,,慢性肝炎,,,5年內(nèi)1220,5年內(nèi)615,5年內(nèi)2023,,10％～30％,FATTOVICHGETALHEPATOLOGY1995LIAWYFETALLIVER1989IKEDAKETALJHEPATOL1998,51,51,三、丙型病毒性肝炎,丙肝,丙肝是經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)國(guó)家病毒性肝炎的主要類型,（一）病原學(xué),HCV是第一個(gè)利用分子生物學(xué)技術(shù)發(fā)現(xiàn)的病毒,原稱“腸道外傳播的非甲非乙型肝炎病毒”,1989年CHIRON公司利用逆轉(zhuǎn)錄酶隨機(jī)引物從受染的黑猩猩血清中成功克隆出與HCVRNA互補(bǔ)的CDNA。,HCV為單股正鏈RNA病毒，可能屬黃病毒屬,,,丙肝,1HCV形態(tài)特征,血清中病毒含量少，直到1991年阿部賢治才在免疫電鏡下觀察到HCV顆粒。病毒直徑36～62NM，球形，與黃病毒相似,2HCV基因組結(jié)構(gòu),HCVRNA全長(zhǎng)約10KB,含三個(gè)編碼區(qū),C區(qū),M區(qū),E區(qū),核心蛋白“C”,基質(zhì)蛋白“M”,外膜蛋白“M”,,,,（高度保守）,（易變）,,●HCV基因型10個(gè)，我國(guó)主要為Ⅱ型,3抗HCV,目前尚無(wú)法檢測(cè)HCV的抗原成份。,抗HCV為非保護(hù)性抗體，陽(yáng)性為病毒感染標(biāo)志,53,53,（二）流行病學(xué),丙肝,傳染源主要為急、慢性丙肝患者和慢性HCV攜帶者,2傳播途徑,主要通過(guò)血液/體液傳播輸血、血透、注射、針刺等；其他性傳播、垂直傳播,3易感人群,人群普遍易感。HCV感染的母親所生嬰兒感染率高健康人群07％～31％，某些地區(qū)獻(xiàn)血員甚至高達(dá)10％以上。,（三）發(fā)病機(jī)理,與乙肝類似，也以免疫介導(dǎo)的肝損傷為主,54,54,（四）臨床特點(diǎn),潛伏期2～26周，平均8周,①隱性感染者及慢性無(wú)癥狀HCV攜帶者多見(jiàn),②急性丙肝較少見(jiàn),③慢性丙肝表現(xiàn)酷似慢性乙肝，但起病較隱匿，臨床癥狀及ALT升高水平較乙肝輕。,,（五）預(yù)后,HCV感染極易轉(zhuǎn)為慢性,,HCV感染慢性化率為40～50，有報(bào)道高達(dá)875,30～50的慢性HCV感染者發(fā)展為肝硬化,HCV感染者肝癌發(fā)生率也明顯高于乙肝,四、丁型病毒性肝炎,丁肝,（一）病原學(xué),HDV，又稱Δ因子。為單股負(fù)鏈RNA病毒。,,,HDV為缺陷病毒，必須依賴嗜肝DNA病毒才能復(fù)制。,,1HDV形態(tài),直徑35～37NM,核心為HDVRNA和HDAG,表面包裹HBSAG,2HDAG和抗HDV,HDAG是HDV感染的直接標(biāo)志,抗HDVIGM是HDV早期感染標(biāo)志,慢性HDV感染時(shí)，兩種抗體可長(zhǎng)期共存,抗HDVIGG是HDV既往感染的標(biāo)志,56,丁肝,（二）流行病學(xué),1傳染源急、慢性丁肝病人及慢性HBV/HDV攜帶者。,2傳播途徑同HBV我國(guó)似以密切接觸傳播為主。,3易感人群,COINFCTION未受HBV感染的人群,SUPERINFECTION已受HBV感染的人群,,,（三）發(fā)病機(jī)理,可能既有病毒的直接作用，也有宿主免疫反應(yīng)介導(dǎo),57,丁肝,（四）臨床表現(xiàn)及預(yù)后,HBV感染者混合或重疊感染HDV后,易加重病情,易慢性化,易演變?yōu)楦斡不?易發(fā)展為肝癌,58,58,五型肝炎病毒簡(jiǎn)要對(duì)照,,HAVHBVHCVHDVHEV基因組RNADNARNARNARNA傳播途徑消化道血液/體液血液/體液血液/體液消化道慢性化否否是是是否血清學(xué)抗HAVIGMHBVM抗HCVHDAG抗HEVIGM檢測(cè)抗HAVIGG抗HDVIGM抗HDVIGG,,,,第二部分病毒性肝炎的臨床類型及診斷,急性肝炎,急性無(wú)黃疸型、急性黃疸型,慢性肝炎,輕度、中度、重度,重型肝炎,急性重型肝炎亞急性重型肝炎慢性重型肝炎,分早、中、晚期,淤膽型肝炎,肝炎肝硬化活動(dòng)性，非活動(dòng)性；代償期，失代償期,,,,,,,60,60,病毒性肝炎臨床診斷格式舉例,病毒性肝炎，甲型（或甲型和乙型同時(shí)感染），急性無(wú)黃疸型（或急性黃疸型）病毒性肝炎，乙型（或乙型和丁型重疊感染），慢性（中度），G2S3病毒性肝炎，丙型，慢性重型，腹水型，中期急性肝炎（或慢性肝炎），病原未定,61,61,一、急性病毒性肝炎,（一）急性病毒性肝炎的病理特點(diǎn),急性黃疸型與急性無(wú)黃疸型肝炎病理表現(xiàn)基本相同，但后者相對(duì)較輕。,病理特點(diǎn)肝細(xì)胞壞死不嚴(yán)重，以肝細(xì)胞水腫、氣球樣變和嗜酸性變性為特點(diǎn)，可有點(diǎn)狀壞死和灶性壞死。,黃疸型者可有毛細(xì)膽管擴(kuò)張或含膽栓。,第三部分病毒性肝炎的病理特點(diǎn)及臨床表現(xiàn),62,62,（二）急性病毒性肝炎的臨床表現(xiàn),HAV和HEV多見(jiàn)（發(fā)熱、黃疸亦多見(jiàn)），HBV、HCV和HDV較少見(jiàn),急性病毒性肝炎多為自限性，自然病程2～3個(gè)月,,急性肝炎,1急性黃疸型肝炎（ACUTEICTERICHEPATITIS）,特征發(fā)熱、乏力、納差、厭油、黃疸及肝功異常,,臨床分三期黃疸前期、黃疸期、恢復(fù)期,,63,63,各期主要表現(xiàn),1黃疸前期,發(fā)熱及上感樣癥狀熱程多腎心肌肉●血清ALT升高程度與肝損傷程度不平行●意義對(duì)判定急、慢性肝炎有一定幫助,二、肝功能檢查,85,85,（2）門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST/GOT）,●AST明顯升高者提示肝細(xì)胞損傷較嚴(yán)重,,ALT胞漿內(nèi)；AST線粒體內(nèi),,,（3）ΓGT和ALPAKP,兩者均是反應(yīng)膽汁淤積的指標(biāo),慢性肝炎、肝硬化輕中度升高；原發(fā)性膽汁性肝硬化、肝癌、膽管癌等明顯升高，,ΓGT肝細(xì)胞膜結(jié)合ALP肝細(xì)胞胞漿和肝內(nèi)膽管上皮中,,,二、肝功能檢查,,86,86,2膽紅素測(cè)定,（1）血清膽紅素,●血清總膽紅素升高水平可反應(yīng)肝細(xì)胞損傷程度●直接膽紅素占總膽紅素的比例對(duì)判斷黃疸性質(zhì)有一定幫助,,（2）尿二膽,●尿膽紅素均為結(jié)合膽紅素●尿膽素元急黃肝高峰期或淤膽性肝炎及膽道梗阻時(shí)，尿膽元可陰性,二、肝功能檢查,87,87,3甲胎蛋白（AFP）,●急性肝炎一般不升高●慢性肝炎及肝硬化可升高，但病情好轉(zhuǎn)后降低●重型肝炎可升高，預(yù)后較好●診斷PHC500NG/ML，4周以上200～500NG/ML，8周以上,4白蛋白、球蛋白,●白蛋白水平有助于判斷肝臟儲(chǔ)備功能●球蛋白水平對(duì)判定是否為慢性肝炎病毒感染有幫助●白/球比例不宜作為判斷肝纖維化及療效的指標(biāo),,二、肝功能檢查,88,88,5凝血酶原時(shí)間（PT）和凝血酶原活動(dòng)度（PTA）,★PT和PTA可以敏感地反應(yīng)肝臟損害的嚴(yán)重程度,VITK依賴性凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ主要由肝臟合成的凝血因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ、ⅩⅦ因子半衰期最短PT主要檢測(cè)外源性凝血系統(tǒng)中Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ等活性,,●正常值PT12～16秒,PTA＝,,303,PT87,100（80～100）,PTA20時(shí)可自發(fā)性出血，10時(shí)預(yù)后惡劣,淤膽,,維生素K糾正試驗(yàn),三、病毒感染血清標(biāo)志物的臨床檢測(cè)及意義,（一）甲肝,病毒培養(yǎng)及電鏡檢測(cè)目前在臨床上均不能常規(guī)開展,抗HAVIGM（ELISA法）是目前診斷急性甲肝最可靠、最敏感、應(yīng)用最廣的方法?？笻AVIGG主要用于人群感染率的調(diào)查,（五）戊肝,抗HEVIGM可用于急性戊肝的早期診斷?？笻EVIGG可用作回顧性診斷及流行病學(xué)調(diào)查。,90,90,⑴HBSAG與抗HBSHBSAG陽(yáng)性表明是HBV的現(xiàn)癥感染，但陽(yáng)性并不能肯定有傳染性。HBSAG持續(xù)時(shí)間急性自限性感染1～6周慢性患者或無(wú)癥狀攜帶者HBSAG存在的部位血液、各種體液和分泌物如精液、唾液、尿液等?？笻BS是一種保護(hù)性抗體，接種乙肝疫苗可產(chǎn)生抗HBS,（二）乙肝,●1“兩對(duì)半”的意義判定有無(wú)傳染性,,,91,91,,（2）HBEAGE抗原①是HBV活動(dòng)性復(fù)制和有傳染性的重要指標(biāo)。前C區(qū)基因發(fā)生突變時(shí)，HBEAG可為陰性而HBV仍在復(fù)制。②抗HBE在自限性肝炎時(shí)，在HBEAG轉(zhuǎn)陰后，抗HBE出現(xiàn)，表示HBV復(fù)制減少,92,92,,3核心抗原（HBCAG）與核心抗體（抗HBC）HBCAG的意義HBCAG為HBV復(fù)制的標(biāo)記。IGM抗HBC與IGG抗HBCIGM抗HBC只存在于急性和慢性肝炎急性發(fā)作期。IGG抗HBC低滴度為過(guò)去感染的標(biāo)志高滴度提示活動(dòng)性復(fù)制。窗口期當(dāng)HBSAG已消失而抗HBS未出現(xiàn)，只檢測(cè)到抗HBC時(shí)，稱窗口期。,兩對(duì)半知識(shí)要點(diǎn)總結(jié)抗HBS是保護(hù)性抗體，出現(xiàn)后提示病毒已清除，病情恢復(fù)。HBEAG是病毒復(fù)制指標(biāo)，陽(yáng)性者肯定有傳染性，但陰性者不能否定有病毒復(fù)制?？笻BE單看其陽(yáng)性與否意義不大，應(yīng)結(jié)合HBVDAN檢測(cè)?？笻BCIGM（＋）提示近期有急性HBV感染或慢性感染者病毒復(fù)制活躍。抗HBCIGG（＋）凡有過(guò)HBV感染者均可陽(yáng)性，單憑此不能判斷目前HBV的感染狀態(tài)。,2HBVDNA,（＋）是病毒感染的直接證據(jù),,（）提示病毒復(fù)制水平低或已清除,94,,95,,（三）丙肝,抗HCV不是保護(hù)性抗體，陽(yáng)性者有傳染性抗HCVIGM無(wú)早期診斷價(jià)值，持續(xù)陽(yáng)性預(yù)示慢性化或重癥化HCVRNA是HCV感染和有傳染性的直接證據(jù)，治愈后消失,（四）丁肝,病毒性質(zhì)缺陷病毒，在血液中由HBSAG包被，內(nèi)含單股環(huán)狀閉合RNA組成。只有一個(gè)抗原抗體系統(tǒng)。HDAG和HDVRNA均是HDV感染的直接證據(jù)抗HDVIGM用于早期診斷，也是診斷慢性HDV感染的敏感指標(biāo)。,97,97,四、病理學(xué)檢查,常用方法肝穿刺活檢術(shù)普通HE染色、免疫組化染色,五、其他檢查B超、CT、MRI等,98,明確回答是不是是什么流行病學(xué)資料臨床診斷病原學(xué)診斷注意無(wú)癥狀HBV攜帶者，準(zhǔn)確推斷肝炎的病程對(duì)選擇制定治療方案和判斷預(yù)后都非常重要。,在急性或慢性肝炎的基礎(chǔ)上，如出現(xiàn)①黃疸進(jìn)行快速升高數(shù)天內(nèi)達(dá)171?MOL/L以上；②乏力及消化道癥狀進(jìn)行性加重；③酶膽分離；④PT進(jìn)行性延長(zhǎng)，PTA降低。,其中，重肝的早期診斷依據(jù),第五部分病毒性肝炎的診斷與鑒別診斷,99,【鑒別診斷】,㈠其他原因引起的黃疸⒈溶血性黃疸G6PD缺乏癥葡萄糖6磷酸脫氫酶缺陷⒉肝外梗阻性黃疸例如，膽結(jié)石。㈡其他原因引起的肝炎⒈其他病毒引起肝炎EBV和CMV⒉感染中毒性肝炎敗血癥、恙蟲病和鉤端螺旋體病⒊藥物引起肝損害異煙肼、利福平⒋酒精性肝炎長(zhǎng)期酗酒5肝豆?fàn)詈俗冃?自身免疫性肝炎7寄生蟲,100,問(wèn)題,診斷HAV急性感染的指標(biāo)是什么HBV損傷肝細(xì)胞的機(jī)理乙肝“兩對(duì)半”的概念及意義什么是病毒復(fù)制和有傳染性最直接的證據(jù)什么叫“轉(zhuǎn)陰”,100,甲肝、戊肝只有急性肝炎乙肝、丙肝既有急性，也有慢性，但以慢性為多；,中醫(yī)治療急性肝炎的思路與方法,