簡介：天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文副粘病毒TIANJIN株主要蛋白在真核細(xì)胞中的表達(dá)及其反向遺傳學(xué)的初步研究姓名王文秀申請學(xué)位級別碩士專業(yè)病原生物學(xué)指導(dǎo)教師李梅20090501天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文雞胚尿囊液中病毒RNA，RTPCR擴(kuò)增出NP和P基因，構(gòu)建了真核表達(dá)載體PCDNA31NP和PCDNA31P。用融合PCR法擴(kuò)增出L基因。將質(zhì)粒PCDNA31NP和PCDNA31一P轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞。應(yīng)用間接免疫熒光法和WESTEMBLOT法檢測到NP蛋白的穩(wěn)定表達(dá)。為進(jìn)一步研究NP蛋白的功能和利用反向遺傳學(xué)技術(shù)重組副粘病毒TI枷IN株，研究其跨種傳播和高致病性奠定了基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞副粘病毒TIANJIN株HN蛋白NP蛋白L蛋白穩(wěn)定表達(dá)WESTERNBLOT紅細(xì)胞吸附II

簡介：分類號河南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文密級論文題目華南地區(qū)豬繁殖與呼吸綜合征病毒的分子流行病學(xué)研究及N蛋白單克隆抗體的制各英文題目MOLECULAREPIDEMIOLOGYINVESTIGATIONOFPRRSVINSOUTHCHINAANDPREPARATIONOFMONOCLONALANTIBODIESAGAINSTNPROTEIN學(xué)位申請人毖至態(tài)導(dǎo)師塞籃繾嬰窺員夏堊塞教援專業(yè)亟隨獸醫(yī)堂研究方向查盒疫痘筮王疸丞堂論文提交日期20L35學(xué)位授予日期20135致謝時光荏苒，歲月如梭，轉(zhuǎn)眼研究生三年的生活和學(xué)習(xí)即將結(jié)束，在這里我要感謝支持和幫助過我的老師、同學(xué)、家人和朋友們。本文是在我尊敬的導(dǎo)師宋長緒研究員和夏平安教授的悉心指導(dǎo)下完成的。三年的生活和學(xué)習(xí)，兩位恩師幫助我解決了許多生活和學(xué)習(xí)上的困難，這令我一生難以忘懷。恩師博大精深的學(xué)識，熱情待人和嚴(yán)于律己的生活原則，兢兢業(yè)業(yè)的工作態(tài)度，平易近人的品德以及愛生如子的高尚師德使我由衷敬佩。在論文即將付梓之際特向兩位恩師致以最崇高的敬意和最衷心的感謝本論文是在廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)研究所豬病研究室完成的，在開題及中期考核時，師兄蔣志勇、蔡汝建、張樂宜、梁鵬帥，師姐李艷、孫瑞芹、劉燕玲，同學(xué)吳堅文、冷章明，師妹孟張麗，師弟王栓群等給予了無私的幫助和關(guān)懷，本人在此表示感謝。感謝廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)研究所給我提供生活和學(xué)習(xí)的條件，感謝孫銘飛副研究員，戚南山等在在實(shí)驗(yàn)上的幫助和指導(dǎo)。感謝導(dǎo)師組崔保安教授、吳志明研究員、張紅英副教授、趙軍教授、授、王學(xué)兵副教授、王文泉等副教授的教誨和關(guān)懷向哺育和培養(yǎng)我的母校和傳授我知識的全體老師致以崇高的敬意，處、院黨總支、院行政的領(lǐng)導(dǎo)和老師們表示衷心的感謝菅復(fù)春副教向校研究生感謝好友以及牧醫(yī)工程學(xué)院2010級其他研究生，感謝你們給予我的幫助和支持特別感謝我的父母、妹妹以及所有親人，感謝他們?yōu)槲业那髮W(xué)之路做出的巨大犧牲和最無私的奉獻(xiàn)最后，向三年來所有關(guān)心、支持和幫助過我的人們表示崇高的敬意和衷心的感謝，我所取得的一切進(jìn)步都?xì)w功于你們

簡介：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文藍(lán)狐細(xì)小病毒泰安株分子生物學(xué)特征研究及其TAQMAN熒光定量PCR檢測方法的建立姓名劉海防申請學(xué)位級別碩士專業(yè)臨床獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師謝之景20090616藍(lán)狐細(xì)小病毒泰安株分子生物學(xué)特征研究及其TAQMAN熒光定量PCR檢測方法的建立VPL、VP2和NSL基因序列分析以及系統(tǒng)發(fā)生分析表明，BFPVTA是介于FPV與CPV間的過度類型，說明狐貍可能在CPV的起源過程起到重要的作用。3根據(jù)BFPVVP2基因的保守基因序列設(shè)計合成了引物和探針，對熒光定量PCR的反應(yīng)條件進(jìn)行了優(yōu)化，建立TBFPV的TAQMAN熒光定量PCR檢測方法。用該方法對遼寧、山東等地的疑是藍(lán)狐細(xì)小病毒的病料進(jìn)行了檢測。結(jié)果，該方法的陽性檢出率最高，并且與VI、HA和常規(guī)PCR檢測方法的陽性符合率為100％。試驗(yàn)證明，該方法具有特異、敏感、快速的特點(diǎn)，為BFPV的臨床檢測和流行病學(xué)調(diào)查提供了新的技術(shù)手段。關(guān)鍵詞藍(lán)狐細(xì)小病毒；VPL基因；VP2基因；NSL基因；序列分析；實(shí)時定量PCR；TAQMAN熒光探針2

簡介：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文豬瘟病毒E2蛋白單克隆抗體的制備及其生物學(xué)特性的研究姓名張春玲申請學(xué)位級別碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師余為一20090601單抗C3識別的抗原表位位于序列TAVSPTTLRT之間，該結(jié)果需利用噬菌體展示技術(shù)進(jìn)一步證實(shí)。綜上所述，本研究構(gòu)建了E2原核表達(dá)的重組質(zhì)粒，成功制備了兩株針對CSFVE2蛋白的單克隆抗體，建立了單克隆抗體生物學(xué)特性鑒定及其相應(yīng)抗原表位的篩選方法，這些研究將為CSFV新型疫苗研制和診斷試劑開發(fā)奠定基礎(chǔ)，也為進(jìn)一步研究CSFVE2蛋白的結(jié)構(gòu)、功能、抗原表位建立一定的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞豬瘟病毒E2蛋白，原核表達(dá)，單克隆抗體，鑒定

簡介：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文四省區(qū)雞傳染性支氣管炎病毒M、N基因分子流行病學(xué)研究姓名時莉申請學(xué)位級別碩士專業(yè)基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師阿合買提買買提20090401MOLECULAREPIDEMIOLOGYOFMANDNGENESOFINFECTIOUSBRONCHITISVIRUSISOLATEDINFOURPROVINCESOFCHINAABSTRACTINTHISSTUDY，INFECTIOUSTISSUESGLANDULARIS，KIDNEY，CECALTONSIL，OVIDUCT，TRACHEAFROMPOULTRYFARMSANDHOUSEHOLDSINZHEJIANGANDANHUIPROVINCESWERECOLLECTEDTHENINOCULATEDINTOTENDAYOLDSPFEMBRYONATEDEGGSANDPASSAGED26，ISOLATEDNINEALTOGETHERTHEGROSSLESIONSOFTHEINFECTEDEMBRYOSWEREDWARFING，CURLINGANDHAEMORRHAGETHEINFECTEDALLANTOICFLUIDCOULDNOTDIRECTLYAGGLUTINATE1％CHICKENERYTHROCYTESNINEIBVISOLATESWEREFINALLYIDENTIFIEDBYRTPCRSEQUENCESOFMGENEANDNGENEOFTHIRTYTWOIBVSTRAINSISOLATEDFROMSHANDONG，ANHUI，ZHEJIANG，SICHUANPROVINESOFCHINAWEREAMPLIFIEDBYREVERSETRANSCRIPTASEPOLYMERASECHAINREACTIONRTPCR，ANDTHENWERECLONED，SEQUENCEDANDCOMPAREDWITHOTHERIBVSEQUENCESPUBLISHEDINGENBANK，ILLUSTRATETHEPHYLOGENETICRELATIONSHIPSBETWEENOURISOLATESANDREFERENCESTHATFROMCHINAANDABROADTRACEDTHESOURCEOFDOMESTICIBVISOLATESSEQUENCESALIGNMENTBASEDONMGENEOFTHIRTYTWOIBVSTRAINSSHOWEDTHATTHEORFOFMGENEOFTWENTYFIVEISOLATESWERECOMPOSEDOF678BP，ANDAUSTRALIA“T’WASCOMPOSEDOF669BP；ZJ981ANDIBVJWERE672BP；JH051ANDIBVWWERE681BP，JH06111，JH06011ANDJD071201WERE711BPTOTAKETHELENGTHOF225AMINOACIDSAAOFH52MGENEASAREFERENCE，ATTHE5’一TERMINAL，WEFOUNDTHATAUSTRALIA“R’STRAINHASADELETIONOFTHREE；ZJ981ANDIBVJHAVEADELETIONOFTWOAA，JH051ANDIBVWHAVEONEAAINSERTION；JH061L1，JH06011ANDJD071201HAVEALLINSERTIONOFTENAAFROMTHESITEOFELEVENTHAMINOACIDSATITS5’TERMINALBESIDESTHE5’一TERMINAL27AMINOACIDSOFMGENEOFTHEIBVSTRAINSSHOWEDGREATERVARIATIONTHANTHERESTPART，THEREAREALSOMANYAMINOACIDSALTERATIONSATTHEOTHERPARTSOFTHEMGENEWHICHINDICATETHATIBVMGENEALSOEXISTVARIATIONATDIFFERENTDEGREEⅡ

簡介：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文蕪菁花葉病毒的種群遺傳學(xué)與水稻黑條矮縮病毒山東分離物的分子特性姓名陳佳申請學(xué)位級別碩士專業(yè)植物病理學(xué)指導(dǎo)教師李向東20090617蕪菁花葉病毒的種群遺傳學(xué)與水稻黑條矮縮病毒山東分離物的分子特性增片段長1801BP，其中5UTR為2LBP，3UTR長度為103BP，中間為1677BP的開放閱讀框221698，編碼558個氨基酸的衣殼蛋白。在根據(jù)S10片段序列構(gòu)建的系統(tǒng)樹中，這4個分離物和GENBANK中的其它14個RBSDV分離物可分為A、B兩組，其中A組又可分為兩個亞組。重組分析發(fā)現(xiàn)LYM2可能是由ZHJS和LYM1重組得來的。關(guān)鍵詞蕪菁花葉病毒；水稻黑條矮縮病毒；種群統(tǒng)計學(xué)；核苷酸多樣性；系統(tǒng)進(jìn)化2

簡介：揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文Ⅰ群禽腺病毒纖突KNOB區(qū)域基因序列同源性分析及病毒部分生物學(xué)特性研究姓名陳躍申請學(xué)位級別碩士專業(yè)基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師秦愛建20090601陳躍I群禽腺病毒纖突KNOB區(qū)域基因序列分析及病毒生物學(xué)特性研究子顯微鏡觀察病毒形態(tài)、并通過血凝特性、致雞胚腎細(xì)胞CEK病變、致雞胚病變等進(jìn)行研究。結(jié)果表明FAVIJS的右側(cè)ITR序列PCR擴(kuò)增結(jié)果呈陽性；該病毒形態(tài)呈球形、無囊膜，直徑為7080NRN；不凝集雞的紅細(xì)胞；雞胚腎細(xì)胞接種后35天，細(xì)胞表現(xiàn)出較強(qiáng)的聚集性并形成細(xì)胞團(tuán)，有的成束狀，最后脫落910日齡雞胚攻毒后46天，胚體死亡、發(fā)育阻滯、呈丸形、被毛稀少，頭項、四肢末端充血、出血。用FAVIG24YZ0605株鵝源I群禽腺病毒靜脈接種于14日齡的SPF雛雞，分別在攻毒后每隔兩天撲殺，攻毒組和對照組各2只進(jìn)行檢測。結(jié)果表明攻毒后不同日齡雛雞病變以急性壞死性肝炎為主；肝細(xì)胞可見嗜堿性、形狀不規(guī)則的核內(nèi)包涵體。本研究結(jié)果提示，鵝源I群禽腺病毒FAVIG24YZ0605株具有一定的致病性，可引發(fā)SPF雛雞包涵體肝炎。關(guān)鍵詞I群禽腺病毒；纖突KONB序列分析；致病性；SPF雞

簡介：分類號密級河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)術(shù)博士學(xué)位論文英文題目ETIOLOGY,DETECTIONMETHODSANDVACCINEDEVELOPMENTFORPORCINEANDENCEPHALOMYOCARDITISVIRUSWILDISOLATEFROMHENAN邑寸專論文提交日學(xué)位授予日致謝歲月如梭，博L學(xué)位攻讀生涯轉(zhuǎn)瞬即逝，行將畢業(yè)之際，在這個落櫻繽紛的初夏，回顧四年來充實(shí)、緊張的學(xué)習(xí)和工作生活，歷歷在目，恍如昨日。在收獲太多無價知識的同時，處處充滿著感激、感恩和感謝，以及自己對人生新的感悟??非常感謝導(dǎo)師王川慶教授多年來在教學(xué)、科研、學(xué)習(xí)和生活中給予的如恩師慈父般的諄諄教誨和無微關(guān)愛。導(dǎo)師孜孜不倦的求索精神，嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)態(tài)度，淵博}，F(xiàn)勺學(xué)識，敏銳的科研洞察力以及忘我的工作精神和樂觀向上、謹(jǐn)己寬人的人生態(tài)度令我終生膜拜這將是我今后做人、做事、做學(xué)問的航標(biāo)，恩師所賜予的是我一生中最大的財富，再次向?qū)熗醮☉c教授致以最崇高的敬意和最真心的感謝感謝河南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物傳染病實(shí)驗(yàn)室提供的一流的學(xué)術(shù)環(huán)境和實(shí)驗(yàn)條件。感謝本組的陳陸教授、趙軍教授、王澤霖教授、楊霞副教授、王新衛(wèi)副教授、姚惠霞老師、李永濤老師和李曉峰老師等在實(shí)驗(yàn)、工作和生活中給予的無私指導(dǎo)。感謝本組科研助理杜季梅、王永生、高冬生、鄭鹿平和黃慧敏，本組博士研究生彭志峰和周峰，碩士研究生趙永祥、楊盼盼、盧彩景、鄭關(guān)民和李棟梁等，河南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物疫病檢測中心的李鴻雁、趙小利和李孟等為本課題研究所給予的幫助；特別感謝本實(shí)驗(yàn)室科研助理郭占達(dá)和河北師范大學(xué)碩士研究生顏琪為本課題研究所作出的突出貢獻(xiàn)。感謝河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院的崔保安教授、張龍現(xiàn)教授、程功鵬書記、楊目宇教授、寧長申教授、李明教授、李奎教授、梁宏德教授、許蘭菊教授、夏平安教授、胡功政教授、鄭振宇教授、賀秀媛副教授、張紅英副教授、仝宗喜副教授、菅復(fù)春副教授和牛娟副書記，感謝河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院全體同仁在課題實(shí)施過程中給予的關(guān)心、支持與幫助。感謝南京農(nóng)業(yè)大學(xué)姜平教授和四JIL農(nóng)業(yè)大學(xué)徐志文教授在試驗(yàn)材料上給予的無私幫助。感謝我的同學(xué)李國權(quán)、耿娟、史西保、王林青、楊鵬坤、邵運(yùn)輝、周波、馬興立、王寧和張穎舉等博士研究生在共同求學(xué)和生活中給我的關(guān)心和快樂。感謝參加我論文評閱和答辯的各位專家、教授的悉心指導(dǎo)。同時，致謝在實(shí)驗(yàn)進(jìn)展中給予無私幫助的洛陽市宜陽縣鵝宿種豬場吉國昌先生、駐馬店市西平縣豐源種豬場張寧博士和周口市西華縣富遠(yuǎn)種豬場的夏丹先生。深深感謝我的父母含辛茹苦的養(yǎng)育之恩，妻子劉慧敏女士默默無聞的的理解和支持，以及所有親友的鼓勵和關(guān)懷。回首往事，我將心懷感恩，致以最誠摯的謝意繼續(xù)努力，不斷前行

簡介：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文一株高致病性雞傳染性貧血病毒的生物學(xué)及基因組特性姓名王林申請學(xué)位級別碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師崔治中20090613一株高致病性雞傳染|生貧血病毒的生物學(xué)及基因組特性的樣品檢出率為10O％7／70。結(jié)果顯示，2060日齡的檢出率顯著高于120日齡和60日齡以上的，而20一60日齡段是疾病的高發(fā)階段。其中，從自山東某商品代肉雞場20日齡病雞群表現(xiàn)生長遲緩，疑似雞傳染性貧血病病毒CAV感染的脾臟、胸腺、骨髓樣品提取DNA，分別經(jīng)斑點(diǎn)雜交檢測為CAV陽性后，其余病料研磨上清經(jīng)處理后接種7日齡SPF雞胚和1日齡SPF雞，提取接種后的雞胚和SPF雞的脾臟組織DNA，經(jīng)斑點(diǎn)雜交驗(yàn)證為陽性，從而成功分離到了一株雞傳染性貧血病毒野毒株，命名為CAVSDLY08株。用PCR方法分段擴(kuò)增出CAVSDLY08基因組的三條部分重疊片段，分別克隆于T載體并進(jìn)行測序，拼接后得到其全基因組序列。結(jié)果表明，SDLY08株基因組全長2298NT，含有三個互相重疊的開放閱讀框和一個調(diào)控區(qū)。將SDLY08全基因與已發(fā)表的8個CAV分離株基因組比較，同源性為966％99O％。CAV的三個編碼基因VPL、VP2和VP3所編碼的氨基酸均有一定程度變異，以VPL基因編碼的氨基酸變異性最大，同源性為969％990％將CAVSDLY08株接種感染1、7、21日齡SPF雞，研究其致病性。通過口服和肌肉注射兩種途徑分別感染1、7、21日齡SPF雞，12天后對每組SPF雞體重、免疫器官指數(shù)和血液指標(biāo)進(jìn)行測定。體重增重方面感染12天后，1、7曰齡感染組的體重顯著低于對照組PO05。21日齡感染組體增重也低于對照組，但差異不顯著PO05，兩種感染方式的差異也不顯著。免疫器官指數(shù)方面感染12天后，不同日齡的感染均能引起脾臟的腫大，1日齡感染的口服組和注射組與對照組比差異顯著P005，且感染途徑影響不大。3個日齡感染都能引起胸腺的顯著萎縮，且不同的感染日齡和感染方式的實(shí)2

簡介：中山大學(xué)碩士學(xué)位論文石斑魚虹彩病毒與弧菌聯(lián)合疫苗免疫效果及免疫學(xué)評價姓名唐晶晶申請學(xué)位級別碩士專業(yè)食品安全生物學(xué)指導(dǎo)教師何建國20090603對照組IL．1P的表達(dá)水平急劇上升，顯著高于免疫組，之后逐漸下降；攻毒前IGM在脾臟和頭腎有較高的表達(dá)水平，攻毒后IGM在脾臟中出現(xiàn)了不同程度的下調(diào)，在頭腎和肝臟中免疫組與對照組差異不明顯；攻毒后對照組L粥在各組織中顯著高于免疫組，在肝臟中上調(diào)幅度最大，頭腎次之，脾臟最??；攻毒后對照組ND2在各組織中的表達(dá)水平與免疫組差異不顯著；病毒攻毒后№表達(dá)水平顯著高于免疫組，而細(xì)菌攻毒后與免疫組之間未出現(xiàn)顯著差異。結(jié)果表明攻毒后可以顯著提高石斑魚對照組3種組織中與抗菌和抗病毒免疫相關(guān)基因的表達(dá)，從而抵御細(xì)菌和病毒病原的感染。免疫組攻毒后變化不顯著，可能是因?yàn)槊庖吆篝~體免疫機(jī)制發(fā)生了相應(yīng)變化，非特異性免疫因子的免疫作用處于非主要地位。關(guān)鍵詞聯(lián)合疫苗；石斑魚；免疫效果；免疫相關(guān)基因；基因表達(dá)Ⅱ

簡介：論文編號洳≥J、博士學(xué)位論文⑧論文題目猹厘鼠兔的△型流盛逋在痘堂塑痘壹堂盆撫所在學(xué)院動物科堂堂院提交EL期三QQ九生土目中國杭州單位代碼Q蘭圣5研究生學(xué)號10517029EPIDEMIOLOGYANDVIROLOGYANALYSISOFINFLUENZAAVIRUINSWIMANDPIKVIVUSSWINEANDIKASBYSUNWENBOSUPERVISORPROFESSORZHOUJIYONGADISSERTATIONFORDOCTOR’SDEGREESUBMITTEDTOTHEFACULTYOFGRADUATESCHOOL，ZHEJIANGUNIVERSITYCOLLEGEOFANIMALSCIENCEZHEJIANGUNIVERSITYHANGZHOU，ZHEJIANGJULY2009

簡介：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文馬立克氏病病毒野毒株GX0101及其基因敲除株BAC克隆生物學(xué)活性的比較研究姓名孫愛軍申請學(xué)位級別博士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師崔治中20090617馬立克氏病病毒野毒株GX0101及其基因敲除株BAC克隆生物學(xué)活性的比較研究．．2．1KB的同源臂來自質(zhì)粒PDS．PHAI，4．0KB同源臂來自質(zhì)粒PUS2PARTIALF，通過限制性內(nèi)切酶HINDLII和XHOI的雙酶切作用，及T4DNALIGATION連接，成功構(gòu)建重組轉(zhuǎn)基因載體質(zhì)粒PDSPHAIUS2。2．2GX0101BAC感染性克隆的構(gòu)建及其拯救利用磷酸鈣或脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù)，將轉(zhuǎn)移載體PDSPHAIUS2與MDVGX0101感染CEF細(xì)胞的總DNA共感染雞胚成纖維細(xì)胞。待出現(xiàn)細(xì)胞病變時，將其傳至已加有霉酚酸．黃嘌呤．次黃嘌呤選擇培養(yǎng)基的原代CEF上，經(jīng)四輪篩選、富集重組病毒后，提取重組病毒感染CEF細(xì)胞的總DNA，電轉(zhuǎn)化大腸桿菌DHL0B。次日，挑取陽性克隆。經(jīng)酶切及PCR鑒定后，提取BACDNA轉(zhuǎn)染CEF細(xì)胞，再次啟動了病毒感染，產(chǎn)生了MDV特異性病毒蝕斑，拯救出了重組病毒；進(jìn)一步研究表明重組病毒BAC．GX0101與親本毒GX0101在體外CEF單層上的生物學(xué)特性相似。2．3GX0101感染性克隆的致病性比較將BAC克隆毒BAE．GX0101與親本毒GX0101接種1日齡SPF雞，動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明BAE．GX0101毒株與親本GX0101毒株對機(jī)體的生長性能等方面的影響沒有差異，而且BAE．GX0101毒株仍然保留著很好的免疫抑制功能及致腫瘤能力。該感染性克隆BAC．GX0101為研究該重組野毒株中REVLTR插入片段及其他基因的生物學(xué)功能提供了有用的技術(shù)平臺。3敲除REVLTR的感染性克隆的構(gòu)建及其生物學(xué)特性比較3．1MDV天然重組野毒株GX0101中LTR序列的敲除MDV和REV間的自然重組的機(jī)率是很低的，在我們近幾年分離到的十多個野毒株中，卻有兩個是重組病毒，說明這一重組過程一定有某種選擇競爭性優(yōu)勢。為了闡明天然重組插入的REVLTR究竟能給原始的MDV帶來什么生物學(xué)特性變化，對基因組做相應(yīng)的突變是必經(jīng)的步驟。將GX0101構(gòu)建成感染性細(xì)菌人工染色體，由于我們可以比較方便地對感染性克隆質(zhì)粒GX0101．BAC基因組進(jìn)行修飾，如定點(diǎn)敲除重組野毒株中某個基因或基因片段。這就可以用其作為研究該株MDV的特定基因或基因片段與致病性或其他生物學(xué)活性關(guān)系的一個新的技術(shù)平臺。本研究利用RED／ET介導(dǎo)的突變技術(shù)，用卡那霉素抗性基因代替要敲除的LTR序列。設(shè)計引物，以質(zhì)粒PKDL3為模板，擴(kuò)增卡那霉素抗性基因。這對引物3’端20個堿基來源于卡那霉素抗性基因，用來擴(kuò)增該抗性基因，5’端50個堿基來源于MDV，用來同源重組，上下游引物5’端的這50個堿基來源于MDV基因組，分別位于要敲除的LTR序列的兩端。卡那霉素抗性基因兩端FRT位點(diǎn)是重組酶FLPE的識別位點(diǎn)?？敲顾乜剐曰蛉〈鶯TR序列后，用O．1％的阿拉伯糖誘導(dǎo)表達(dá)FLPE重組酶，從而將卡那霉素抗性基2

簡介：揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文一株CLASSⅠ新城疫病毒的分離鑒定及生物學(xué)特性初步研究姓名陳飛申請學(xué)位級別碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師王志亮劉秀梵20090601揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文2等毒株15192BP在NP基因非編碼區(qū)，全基因組1647“1648NT比ND08004株多6個核苷酸。ND08004與7株CLASSIINDV毒株V4、B1、LASOTA、MUKTESWA、HERTS／33、刀1、SF02在0、55NT位的LEADER序列的同源性在855％～891％之間，與DER49D9株在該段基因序列的同源性為945％，7株CLASSIINDV毒株的該片段基因序列的同源性在855％“982％之間。ND08004與V4、B1、LASOTA、MUKTESWA、HERTS／33在15073““15L86M位的TRAILER序列的同源性在579％588％之間，與7_31、SF02在15079～15192NT位的TRAILER序列的同源性均為246％，與DER49／99在該段基因序列的同源性為886％。3ND08004株和經(jīng)典新城疫毒株抗原性的比較分別以弱毒疫苗LASOTA株、基因VII型代表株寧夏分離株、ND08004株和F48E8株為滅活疫苗制備相應(yīng)的抗血清。將四株病毒分別與相應(yīng)的抗血清做交叉血凝抑制試驗(yàn)CROSSHI，以次來比較不同來源病毒間的抗原同源性關(guān)系。在交叉HI中，ND08004株與LASOTA株的抗原性的同源性為7142％，ND08004株與寧夏株的抗原性的同源性為5714％，ND08004株與F48E8株的抗原性的同源性為6682％，表明ND08004株與CLASSII新城疫病毒在抗原性上存在很大差異。本研究為深入了解新城疫病毒的演化規(guī)律奠定了基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞新城疫病毒；CLASSI；生物學(xué)性狀；全基因組序列；抗原同源性；進(jìn)化分析

簡介：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文河南省7株支氣管炎病毒的分離鑒定及分子生物學(xué)特性分析姓名程亞輝申請學(xué)位級別碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師崔保安20090601河南農(nóng)業(yè)大學(xué)2009屆碩士學(xué)位論文ISOLATIONANDIDENTIFICATIONOFSEVENINFECTIOUSBRONCHITISVIRUSINHENANANDITISBIOLOGICALCHARACTISTICSSUPERVISORPROCUIBAOANMASTERCANDIDATECHENGYAHUIABSTRACTINFECTIOUSBRONCHITISISCURRENTLYONEOFTHEHIGHLYCONTAGIOUSRESPIRATORYDISEASESINCHICKENSCAUSEDBYINFECTIOUSBRONCHITISVIRUSIBVWHICHISAMEMBEROFCORONAVIRUSIBVMAINLYCAUSESDAMAGESINRESPIRATORYTISSUE，REPRODUCTIVESYSTEMANDKIDNEYANDRESULTSINDECREASEDBOTHEGGPRODUCTIONANDQUALITYANDPOORPERFORMANCEIBVISKNOWNTOHAVEHIGHPOTENTIALOFPOINTMUTATION，GENERECOMBINATION，GENEDEFICIENCYANDGENEINSERTWHICHINDUCETHEVIRUSVARIATIONTHEREAREANUMBEROFIBVSERORYPESANDTHEREISPOORERCROSSPROTECTIONBETWEENTHEM，SODIFFERENTSEROTYPESANDGENOTYPESEME唱EFREQUENTLYANDCOULDRESULTINIMMUNIZATIONFAILURERECENTLYIBHASOCCURREDFREQUENTLYINLOTSOFPOULTRYFLOCKSINHENANINSPITEOFVACCINATIONWHICHISECONOMICALLYDEVASTINGTOTHEPOULTRYINDUSTRYTHEREFORE，STUDYANDKNOWTHEPHYLOGENYANDVARIATIONONTHEISOLATESOFIBVFROMTHECOMMERCIALCHICKENSINHENANISTHEKEYFOREFFECTIVECONTROLOFTHEDISEASESAMPLESWERECOLLECTEDFROMTHECHICKENFLOCKSWITHTYPICALCLINICALSYMPTOMSOFIBFROMHEBI，PUYANG，SHANGQIU，XINZHENG，LUOYANG，LUOHE，ZUMADIANVIRUSISISOLATIONSWERECARRIEDOUTINGIN911DAYEMBRYONATEDEGGSBYINOCULATINGVIATHEALLANTOIECAVITYTHESAMPLESOFEMBRYOSWEREDETECTEDROUTINELYFORBACTERIA，NEWCASTLEDISEASEVIRUSNDVANDAVIANINFLUENZAVIRUSAIVBYCULTUREANDHEMAGGLUTINATIONHATESTTHENEGATIVESAMPLESWEREFURTHERINVESTIGATEDBYDWARFINGCHICKENEMBRYOTEST，EGGEMBRYOWEIGHTRATIOASANINDICATOROFDWARFISMINDUCEDBYINFECTIOUSBRONCHITISVIRUSAVIANPATHOLOGYGROWTHINTERFERENCEWITHNDVANDNUCLEICACIDDETECTIONCROSSBYRTPCRTHEDATAINDICATEDTHAT7ISOLATESDIDN’THEMAGGLUTINATECHICKENREDBLOODCELLSDIRECTLYBUTINTERFEREWITHNDVGROSSLESIONSWEREOBSERVEDINCHICKENEMBRYOAFTERFOURPASSAGESINCHICKENEMBRYOIBVSLGENEHYPERVARIABLEREGIONIOFALLISOLATESWERESUCCESSFULLYAMPLIFIEDBYRTPCRCOMPAREDTOTHATOFOTHERIBVREFERENCESTRAINSSHOWTHATAMINOACIDSEQUENCESHIGHERHOMOLOGYWEREJILINISOLATEDSTRAINCK／CH／LJL／07VANDBEIJINGISOLATEDSTRAINA2AMINOACIDSEQUENCESHOMOLOGYBEWEEN954％AND993％；COMPAREDWITHVACCINESSTRAINH120，H52，MA5，M41，BEAUDETTESTRAIN，ANDCONN／B13DPVCONTACTWEREBETWEENTHE742％～788％COMPAREDWITHAUSTRALIANTSTRAINANDHN99WERE693％～729％ALIABOVESHOWTHATINFECTIOUSBRONCHITISVIRUSVARIABILITYQUICKLYINHENANPROVINCEINORDERTOUNDERSTANDTHEEPIDEMICOFCHICKENIBVSTRAINSGENETICVARIATIONINHENAN

簡介：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文河南省豬2型圓環(huán)病毒分子流行病學(xué)調(diào)查姓名彭志鋒申請學(xué)位級別碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師王川慶20090601河南農(nóng)業(yè)大學(xué)2009屆碩士生學(xué)位論文INVESTIGATIONONMOLECULAREPIDEMIOLOGYOFTYPETWOPORCINECIRCOVIRUSPCV2INHENANPROVINCESUPERVISORPROF．WANGCHUANQINGMASTERCANDIDATEPENGZHIFENGABSTRACTPORCINECIRCOVIRUSTYPE2PCV2NOTNOLYBECONSIDERDEDASTHECAUSALAGENTOFPOSTWEANINGMULTISYSTEMIEWASTINGSYNDROMEPMWS，ITISASSOCIATEDWITHVARIOUSOTHERPORCINECIRCOVIRUSASSOCIATEDDISEASESPCVAD．IMMUNODEFICIENCYISAWELLKNOWNCONSEQUENCEOFPCV2INFECTION二ITOFTENISIGNOREDBECAUSEOFITSSUBCLINICALINFECTION，SOTHESTUDYOFTHEEPIDEMIOLOGYOFVIRUSSHOULDBEFURTHERINVESTIGATED．TOUNDERSTANDTHEGENETICHETEROGENEITYANDTHEORIGINOFPCV2STRAINSINHENANPROVINCE，361SAMPLESWHICHWEREBASEDONCLINICALSIGNSFORPCVADWEREDETECTEDFORPCV2DNABYPCRTEST，AND256SAMPLESWEREPOSITIVEFORPCV2DNA．SOMEPORCINECIRCOVIRUS2STRAINSWEREISOLATEDFROMPOSITIVESAMPLESINHENANPROVINCE．THECOMPLETEGENOMEOF11PORCINECIRCOVIRUS2STRAINSFROMHENANPROVINCEWERECLONEDANDSEQUENCED．THECOMPLETEGENOMEOFEACHISOLATEIS1767BPINLENGTH．THENUCLEOTIDESEQUENCESOFTHE11STRAINSOFPCV2ANDOTHER38PCV2AND2PCV1SEQUENCESPUBLISHEDINGENBANKWEREALIGNEDUSINGTHECLUSTALWVERSION1．7MULTIPLESEQUENCEALIGNMENTPROGRAM。THEPHYLOGENETICANALYSISWASPERFORMEDONTHEALIGNEDDATASETANDANUNROOTEDTREEWASCONSTRUCTEDUSINGTHEDISTANCEBASEDNEIGHBORJOININGMETHODWITHOUTCORRECTIONFORMULTIPLESUBSTITUTIONS．THERESULTSHOWEDTHATTWODISTINCTGENOTYPESOFPCV2EXISTAMERICANCLUSTERSANDEUROPECLUSTER．HOWEVER，WITHINTHEPCV一2GENOTYPE，SEVERALMINORBRANCHESTHATHAVEBEENIDENTIFIEDAPPEARTOBEASSOCIATEDWITHGEOGRAPHICORIGINS．THERESULTINDICATEDTHATTHEPCV2STRAINSINHENANWERECLOSELYRELATEDTOEACHOTHERBUTALSOTOPCV2STRAINSINOTHERAREASOFCHINA；THEPCV2STRAINSINHENANWEREINCLUDEDINTHEEUROPECLUSTER．ITCANBECONCLUEDTHATTHEPCV2STRAINSINHENANPROVINCEMAYORIGINATEDWITHEUROPEPCV2；．ALTHOUGHMINORGENETICDIFFERENCESDOEXISTAMONGPCV2STRAINSINDIFFERENTYEARS，THEGENOMEOFPCV2STRAINSINHENANPROVINCEEXHIBITEDQUITESTABLEGENETICHOMOGENEITY；THEPORCINECIRCOVIRUSASSOCIATEDDISEASEINHENANPROVINCEISMOSTLIKELYNOTDUETOTHEEMERGENCEOFANEWGENOTYPEOFPCV2．COMPARISONOFCOMPLETEGENOMESEQUENCEOF11ISOLATEDSTRAINSINDNASTARSOFTWAREWASCARRIEDOUT，THERESULTSHOWEDTHATTHEREWASA98．0％TO99．7％IDENTITYOFTHECOMPLETEGENOMICNUCLEOTIDESAMONGTHE11HENANSTRAINS．WHAT’SMORE，WEALSOANALYZEDTHE3OPENREADINGFRAMESORFL，ORF2ANDORF3ANDTHEDEDUCEDAMINOACIDSEQUENCESINCOMPUTER．SEQUENCEANALYSISREVEALEDTHATORF1GENESOFHENANISOLATEDSTRAINSEXHIBITEDTHEVARIATIONEXTENTOF97．0TO99．8％AND96．5TO99．7％INNUCLEOTIDEANDAMINOACIDRESPECTIVELY．THEORF2OFTHE1153