生防菌NEAU-Da4對大豆內(nèi)生放線菌的影響及特異放線菌鑒定.pdf

1、大豆疫霉可引發(fā)大豆疫霉根腐病，該病害廣泛分布于全球大部分產(chǎn)大豆地區(qū)，是大豆主要病害之一。生防菌NEAU-Da4是一株產(chǎn)勃利霉素的大豆內(nèi)生放線菌，對大豆疫霉病菌具有較高抑制活性。本研究以大豆內(nèi)生放線菌微生態(tài)角度出發(fā)，分別以健康大豆，NEAU-Da4和大豆疫霉同時施用大豆（處理1）以及NEAU-Da4單獨施用大豆（處理2）作為分離對象，通過對傳統(tǒng)篩選方法改良，采用七種分離培養(yǎng)基、兩種研磨方法，分別對三組植株樣本的根、葉、豆莢、豆四個部位進行

2、內(nèi)生放線菌的分離。明確不同處理大豆內(nèi)生放線菌群組成及差異，并對其進行抗大豆疫霉、大豆菌核和大豆根腐活性檢測及特異微生物鑒定。結(jié)果如下:
　　(1)健康株及處理大豆樣本中共分離得到280株內(nèi)生放線菌，其中健康植株分離102株、處理1分離89株、處理2分離89株。通過對菌株形態(tài)和培養(yǎng)特征觀察以及部分菌株16SrRNA分析，分離得到的菌株大多屬于鏈霉菌屬（Streptomyces）和小單孢菌屬（Micromonospora），其中鏈霉菌

3、占分離菌株的80％左右，是大豆內(nèi)生放線菌優(yōu)勢菌群。同時也存在少量其他種類的稀有放線菌，包括處理1分離得到的白氏菌屬（Baia）、植物生孢菌屬（Plantactinospora）和處理2分離得到的糖霉菌屬（Glycomyces）。綜合分析不同部位內(nèi)生放線菌，大豆植株根部菌群數(shù)目明顯多于豆莢、豆葉及豆。處理1豆根中篩選稀有菌株所占比例高達38.6％，處理2達30％，兩組處理均明顯高于健康植株中稀有放線菌所占比例15.7％。
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4、生物活性檢測結(jié)果顯示，32株活性株均來源于大豆根部。其中，健康株內(nèi)活性株所占比例為7.1％，處理1、處理2分別為22.8％和21.6％;處理1及處理2中活性株數(shù)目多于健康植株。
　　(3)運用多相分類學方法對NEAU-gxj18進行鑒定。通過16S rRNA序列分析確定該菌為高溫放線菌科，與其相似性最高的菌株為Geothermomicrobium terrae YIM77562T(93.35％)。該菌株溫度生長范圍為20-40℃，