胃癌BGC-823細(xì)胞中HIF-1α、HIF-2α對GLUT1、PKM2的調(diào)控作用.pdf

1、目的：檢測HIF-1α、HIF-2α、GLUT1、PKM2在胃癌BGC-823細(xì)胞中的表達(dá)情況，研究siRNA技術(shù)特異性沉默人胃癌BGC-823細(xì)胞中缺氧誘導(dǎo)因子（HIF-1α、HIF-2α）后葡萄糖載體蛋白-1（GLUT1）、M2型丙酮酸激酶（PKM2）的蛋白及mRNA表達(dá)情況，探索HIF-1α、HIF-2α對胃癌細(xì)胞內(nèi)GLUT1、PKM2的調(diào)控作用。
　　方法：實驗總共分為4組，分別是對照組、轉(zhuǎn)染Control siRNA組、

2、轉(zhuǎn)染HIF-1αsiRNA組、轉(zhuǎn)染 HIF-2α siRNA組，利用實時熒光定量 RT-PCR法及 Western-blot法檢測轉(zhuǎn)染HIF-1α siRNA、HIF-2α siRNA及Control siRNA后細(xì)胞內(nèi)GLUT1、PKM2蛋白及mRNA的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：利用RNA干擾技術(shù)能有效沉默BGC-823細(xì)胞中的HIF-1α、HIF-2α蛋白及mRN A的表達(dá)。轉(zhuǎn)染H IF-1αs iRN A、HIF-2αs iRN

3、 A后細(xì)胞內(nèi)G LU T1、PKM2在mRNA及蛋白表達(dá)水平均下降（P＜0.05），其中siRN A抑制HIF-1α后PKM2下調(diào)較siRN A抑制HIF-2α更明顯（P＜0.05），HIF-1α、HIF-2α對GLUT1的調(diào)控比較差異結(jié)果無明顯統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　　結(jié)論：研究結(jié)果提示HIF-1α和HIF-2α均可在轉(zhuǎn)錄及翻譯水平參與調(diào)控GLUT1、PKM2的表達(dá)，其中HIF-1α對PKM2起到主要調(diào)控作用，HIF-1