蜂膠黃酮的提取純化及生物學(xué)活性研究.pdf

1、蜂膠(Propolis)是工蜂采集植物樹脂等分泌物與其上顎腺、蠟腺等分泌物混合形成的膠粘性物質(zhì)。研究表明，蜂膠具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗腫瘤、輔助降血糖和降血脂等藥理學(xué)作用，而具廣泛生物學(xué)活性的黃酮類化合物是中國(guó)蜂膠中含量最高、種類最為豐富的一大類化合物。
　　蜂膠的生物學(xué)活性是由其多種化學(xué)成分相互作用的結(jié)果。然而，蜂膠的化學(xué)成分過于復(fù)雜，且受植物來源、蜂種等因素影響，這給蜂膠中功能因子的分離純化及研究應(yīng)用帶來較大困難。目前，關(guān)于

2、蜂膠中功能因子的分離提取研究較少，且在蜂膠的研究與開發(fā)中，存在著加工方法陳舊，功能因子不明確等問題。
　　基于以上背景，本研究以中國(guó)蜂膠（毛膠）為原料，對(duì)蜂膠黃酮的提取純化、成分組成、生物學(xué)活性（抗氧化、抑菌、抗腫瘤）進(jìn)行了較系統(tǒng)的研究，主要研究結(jié)果如下:
　　1.采用超聲波輔助提取法提取制得蜂膠浸膏，當(dāng)料液比為1∶10，超聲45min，95％乙醇提取3次時(shí)，總黃酮含量從毛膠中的9.41％提高到24.76％;再用硅膠柱層析法

3、純化得到蜂膠黃酮提取物，總黃酮含量達(dá)到35.02％，在此條件下，平均提取率為41.55％。經(jīng)高效液相色譜分析，蜂膠黃酮提取物中含量最高的5種黃酮單體依次為短葉松素、松屬素、短葉松素-3-乙酸酯、白楊素和高良姜素。
　　2.運(yùn)用DPPH、ABTS自由基清除法和還原能力實(shí)驗(yàn)，研究了蜂膠黃酮提取物的抗氧化能力。與蜂膠浸膏及Ve、BHT等對(duì)照相比，蜂膠黃酮表現(xiàn)出一定的體外抗氧化能力，并在統(tǒng)計(jì)學(xué)上達(dá)到顯著水平。
　　3.采用濾紙片擴(kuò)散

4、法和牛津杯法，以金黃色葡萄球菌和大腸桿菌為受試菌種，測(cè)定了蜂膠黃酮提取物和蜂膠浸膏的抑菌圈，發(fā)現(xiàn)兩者均對(duì)金黃色葡萄球菌具有良好的抑菌活性，且蜂膠黃酮提取物的抑菌效果優(yōu)于蜂膠浸膏，而對(duì)大腸桿菌均未體現(xiàn)出抑制作用。
　　4.采用CCK-8法檢測(cè)蜂膠黃酮提取物對(duì)HepG2細(xì)胞系的增殖影響，結(jié)果表明，蜂膠黃酮提取物能有效抑制HepG2細(xì)胞的增殖，具有一定的抗腫瘤效果。此外，通過細(xì)胞凋亡檢測(cè)，表明蜂膠黃酮提取物能有效誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞的凋亡