卵巢癌腹水與卵巢癌耐藥的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:
　　卵巢癌在婦科惡性腫瘤中的病死率很高。全面的細(xì)胞減滅術(shù)和術(shù)后輔以鉑類(lèi)加紫杉醇為基礎(chǔ)的聯(lián)合化療是其標(biāo)準(zhǔn)治療方案。雖然在治療上有了很大的進(jìn)步，但最終仍會(huì)出現(xiàn)疾病的復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。究其根源，主要是因?yàn)榛熌退幍漠a(chǎn)生。如何預(yù)測(cè)卵巢癌耐藥，指導(dǎo)卵巢癌患者的治療，在卵巢癌的治療研究中成為了一個(gè)熱點(diǎn)問(wèn)題。晚期卵巢癌患者常伴有惡性腹水的產(chǎn)生，并且腹水中的細(xì)胞因子與患者的無(wú)進(jìn)展生存和預(yù)后密切相關(guān)。此外，卵巢腹水可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖，并可抑制細(xì)

2、胞的凋亡。由此我們推測(cè)，卵巢癌腹水可能促進(jìn)卵巢癌耐藥的發(fā)生。因此，在本研究中我們首先檢測(cè)卵巢癌腹水對(duì)卵巢癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響，然后探究卵巢癌腹水與卵巢癌化療耐藥的相關(guān)性。
　　方法：
　　1.搜集23例卵巢癌腹水上清，用不同的腹水培養(yǎng)卵巢癌SKOV3細(xì)胞，并分為實(shí)驗(yàn)組（腹水培養(yǎng)組）和對(duì)照組。
　　2.采用MTT實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕修復(fù)實(shí)驗(yàn)和Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)卵巢癌腹水對(duì)SKOV3細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力的影響

3、。
　　3.對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的細(xì)胞行不同濃度化療藥物的處理，并采用MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組腫瘤細(xì)胞對(duì)紫杉醇敏感性的變化。
　　4.化療藥物處理24h后，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同組內(nèi)SKOV3細(xì)胞的凋亡情況。
　　5.采用Western Blot檢測(cè)耐藥蛋白在對(duì)照組、腹水處理組和腹水腫瘤細(xì)胞組的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1. MTT實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞劃痕修復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，腹水可促進(jìn)卵巢癌SKOV3細(xì)胞的增殖，并可促使細(xì)胞向

4、劃痕區(qū)域明顯遷移（P<0.05）。Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，腹水培養(yǎng)組穿膜細(xì)胞數(shù)與 SKOV3空白對(duì)照組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），腹水沒(méi)有增加SKOV3細(xì)胞的侵襲能力。
　　2.對(duì)實(shí)驗(yàn)組（腹水腫瘤細(xì)胞組與腹水培養(yǎng)組）和對(duì)照組的細(xì)胞行不同濃度化療藥物處理48h后，采用MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組細(xì)胞對(duì)紫杉醇的敏感性。結(jié)果顯示，在相同藥物濃度下，腹水腫瘤細(xì)胞組和腹水組的細(xì)胞抑制率明顯低于對(duì)照組，而腹水腫瘤細(xì)胞組又明顯低于

5、腹水組。經(jīng)腹水處理后SKOV3細(xì)胞對(duì)紫杉醇的敏感性顯著下降（P<0.05），與對(duì)照組相比，下降了約2.3倍。
　　3.流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組細(xì)胞的凋亡，結(jié)果顯示，腹水培養(yǎng)組與對(duì)照組相比，細(xì)胞凋亡率無(wú)明顯變化（P>0.05）；紫杉醇作用24h后，腹水培養(yǎng)組的凋亡率明顯低于對(duì)照組（P<0.05）。
　　4.卵巢癌腹水可以增加腫瘤細(xì)胞內(nèi)耐藥蛋白P-gp和MRP1的表達(dá)。
　　結(jié)論：
　　1.卵巢癌腹水可促進(jìn)卵巢癌SKOV3