有氧運(yùn)動(dòng)與黑果枸杞多糖改善小鼠阻塞性黃疸致肝損傷的研究.pdf

1、研究目的:
　　本課題選用阻塞性黃疸模型小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，以黑果枸杞多糖或有氧運(yùn)動(dòng)的干預(yù)方式，探討NF-κB信號(hào)通路在小鼠阻塞性黃疸致肝損傷的機(jī)理及闡述運(yùn)動(dòng)聯(lián)合黑果枸杞多糖改善肝損傷的效果，為阻塞性黃疸的輔助療法提供一種新的可行性實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和新的理論方向。
　　研究方法:
　　50只KM小鼠隨機(jī)分為5組:假手術(shù)組10只(B組）、模型組10只(M組）、枸杞組10只（G組）、有氧運(yùn)動(dòng)組10只（Y組）、枸杞+運(yùn)動(dòng)組10只（G+Y

2、組）。其中除假手術(shù)組外都以總膽管懸掛至腹壁48小時(shí)構(gòu)建小鼠阻塞性黃疸的模型。枸杞組、枸杞+運(yùn)動(dòng)組小鼠于膽總管結(jié)扎術(shù)后2天進(jìn)行黑果枸杞多糖灌胃，每天固定時(shí)間點(diǎn)，劑量為0.3 ml/次進(jìn)行灌胃1次，共6W。有氧運(yùn)動(dòng)組、枸杞+運(yùn)動(dòng)組小鼠進(jìn)行坡度為0％、速度為10m/min無負(fù)重訓(xùn)練，每天30min、每周不連續(xù)訓(xùn)練6天、保持6周的跑臺(tái)的運(yùn)動(dòng)方案。干預(yù)結(jié)束后小鼠取材前一天晚上禁食處理，取材前先進(jìn)行稱重，麻醉完全后分離出肝臟組織，應(yīng)用蘇木精-伊紅染

3、色對(duì)比小鼠肝臟組織形態(tài)及結(jié)構(gòu)的病理改變;免疫組化法檢測(cè)肝臟組織NF-κB P65、NF-α的表達(dá);Realtime-PCR技術(shù)檢測(cè)肝組織中核因子κB(NF-κB)、TNF-α、IκB激酶IKK-α，NF-κB的抑制蛋白IκB-α表達(dá);血液生化檢測(cè)血清總膽紅素(TBIL)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的含量。
　　研究結(jié)果:
　　1.血清學(xué)結(jié)果:枸杞+運(yùn)動(dòng)組TBIL、ALT、AST含量較模型組顯著降低(P＜0.0

4、1)，枸杞組、有氧運(yùn)動(dòng)組的含量較模型組也有所下降(P＜0.05)。
　　2.HE染色顯示:假手術(shù)組小鼠肝細(xì)胞索呈放射狀排列;模型組小鼠的肝細(xì)胞發(fā)生萎縮，肝索斷裂，核固縮等，間質(zhì)可見紅細(xì)胞堆積;有氧運(yùn)動(dòng)組、枸杞組可見肝小葉結(jié)構(gòu)不規(guī)則，肝索排列欠整齊，局部可見變性的脂肪細(xì)胞;枸杞+運(yùn)動(dòng)組效果最為顯著，肝小葉完整，無變形及壞死現(xiàn)象。
　　3.免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示: NF-κB P65、TNF-α在假手術(shù)組小鼠肝組織中幾乎不表達(dá)較模

5、型組顯著性降低(P＜0.01）;枸杞+運(yùn)動(dòng)組較枸杞組、有氧運(yùn)動(dòng)組、枸杞+運(yùn)動(dòng)組低(P＜0.01）。
　　4.Real-time PCR結(jié)果顯示:三個(gè)干預(yù)組與模型組比較，NF-κB、TNF-α、IKK-α mRNA表達(dá)明顯增加(P＜0.01），枸杞+運(yùn)動(dòng)組表達(dá)量高與枸杞組和有氧運(yùn)動(dòng)組(P＜0.01)，IκB-α的表達(dá)成相反趨勢(shì)。TNF-α和NF-kBP65的表達(dá)成正相關(guān)，和Iκ B-α的表達(dá)成負(fù)相關(guān)。
　　結(jié)論:
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