藥物保留灌腸防治SD大鼠急性放射性直腸炎預防慢性放射性直腸炎的研究.pdf

1、目的:通過建立SD大鼠放射性直腸炎模型，研究消痔靈、慶大霉素、谷氨酰胺、美沙拉嗪保留灌腸能否防治急性放射性直腸炎，預防慢性放射性直腸炎并探索其機制。
　　方法:1、建立SD大鼠放射性直腸炎模型1）照射方法:采用6MV-X射線局部單次大劑量照射的方法建立SD大鼠放射性直腸炎模型，SD大鼠60只，隨機分為6組，每組10只，照射劑量分別為0Gy、17.5Gy、20Gy、22.5Gy、25Gy、27.5Gy，大鼠麻醉后仰臥體位固定，照射范

2、圍自恥骨聯(lián)合至肛門，照射野面積約3×4cm，源皮距100cm，劑量率400cGy/min。2）觀察指標(1)照射后每日觀察大鼠一般征象:進食、飲水量、排便、自主活動、肛周脫毛、出血等，評分記錄。(2)照射后7d、14d各組隨機抽取5只大鼠麻醉，取血標本后處死，取直腸組織，HE染色，光鏡觀察直腸組織病理改變。3）模型評價大鼠一般情況:進食、飲水量下降，出現(xiàn)中度稀便、粘液便、血便等排便異常，直腸病理改變?yōu)橹兄囟妊装Y改變，則為造模成功。2、藥

3、物保留灌腸療效評價及機制研究1）分組及用藥:將225只大鼠隨機分為5組，每組45只，正常對照組:未照射+NS灌腸，陰性對照組:照射+NS灌腸，陽性對照組:照射+思密達、慶大霉素、地塞米松灌腸，復方灌腸1號組:照射+消痔靈、慶大霉素、谷氨酰胺灌腸，復方灌腸2號組:照射+消痔靈、慶大霉素、谷氨酰胺、美沙拉嗪灌腸，照射后1～14d每天同一時段保留灌腸。2）觀察方法及內容:(1)照射后每日觀察大鼠一般征象:進食、飲水量、排便、自主活動、肛周脫毛

4、、出血等，評分記錄。(2)照射后1W、2W、4W、6W、8W、10W、12W、14W、16W各組隨機抽取5只大鼠麻醉后取血標本后處死，取直腸組織，HE染色，光鏡觀察直腸組織病理改變變化。(3)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測各組大鼠血清中白細胞介素-6(IL-6)、白細胞介素-8(IL-8)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平。
　　結果:1、放射性直腸炎模型建立(1)盆腔局部照射給大鼠直腸造成損傷，引起放射性直腸炎，照射劑量增

5、加損傷程度增大，一般征象、病理評分增高。(2)25Gy組符合造模成功標準，選25Gy為建立放射性直腸炎模型的照射劑量。2、藥物保留灌腸療效評價及機制研究1）據實驗病理改變提示急性期約為照射后1～4W，亞急性期約為照射后5～11W，慢性期約為照射后12W及以后。2）急慢性放射性直腸炎發(fā)病率(1)陰性對照組、陽性對照組、復方灌腸1號組、復方灌腸2號組的急性放射性直腸炎發(fā)病率分別為95.56％、91.11％、88.89％、86.67％，陽性對

6、照組、復方灌腸1、2號組的發(fā)病率與陰性對照組比較無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。藥物保留灌腸并未降低急性放射性直腸炎的發(fā)病率。(2)陰性對照組、陽性對照組、復方灌腸1號組、復方灌腸2號組12W后各組總的慢性放射性直腸炎發(fā)病率分別為40％、20％、13.33％、6.67％，復方灌腸2號組的慢性放射性直腸炎發(fā)病率與陰性對照組比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，提示復方灌腸2號組可有效地降低慢性放射性直腸炎發(fā)病率。3）一般征象評分:陽性對照組、復

7、方灌腸1號組、復方灌腸2號組與正常對照組、陰性對照組比較，均有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，提示藥物保留灌腸可有效地治療急性放射性直腸炎，減輕急性、亞急性、慢性期大鼠的癥狀。復方灌腸1、2號組與陽性對照組比較，總體上有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，提示復方灌腸1、2號組防治放射性直腸炎的療效優(yōu)于陽性對照組。復方灌腸1、2號組之間比較無統(tǒng)計學差異，但各時間點評分復方灌腸2號組均低于復方灌腸1號組，提示復方灌腸2號組療效可能更佳。4）病理評分陽

8、性對照組、復方灌腸1號組、復方灌腸2號組與正常對照組、陰性對照組比較，均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，提示藥物保留灌腸可有效地治療急性放射性直腸炎，減輕急性、亞急性、慢性期放射性直腸炎的炎癥、損傷、分級程度。復方灌腸1、2號組與陽性對照組比較有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，提示復方灌腸1、2號組防治放射性直腸炎的療效優(yōu)于陽性對照組。復方灌腸1、2號組之間比較無統(tǒng)計學差異，但總體上各期評分復方灌腸2號組均低于復方灌腸1號組，提示復方灌腸2號

9、組療效可能更好。5）大鼠血清IL-6、IL-8、TNF-α水平陽性對照組、復方灌腸1號組、復方灌腸2號組與正常對照組、陰性對照組比較，均有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，提示局部照射后引起直腸炎，致大鼠血清IL-6、IL-8、TNF-α增加，藥物保留灌腸防治放射性直腸炎其機制可能與降低大鼠血清IL-6、IL-8、TNF-α的表達有關。復方灌腸1、2號組與陽性對照組比較有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，提示復方灌腸1、2號組降低大鼠血清IL-6、

10、IL-8、TNF-α水平的效果優(yōu)于陽性對照組。復方灌腸1、2號組之間比較，無統(tǒng)計學差異，但總體上復方灌腸2號組大鼠血清IL-6、IL-8、TNF-α水平均低于復方灌腸1號組，提示復方灌腸2號組的效果可能更好。
　　結論:1、采用6MV-X射線局部單次大劑量(25Gy)照射的方法可成功建立放射性直腸炎模型。2、消痔靈、慶大霉素、谷氨酰胺、美沙拉嗪保留灌腸可提高治療急性放射性直腸炎的療效，減輕急性放射性直腸炎的炎癥、損傷、分級程度。3