蛋白質非共價鍵復合物和天然產物的質譜方法研究.pdf

1、中南民族大學碩士學位論文蛋白質非共價鍵復合物和天然產物的質譜方法研究姓名：趙文杰申請學位級別：碩士專業(yè)：@指導教師：王獻20100524蛋白質非共價鍵復合物和天然產物的質譜方法研究2處理后即可進行GCMS分析，否則，需要運用LCMS進行分析。LCMS一般分析樣品的水、甲醇或乙腈溶液[3]，主要得到樣品的分子量信息，串聯(lián)質譜儀還能得到部分結構信息，運用高分辨質譜儀還能夠得到化合物的結構式。測定非極性樣品時，可以運用APCI源，而測定極性樣

2、品一般運用ESI源。本章主要闡述質譜方法特別是ESIMS方法應用于蛋白質和配體分子形成非共價復合物的研究，重點介紹了ESIMS及GCMS的基本原理及其發(fā)展應用，還介紹了天然產物多糖及其GCMS分析等。1.2蛋白質非共價鍵復合物及ESIMS1.2.1蛋白質非共價鍵復合物生物分子的弱相互作用、蛋白質結構和生物功能的關系是科研工作者們普遍關注的研究方向。而蛋白質間或蛋白質與其它分子的非共價鍵作用如抗原與抗體的結合、藥物分子與靶點蛋白質的結合以

3、及酶與底物的結合等在許多生物化學過程中起著重要作用[47]。非共價鍵作用有四種主要類型:氫鍵、疏水作用、分子間作用力、金屬鍵。測定非共價鍵結構的方法主要有光譜法(紅外、UV、熒光、圓二色譜法等)、色譜法、XRay晶體衍射法、核磁共振（NMR）以及超離心技術等。光譜法可給出蛋白質及復合物的三維結構的變化信息而X射線晶體衍射、核磁共振分別提供了固相、液相中生物大分子及復合物的高精度結構信息。但靈敏度差、樣品量大、費耗時并且需要純度較高的樣品

4、等是這些技術的缺陷[6]。到目前為止運用ESIMS觀測到的蛋白質非共價鍵復合物有蛋白質蛋白質[89]、蛋白質配體[1015]及蛋白質金屬離子[1618]、蛋白質寡核苷酸[19]、蛋白質雙鏈DNA[20]等。“軟”電離電噴霧離子化技術被廣泛應用于蛋白質非共價鍵復合物的研究[7]。1.2.2ESI原理及特點很久以來，質譜一直被用來分析小分子化合物。20世紀80年代，兩個獨特的應用領域向實用質譜技術提出了挑戰(zhàn)：（1）分析大分子化合物；（2）迫