殼聚糖修飾對陽離子脂質體生物學性能的影響.pdf

1、利用本課題組合成的陽離子類脂，加入不同助劑制備陽離子脂質體。分析其與質粒的結合能力以及復合物形態(tài)。進行細胞的體外轉染，研究轉染效率和細胞毒性。
　　 采用薄層分散和超聲法制備陽離子脂質體。瓊脂糖凝膠電泳分析陽離子脂質體與質粒pGFP-N2(報告基因)DNA的結合能力，原子力顯微鏡檢測復合物的形態(tài)。以商品試劑Lipofectamine2000為對照，利用脂質體/DNA復合物轉染MCF-7細胞和HeLa細胞，熒光顯微鏡觀察其基因轉染

2、效率。進行了轉染條件優(yōu)化，利用MTT法評價轉染試劑的毒性。原子力顯微鏡分析表明，脂質體/DNA復合物顆粒的表面不光滑，有一定的黏連性，能較規(guī)律的分散在云母片上。而殼聚糖修飾脂質體/DNA復合物顆粒的表面相對光滑。加入少量或等量DOPE，延滯DNA能力增強，DOPE量多時反而減弱；加入蔗糖酯延滯能力變化不明顯；殼聚糖修飾的脂質體，延滯DNA的能力明顯增強。加入蔗糖酯后，轉染效率下降；添加DOPE后，轉染效率升高；殼聚糖修飾的脂質體轉染效率