臍橙果實(shí)成熟過程中主要香氣物質(zhì)含量的變化及其關(guān)鍵基因的表達(dá).pdf

1、近年來(lái)，對(duì)柑橘果實(shí)香氣物質(zhì)的研究主要集中在發(fā)現(xiàn)新的香氣物質(zhì)和建立新的檢測(cè)方法等方面。盡管在柑橘中已鑒定出200多種香氣物質(zhì)，但有關(guān)這些物質(zhì)的生物合成途徑及其調(diào)控機(jī)制的研究報(bào)道卻很少。為了探索柑橘果實(shí)香氣物質(zhì)的生物合成與其關(guān)鍵基因之間的關(guān)系，本論文以紅肉臍橙(Citrus sinensis Osbeck cv．CaraCara)和華盛頓臍橙(Citrus sinensis Osbeck cv. Washington)果實(shí)為研究對(duì)象，采用固

2、相微萃取(SPME)和氣相色譜、質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)技術(shù)對(duì)實(shí)驗(yàn)材料的香氣成分進(jìn)行了分析，克隆了柑橘果實(shí)香氣代謝過程中的3個(gè)關(guān)鍵基因（牻牛兒基焦磷酸合成酶基因Csgpps、d-檸檬烯合成酶基因Csdlims和芳樟醇合成酶基因Cslinas），并通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(RT-qPCR)對(duì)這三個(gè)基因做了表達(dá)分析。主要研究結(jié)果如下：
　　 1．以環(huán)己酮為內(nèi)標(biāo)，d-檸檬烯為標(biāo)樣，利用SPME-GC-MS定量法測(cè)定了紅肉臍橙和華盛頓臍

3、橙不同成熟期果皮和果肉中d-檸檬烯的含量。結(jié)果表明：紅肉臍橙果皮d檸檬烯呈現(xiàn)先降低后升高最后再降低的變化趨勢(shì)；果肉d-檸檬烯在早期變化不大，后期含量迅速升高。華盛頓臍橙果皮和果肉d-檸檬烯則呈現(xiàn)出幾乎一致的變化趨勢(shì)，即先升高后再降低的變化趨勢(shì)。這表明不同的柑橘品種其香氣物質(zhì)的變化規(guī)律不同，相同品種不同組織中香氣物質(zhì)呈現(xiàn)出相同或不同的變化規(guī)律。
　　 2．以環(huán)己酮為內(nèi)標(biāo)，利用SPME-GC-MS半定量法測(cè)定了紅肉臍橙和華盛頓臍橙不

4、同成熟期果皮和果肉中主要香氣物質(zhì)的含量變化。結(jié)果表明：紅肉臍橙果皮中的主要香氣物質(zhì)α-蒎烯、β-月桂烯、γ-萜品烯在果實(shí)成熟過程中的變化趨勢(shì)相似，即在花后210d時(shí)含量達(dá)最高值，β-芳樟醇的變化趨勢(shì)則與上述3種物質(zhì)相反。紅肉臍橙果肉中的主要香氣物質(zhì)α-蒎烯、β-月桂烯、γ-萜品烯、巴倫西亞橘烯在果實(shí)成熟發(fā)育過程中也呈現(xiàn)相似的變化趨勢(shì)，在花后220d時(shí)含量均迅速降低為零，果肉中沒有檢測(cè)到β-芳樟醇這種物質(zhì)。華盛頓臍橙果皮中α-蒎烯、β-月

5、桂烯和γ-萜品烯均呈現(xiàn)直線升高的變化趨勢(shì)，β-芳樟醇則在花后200d到210d期間略有下降。果肉中α-蒎烯、β-月桂烯和γ-萜品烯在花后190d到200d期間均呈現(xiàn)迅速降低后保持不變的趨勢(shì)，巴倫西亞橘烯的變化趨勢(shì)則與上述3種物質(zhì)不同，果肉中也沒有檢測(cè)到β-芳樟醇這種物質(zhì)。
　　 3．利用RT-qPCR技術(shù)對(duì)克隆到的關(guān)鍵酶基因進(jìn)行了表達(dá)分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)紅肉臍橙和華盛頓臍橙果肉成熟過程中Csdlims基因的上調(diào)表達(dá)和下調(diào)表達(dá)的變化趨勢(shì)