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1、”,:I?!猰——【1口&——一t㈣I;15=』M一中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)位論文指導(dǎo)救■妊2:——盟—旦』生—jL_圭t———一生盤掛些盤掛盤生』且』遜業(yè)!i—o請(qǐng)咩位蛆別————巫——主————一——學(xué)剎、專業(yè)2赫:韭盟—翌———————,1競(jìng)方向——且—盟—叢—生—墊—————一論文答辯日期:』業(yè)£生旦d沿置提交12期。業(yè)必盟學(xué)位樁干單位和日期—主蟲(chóng)堡些盤撞盤生—!旦旦出—且菩$圣m喪王席:——,—生一薹—型丑蠱且_一產(chǎn)雙酶假單胞桿菌
2、的誘變選育及發(fā)酵條件的優(yōu)化ABSTRACTDPhenylglycinewhichcanbeusedtoproduce131actamantibioticsandcephalosporinlikeamoxicillincteisakindofmostimportantpl“ecugsorItisusuallyproducedthroughthreewaysbutthemosteconomicwayisproducingbybiocnzym
3、ePseudomonaspuadawhichisresearchedinthisdissertationcanexcretetwoenzymesatthesametime:DhydantoinaseandDcarbamoylaseThesetwoenzymescancatalyseDhydrocyphenylhydantointoD—PhenylglycinedirectlythewildPseudomonasputidaproduce
4、slowenzymeactivitythestudymainlyinducedthewildstrainstoproducehighenzymeactivityTheindexesofstartingbacteriawasvalidatedThroughthecomparisonofdefinitionthegrowthculwewasmakeoutAndtheresultsshowed:thebest婦ofmutagenesiswas
5、after24hcultureofbactexinTheordc:rnessbetweenenzymeactivityandgrowthcurvewasanyalysedbyPDAB,whichshowedthattheenzymeactivitywouldbehigherattheendofthelogarithmtimeAndtheenzymeactivityofstartingbacteriawas0107p/mLwhichwas
6、measuredbyHPLCInthisstudyUV、MW、USandtheircombinationWeI℃usedtOmutagcnizethewildstrains,thenthenewbacteriawaKescreenedoutwithsubstrateanalogueFinallyseveralnewbacteriawerescreenedoutwhichexcretemo∞D(zhuǎn)hydantoinaseandDcarbamo
7、ylaseAmongthosenewbacteriathetotalenzymeactivityofFUMS06canreach0440肚whichenhanced31121%comparedwiththestartingbacteriaTheculturemodi啪andthefermentationconditionswereoptimizedbasedontheformerculturemeg[imandformalfermate
8、tionconditionsTheresultsshowedthattheenzymeactivityofFUMS06enhancedmoreAndthebestcompositionwasasfollowing:cornsteepliquor3O%,glucose25%,revuⅢse毗35%NaCl03%TheFUMS06grewwell011theoptimizedmediumcompared稍ththeformalmediumT
9、heenzymeactivityenhanced118%Thebestfermentationconditionwasasfollowing:Theinoculumamount10%Joadingamount40mLculmretime26hinitialpH74ThefinallyresultoffermentationwasidealicandtheactivityofFUMS06canremainafterseveralgener
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