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文檔簡介
1、氨基酰化酶是一種能專一性水解DL-氨基酸的胞外酶,可將DL-氨基酸拆分獲得D-氨基酸和L-氨基酸,因而在食品、醫(yī)學等領(lǐng)域有著重要應(yīng)用。
本論文采用實驗室保藏的米曲霉A0菌株作為出發(fā)菌株,將其制備成原生質(zhì)體后進行紫外-氯化鋰誘變,最終篩選出一株氨基?;府a(chǎn)量高且遺傳穩(wěn)定性好的誘變株A15。確定了該菌株制備原生質(zhì)體的最佳條件:菌齡為30h,復合酶配比為1.5%蝸牛酶,1%溶菌酶,1.5%纖維素酶,酶解反應(yīng)溫度為28℃,酶解反應(yīng)時間
2、為3h,0.8 mol/L NaCL滲透壓穩(wěn)定劑。在此條件下,米曲霉A0菌株的原生質(zhì)體形成率和再生率都較為理想。確定了紫外-氯化鋰誘變的最佳條件:誘變時間為80 s,誘變強度為15 cm,氯化鋰濃度為0.9%。在功率為15W的紫外燈的照射下,按以上條件進行誘變處理。經(jīng)過初篩選出15株變色圈直徑與菌落直徑比值大于出發(fā)菌株的誘變株,再經(jīng)過復篩測定酶活力,篩選出5株酶活力明顯比出發(fā)菌體提高的菌株,其中突變株A15的酶活力比出發(fā)菌株A0的酶活力
3、提高了95.4%,高達589.7 U/g。
研究了碳源、氮源、碳氮比、料水比、接種量、表面活性劑、無機鹽、初始pH及培養(yǎng)溫度等單因素對高產(chǎn)氨基?;妇甑挠绊懀蓪嶒灲Y(jié)果可知:最佳碳源是麥麩,最佳氮源是豆粕,最佳碳氮比是8∶2,最佳料水比是1∶1,最佳接種量是8%,最佳表面活性劑是0.1%的吐溫-80,最佳無機鹽是MgSO4,最適初始pH是7.0,最適培養(yǎng)溫度是30℃。
根據(jù)單因素試驗結(jié)果,進行PB實驗及BBD實驗,
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