農(nóng)抗120產(chǎn)生菌誘變育種及發(fā)酵條件的優(yōu)化.pdf

1、刺孢吸水鏈霉菌北京變種(S．hygrospinosus Var beijingensis)是農(nóng)抗120的產(chǎn)生菌，該鏈霉菌于1957年由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院七肥所劉守初等人從土壤中分離得到，至今國外國未見報道。農(nóng)抗120通過20多年的應(yīng)用，充分證明其是種一對農(nóng)作物真菌性病害防治效果好，對環(huán)境友好的抗生素農(nóng)藥。但是長期以來，該產(chǎn)品由于發(fā)酵水平較低，造成使用成本高，難以成為老百姓都用得起的好藥。因此，有必要對該鏈霉菌進(jìn)行菌種選育，篩選出產(chǎn)素優(yōu)良的突

2、變菌株，并對發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化，以提高發(fā)酵水平，使得該產(chǎn)品得到進(jìn)一步的應(yīng)用，更好的為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)服務(wù)。
　　 本研究首先確定了出發(fā)菌株，然后對該菌株進(jìn)行了紫外線、羥胺、紫外線+羥胺及微波照射等誘變育種研究，分析了各誘變因子對該菌株的誘變效應(yīng)。在得到高產(chǎn)菌株之后，對其進(jìn)行了培養(yǎng)條件的優(yōu)化，并且對其培養(yǎng)條件中的幾個重要因素進(jìn)行了篩選，得到了該高產(chǎn)菌株的最佳培養(yǎng)條件。最后進(jìn)行了發(fā)酵罐生產(chǎn)驗證。其主要研究結(jié)果如下：
　　 1．得到的出

3、發(fā)菌株08號，其搖瓶發(fā)酵效價達(dá)到13702μg/ml。培養(yǎng)7天后菌落呈灰白色，表面有褶皺。
　　 2．通過紫外線誘變、羥胺誘變、紫外線+羥胺聯(lián)合誘變及微波輻照誘變，初篩得到62個正突變菌株。傳代六次后，獲得9個高產(chǎn)菌株，分別編號為UV—HA—223、UV—HA—392、UV—HA—393、UV—HA—398、UV—HA—462、UV—HA—469、UV—HA—501、MM—116和MM—556。這9個菌株較出發(fā)菌株，搖瓶發(fā)酵產(chǎn)素

4、提高都在4.9％以上，其中尤以MM—556最高，搖瓶復(fù)篩時發(fā)酵水平達(dá)到16000μg/ml，較出發(fā)菌株搖瓶發(fā)酵水平提高21.2％。在這四種誘變處理中，僅在紫外線+羥胺誘變和微波誘變中篩選到正突變株，其中紫外線+羥胺誘變得到的正突變株多，微波誘變得到了更為高產(chǎn)的菌株。
　　 3．在獲得高產(chǎn)菌株MM—556后，首先進(jìn)行了單因子試驗，隨后采用L16(45)正交設(shè)計表對其培養(yǎng)基進(jìn)行了優(yōu)化，最適宜培養(yǎng)基為A4B4C2D3E4，即玉米粉4％